单卫民凝血培训ppt课件

1、From the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H O出凝血基础知识培训出凝血基础知识培训1;.概述概述 血液止血过程涉及到血管、血小板、凝固系统、抗凝系统、纤溶系统血管、血小板、凝固系统、抗凝系统、纤溶系统。此外还与机体自身的防护，如免疫应答、细胞的吞噬作用、激肽生成过程有关。 简单的说，当血管破损，血小板聚集，凝血酶生成，交联纤维蛋白在聚集血小板的基础上形成，巩固用于堵住伤口堵住伤口的塞子。继而激活纤溶系统，溶解多余的纤维蛋白，避免形成血栓栓塞，最终修复破损的血管，以维持血管的完整和通畅维

2、持血管的完整和通畅。From the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H O2;.出凝血的过程出凝血的过程血小板RBC出血出血黏附黏附聚集聚集凝固反应凝固反应初级血栓二级血栓内皮层血管内皮受损纤维蛋白凝块From the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H O3;.出凝血的过程出凝血的过程凝血酶黏附和聚集纤维蛋白止血块血小板的黏附和聚集0 min10 min5 min二级止血初级止血凝固From

3、the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H O4;.Activated plateletsActivated plateletsResting plateletsResting platelets血小板的结构血小板的结构From the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H O5;.血小板的生理功能血小板的生理功能 血小板是一个多功能的无核细胞，其主要生理作用是参与正常的血栓与止血。血小板的功能主要

4、包括粘附(adhesion)、聚集(aggregation)、释放(release)反应以及其他凝血功能。此外，血小板还参与各种炎性、免疫反应及保持血管完整性的功能。l血小板粘附血小板粘附：是指血小板粘着在受损血管内皮胶原上的过程。这是血小板参与止血反应的第一步，此过程需要有vWF和血小板膜GPIb受体参与。l血小板聚集血小板聚集：是指血小板之间相互粘附的过程。此过程需要有纤维蛋白原和血小板膜GPIIb/IIIa受体参与。l血小板释放血小板释放:是指在诱导剂的作用下储存在血小板内的颗粒包括-颗粒、致密颗粒或溶酶体颗粒中的许多物质释放到血小板外的过程。From the desk of K .S

5、.H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H O6;.一期止血一期止血 最先是由血管受损后引起血小板的的生理反应以阻止出血 机制 -血小板经凝血酶等刺激而活化 -血小板经 GPIb 和 von Willebrand 因子 (VWF)之间的交互 作用黏附变形 -血小板颗粒物质的释放以补充更多血小板到受损部位 -血小板的聚集在GPIIb/IIIa和纤维蛋白原交互作用下以形成 最初的栓子 引发二期止血 (凝固蛋白)From the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the d

6、esk of K .S .H O7;.一期止血的检测实验一期止血的检测实验出血时间出血时间 - Assesses all components of Virchows triad -体内测试 直接在患者身上执行 -使用替代的工具进行“体外”出血时间的检测血小板聚集血小板聚集 -检测血小板聚集的能力，通过体外添加不同的诱导剂 -主要用于评价血小板糖蛋白 IIb/IIIa 受体的功能 Von Willebrand Von Willebrand 因子因子 (VWF) (VWF) 测试测试 -测定VWF的数量和功能, 协同血小板在受损部位发挥黏附的作用 -评价VWF 与血小板糖蛋白 Ib 受体交互作用

7、的功能From the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H O8;.二期止血二期止血血液凝固过程血液凝固过程机制机制 -凝血因子相继激活形成凝血酶 -凝血酶使纤维蛋白原形成纤维蛋白 -纤维蛋白加固在一级止血中形成的血小板栓子成为更稳固的 血栓块 (二级止血栓子) 防止受损部位进一步的血液流失防止受损部位进一步的血液流失From the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H O9;. 血液凝固简称凝血

8、，是血液由液体状态转变为凝胶 状态的过程。此过程是由多种酶和辅助因子参与的复 杂过程。其核心是生成凝血酶，后者将纤维蛋白原转 变成纤维蛋白。 当凝血活动达到止血目的时，机体迅速启动抗凝系 统阻止凝血继续下去，避免造成血管阻塞。 凝血和抗凝两者间的动态平衡是正常机体维持体内 血液液体流动状态和防止血液丢失的关键。 凝血机制凝血机制From the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H O10;.血液中的凝血因子血液中的凝血因子From the desk of K .S .H OFrom the de

9、sk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H O11;. 凝血因子l 组织因子组织因子(TF)：凝血过程中的启动因子。血管内皮细胞、神经 胶质、血管平滑肌和上皮细胞都能表达TF。因此能在血管和器 官外围形成保护，只要血液漏出血管，TF就会启动凝血过程。lVII因子因子(F-VII)：在血管损伤时，VII因子与TF结合启动凝血过程。 也许是因为在血浆中没有有效的抑制物中和游离的F-VIIa，所 以近些年来，基因重组的F-VIIa被导入临床作为一种治疗手段， 1，用于血友病治疗，血友病患者有针对外源性F-VIII的抑制物 时；2，更为广泛的出血问题和一般外科干预治

10、疗。l凝血酶原凝血酶原(F-II)：凝血酶原被F-X-F-V复合物激活后，可以激活很 多蛋白酶。包括：促凝因子F-V、F-VIII、F-XI，抗凝因子PC，一 系列跨膜激活蛋白酶受体（PARs），凝血酶激活纤溶抑制物（TAFI）。12;. 凝血因子lVIII因子因子(F-VIII)：VIII因子是F-IXa激活F-X的必要辅助因子，由凝血 酶或F-Xa激活，由APC灭活，缺乏VIII因子导致血友病A。lIXIX因子因子( (F F-IX)IX)：缺乏IX因子会导致血友病B，因为F-IX的主要功 能是参与F-X的激活，TF-F-VIIa或F-XIa能激活F-IX。lXIXI因子因子( (F F-

11、XI)XI)：XI因子由凝血酶激活，以前认为XI因子由接触 因子XII因子激活。但现在的观点是XI因子由凝血酶反馈激活， 继而激活IX因子、X因子，从而大量激活凝血酶，使凝血过程进 入放大期。l血管性血友病因子血管性血友病因子( (vWF)vWF)：vWF由内皮细胞、巨核细胞、血小板合 成，并在各种刺激(包括凝血酶的刺激)下释放入血。血液循环中 也有一定量的vWF(由内皮细胞释放)。vWF的两个主要功能： 1，作为VIII 因子的载体并稳定VIII 因子；2，诱导血小板GPIb 粘附在胶原纤维上。13;.经典的凝血机制经典的凝血机制14;.血凝瀑布学说血凝瀑布学说15;. 当缺乏F-XII、激

12、肽释放酶原、高分子量激肽原时，体外实验会显示凝血时间延长，但机体为什么没有出现出血倾向？ 为什么缺乏F-VIII或F-IX时，机体会出现严重的出血，而外源凝血途径不能阻止出血？ 为什么缺乏F-XI引起的出血程度要比F-VIII或F-IX因子缺乏轻得多？体外试验时，为什么凝血酶爆发性生成前有一个延缓期？From the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H O经典理论产生的几个问题经典理论产生的几个问题16;.组织因子途经组织因子途经 血管血管损伤血管损伤TFTF/aaa凝血酶原凝血酶原aa凝血酶凝

13、血酶纤维蛋白原纤维蛋白原纤维蛋白纤维蛋白XIXIaTFPI(-)Vaaa17;.u 外源性的因子在组织因子的结合下既可激活因子，又可激活内源性的第因子，从而打破了内源与外源的界限。u 因子缺乏时并不引起出血，这说明第因子并不一定只被因子激活，现已证明本身具有自身激活作用。u 凝血酶（因子）也可激活因子，原来认为只有因子才能激活因子。u TF被激活并与因子结合后会被组织因子途径抑制物（TFPI）所抑制；后者已成为一种新型抗凝剂。是组织因子、 、因子的天然抑制物。传统的凝血途径的修改传统的凝血途径的修改18;. 组织因子联合FVIIa 在创伤处启动凝固 少量形成的凝血酶激活血小板 凝血因子在血小板

14、表面形成复合物 大量形成的凝血酶使纤维蛋白原转化成纤维蛋白 纤维蛋白加固了血小板栓子 (一期止血) 并使止凝血完成更新的二期止血更新的二期止血From the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H O19;.From the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H O20;.内源途径XIIXIIXVIII共同XVII途径APTT内源+共同纤维蛋白原纤维蛋白凝块VII外源途径组织因子PT外源+共同From

15、 the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H O实验室检查实验室检查TTFbg21;.p 血液收集于枸橼酸钠抗凝的试 管中p 由于枸橼酸钠结合了钙使血液 保持流动，可用于检测凝固功 能。p 将试管经过离心分离血浆层 (白细胞 & 血小板) 和红细胞p 用于测试的血浆 - 血浆含有纤维蛋白原 - 血清不含有纤维蛋白原p 血浆是“乏血小板的” 血小板层留 在淡黄色层里 血浆淡黄色层红细胞层样样 本本From the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H

16、OFrom the desk of K .S .H O22;.PT的的检测检测原理原理 in Blood in PlasmaPT 试剂试剂FibrinIIIExtrinsic System测测量凝血量凝血时间时间without组织组织因子因子Calcium (Ca2+)without正常范正常范围围10-14 secIX37癈癈Ca2+, PLCa2+, PLXIIIXIIXIXVIIIVIIVIVIIIIIIIVIXXIIIXIIXIXVIIIVIIVIVIIIIIIVIIIIIXVIIIBloodSamplingTrisodiumCitrateFrom the desk of K .S .

17、H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H O23;.演算纤维蛋白原演算纤维蛋白原DODDOD1DOD2DOD3500mg/dl250mg/dl125mg/dlDOD3DOD2DOD10125 250500Mg/dlFIB时间DODFIBFIBFIBDOD x FIBFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H O24;.PTPT单位的表达方式单位的表达方式1、以秒(s)表示:参考值为11-14s。待测者的结果超过正常对照3

18、s以上有临床意义。2、凝血酶原时间比值(PTR)：待测血浆的凝血酶原时间与正常血浆凝血酶原时间的比值。参考值为0.82-1.15。3.国际标准化比值(INR):即PTRISI。参考值为0.8-1.5。ISI为国际敏感度指数。指数越大，组织凝血活酶的敏感性越低。4.活性%From the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H O25;.From the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H O26;.A

19、PTT的的检测检测原理原理 in Blood in PlasmawithoutwithoutwithoutIXXIIIXIIXIXVIIIVIIVIVIIIIIIIXXIIIXIIXIXVIIIVIIVIVIIIIIIAPTT ReagentActivatorPLIntrinsic SystemMeasure Clotting TimeEllagic acid, silica etc.Calcium (Ca2+)Normal Range20-40 secCaCl2IVPhospholipidFibrin37癈癈XIIIXXIVIIIXVIIICa2+, PLCa2+, PLBloodSampl

20、ingTrisodiumCitrateFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H O27;.From the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H O28;.p 若仅 APTT 延长，最可能的缺乏 是 Factors XII, XI, IX 或 VIIIp 若仅 PT 延长，最可能是 Factor VII 缺乏 p 当两种初筛实验均延长时，缺乏 的是共同途径的 Factors X, V,

21、II和 I.凝血疾病的筛查凝血疾病的筛查APTTPTXIIXIIXVIIIXVIIIVIIFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H O29;.延长的延长的 PT / APTTPT / APTT PT PT延长延长 APTTAPTT正常正常 PT PT正常正常 APTTAPTT延长延长 PT PT延长延长 APTTAPTT延长延长缺乏缺乏VIIVIIVIIIVIIIX XVitamin KVitamin KIXIXV VXIXIII IIXIIXIII I接触因子接触因子Vitamin

22、 KVitamin K延长由于延长由于Warfarin Warfarin 治疗治疗肝素肝素WarfarinWarfarin 治疗治疗抑制物抑制物 ( (特异的或特异的或 LA)LA) 肝脏疾病肝脏疾病From the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H O30;.Fbg的的检测检测原理原理 (Clauss方法方法) in Blood in PlasmawithoutwithoutwithoutIXXIIIXIIXIXVIIIVIIVIVIIIIIIIXXIIIXIIXIXVIIIVIIVIVII

23、IIIIThrombin ReagentFibrinMeasureClotting TimeThrombinNormal Range180-360 mg/dLCalculated forFibrinogen concentration37癈癈IIIBloodSamplingTrisodiumCitrateFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H O31;.From the desk of K .S .H OFrom the desk of K .S .H OFrom the desk

24、 of K .S .H O32;. in Blood in PlasmawithoutwithoutwithoutIXXIIIXVIIIVIIIIIIIIIXXIIXIXVIIVIVIIIIThrombin ReagentFibrinThrombin37癈癈IIIBloodSamplingTrisodiumCitrate凝血酶时间凝血酶时间(TT)(TT)测定测定Measure Clotting TimeNormal Range16-18 sec凝血酶时间 (TT)p 评估血浆中纤维蛋白原的功能p TT 凝固时间延长 - HEPARIN - 直接凝血酶抑制剂 - 低纤维蛋白原血症 - 纤维蛋白

25、原结构异常 - 纤维蛋白降解产物升高33;.凝固与抗凝凝固与抗凝: : 一种平衡的行为一种平衡的行为产生凝血酶抑制凝血酶形成From the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H O34;.凝固抑制凝固抑制外源途径XII组织因子纤维蛋白原纤维蛋白凝块内源途径XIIXVIIIXIIVII抗凝血酶蛋白 C 系统V35;.抗凝系统抗凝系统IIIIIIIVVVIIVIIIIXXXITFPIPSPCAT-IIIPLAPAXIIIFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K

26、 .S.H OFrom the desk of K .S.H O36;.抑制物抑制物p 天然抑制物 - 蛋白 C (活化的) 和蛋白 S 抑制凝血因子 FVIIIa 和 FVa - 抗凝血酶(AT) 抑制 FXIa, FIXa, FXa, FVIIa/TF, 和凝血酶 (IIa)p 病理抑制物 - 获得或自体免疫抗体对应特异性凝固因子p 药物抑制剂 - 肝素和低分子量肝素 - Warfarin - 直接凝血酶抑制剂From the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H O37;.抗凝血酶抗凝血酶(AT)

27、(AT) 抗凝血酶抗凝血酶(antithrombin(antithrombin，ATAT ) )由肝脏、血管内皮由肝脏、血管内皮 细胞、巨核细胞合成，是依赖肝素的丝氨酸蛋白酶抑细胞、巨核细胞合成，是依赖肝素的丝氨酸蛋白酶抑 制剂，是人体内主要的血浆抗凝物质，尤其对凝血酶制剂，是人体内主要的血浆抗凝物质，尤其对凝血酶 的灭活能力占所有抗凝蛋白的的灭活能力占所有抗凝蛋白的70%70%80%80%。 ATAT与丝氨酸蛋白酶作用的活性位点位与丝氨酸蛋白酶作用的活性位点位Arg393,Arg393, ser394 ser394处处, ,蛋白酶攻击该键使其裂解并引起蛋白酶攻击该键使其裂解并引起ATAT变构

28、，变构， 从而形成从而形成ATAT与酶与酶1 1：1 1复合物复合物, ,这种共价结合是不可逆这种共价结合是不可逆 的的, ,肝素作用于肝素作用于ATAT的赖氨酸残基从而大大增强的赖氨酸残基从而大大增强ATAT的抗的抗 凝酶活性（凝酶活性（20002000倍以上倍以上）。From the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H O38;.肝素和抗凝血酶的抑酶作用肝素和抗凝血酶的抑酶作用Antithrombin ThrombinFrom the desk of K .S.H OFrom the desk o

29、f K .S.H OFrom the desk of K .S.H OHeparin39;.Heparin 蛋白蛋白C C系统是人体内另一重要的抗凝系统，它是通过一组蛋系统是人体内另一重要的抗凝系统，它是通过一组蛋 白的相互作用，最终使因子白的相互作用，最终使因子V V和和灭活，从而起到抗凝作用。灭活，从而起到抗凝作用。 蛋白蛋白C C系统除蛋白系统除蛋白C C（protein Cprotein C，PCPC）外，还包括：）外，还包括： 蛋白蛋白S S（protein Sprotein S，PSPS）、）、 血栓调节蛋白（血栓调节蛋白（thrombomodulinthrombomodulin，

30、TMTM）、）、 活化蛋白活化蛋白C C抑制物抑制物(activated protein inhibitor(activated protein inhibitor APCI) APCI) 内皮细胞蛋白内皮细胞蛋白C C受体（受体（endothelial protein C receptorendothelial protein C receptor， EPCREPCR）。）。 蛋白蛋白C C系统系统From the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H O40;.蛋白蛋白C C系统系统 PCPC是由肝

31、细胞合成的依赖维生素K的糖蛋白，是PC抗凝系统中的中心物质。 在血浆中PC为无活性的丝氨酸蛋白酶原，它必须转变为具有丝氨酸蛋白酶活性的活性蛋白C，才能发挥抗凝作用，凝血酶-TM复合物是其生理激活剂。 PSPS也是由肝细胞合成的依赖维生素K的蛋白质，但不具有蛋白酶活性，在血浆中以游离形式和与4b结合的形式存在，发挥抗凝辅助作用的是游离形式。 TMTM是一种单链糖蛋白，已知TM存在于除脑血管外的所有血管内皮细胞中。TM主要是与凝血酶结合成复合物，激活PC。From the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.

32、H O41;.蛋白蛋白C C的抗凝途径的抗凝途径From the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OBlood FlowThrombomodulinThrombinEPCRProtein CThrombinAPC损伤处下游的抗凝作用损伤处下游的抗凝作用Thrombus血管损伤处发生的血栓血管损伤处发生的血栓42;.蛋白蛋白C C的主要抗凝作用的主要抗凝作用Blood FlowVIIIaVaThrombusPSPSAPCAPCVaiVIIIaiFrom the desk of K .S.H OFro

33、m the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H O43;.抗凝血酶抗凝血酶(AT)(AT)检测检测抗凝血酶抗凝血酶活性活性测定测定( (发色底物法发色底物法) )原理：原理： 在待测血浆中加入过量的凝血酶，凝血酶与血浆中的在待测血浆中加入过量的凝血酶，凝血酶与血浆中的ATAT形成形成1 1: :1 1的复合物，剩余的凝血酶作用于的复合物，剩余的凝血酶作用于显色肽，裂解出显色基团，显色程度与剩余凝血酶的量呈正相关，而与血浆显色肽，裂解出显色基团，显色程度与剩余凝血酶的量呈正相关，而与血浆ATAT: :AgAg呈负相关。呈负相关。参考值：参考值： 108

34、.5 108.55.3%5.3%From the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H O44;.抗凝血酶抗凝血酶(AT)(AT)检测检测 AT AT: :AgAg含量含量测定测定(ELISA(ELISA法法) ) 原理：原理： 将抗将抗ATAT抗体包被在固相板，标本中的抗体包被在固相板，标本中的ATAT与固相的抗与固相的抗ATAT抗体相结合，再加入酶标记的抗抗体相结合，再加入酶标记的抗ATAT抗体，抗体，形成抗体形成抗体- -抗原抗原- -酶标记抗体的复合物，加入显色剂后，根据显色的深浅来判断标本中酶

35、标记抗体的复合物，加入显色剂后，根据显色的深浅来判断标本中ATAT的含量。的含量。 参考值：参考值： 290 29030.2mg/L30.2mg/LFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H O45;.抗凝血酶检测的临床意义抗凝血酶检测的临床意义 ATAT缺乏是发生静脉血栓与肺栓塞的常见原因之一，但与动缺乏是发生静脉血栓与肺栓塞的常见原因之一，但与动 脉血栓形成关系不大。脉血栓形成关系不大。 一一. .遗传性遗传性ATAT缺乏：缺乏： 遗传性遗传性ATAT缺乏是一种常染色体显性遗传性疾病，患

36、病率约缺乏是一种常染色体显性遗传性疾病，患病率约1/5000,1/5000,发病多在发病多在19-2519-25岁，患者常在手岁，患者常在手术、创伤、感染、妊娠术、创伤、感染、妊娠 或产后发生静脉血栓，并可在多出反复发生血栓。此病可分为或产后发生静脉血栓，并可在多出反复发生血栓。此病可分为 两型：两型：1.1.交叉反应物交叉反应物(cross reaction material)(cross reaction material)阴性型阴性型(CRM(CRM），即抗原与活性均下降；），即抗原与活性均下降；2.(CRM(CRM）型，即抗原正常，活性下降。）型，即抗原正常，活性下降。 共同表现是对肝

37、素的亲和力降低，从而对凝血酶的灭活能力明显减弱。共同表现是对肝素的亲和力降低，从而对凝血酶的灭活能力明显减弱。From the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H O46;. 二二. .获得性获得性ATAT缺乏：缺乏： 1. 1.合成降低，主要见于肝硬化、重症肝炎、肝合成降低，主要见于肝硬化、重症肝炎、肝 癌晚期等。癌晚期等。 2. 2.丢失增加，见于肾病综合征。丢失增加，见于肾病综合征。 3. 3.消耗增加，见于血栓前期和血栓性疾病，如心脑血管疾病、消耗增加，见于血栓前期和血栓性疾病，如心脑血管疾病

38、、 DICDIC、外科手术后、深静脉血栓形成、外科手术后、深静脉血栓形成 、肺梗死、妊高症等。、肺梗死、妊高症等。 三三.AT.AT水平增高：水平增高： 在血友病、口服抗凝药物、使用黄体酮类药物时，在血友病、口服抗凝药物、使用黄体酮类药物时，ATAT水平增高。水平增高。 From the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H O47;.蛋白蛋白C C的检测的检测 蛋白蛋白C C活性活性测定测定(PC(PC: :A,A,发色底物法发色底物法):): 原理：原理： 从蛇毒中提取的从蛇毒中提取的ProtacP

39、rotac作为作为PCPC的激活剂的激活剂, ,可特异性可特异性 激活激活PC,PC,生成的活性生成的活性PCPC（APCAPC）作用于特异发色底物（）作用于特异发色底物（Chromozym-APC ),Chromozym-APC ),并释放出产色基团对硝基并释放出产色基团对硝基苯胺苯胺, , 颜色的深浅与颜色的深浅与PCPC: :A A的相对活性（的相对活性（% %）呈正相关。）呈正相关。 参考值：参考值： 100.24 100.2413.18%13.18%From the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K

40、 .S.H O48;. 蛋白蛋白C:AgC:Ag含量测定（含量测定（PC:Ag,PC:Ag,免疫火箭电泳法）免疫火箭电泳法） 原理：原理： 在电场的作用下，一定量的待测血浆（含有在电场的作用下，一定量的待测血浆（含有PCPC抗原）在含有抗人抗原）在含有抗人PCPC抗体的琼脂糖凝胶中电泳，抗体的琼脂糖凝胶中电泳，扩散一定时间，抗原与相应抗体反应形成不可见的沉淀。电泳后在扩散一定时间，抗原与相应抗体反应形成不可见的沉淀。电泳后在1%1%磷钼酸溶液中显色形成有色磷钼酸溶液中显色形成有色的火箭免疫沉淀峰，该峰的高度与的火箭免疫沉淀峰，该峰的高度与PCPC抗原浓度呈正相关，由此计算抗原浓度呈正相关，由此

41、计算PCPC: :AgAg的含量。的含量。 参考值：参考值： 102.5 102.520.1%20.1%From the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H O49;.蛋白蛋白C C检测的临床意义检测的临床意义 一一. .遗传性遗传性PCPC缺乏：主要见于反复不明原因的血缺乏：主要见于反复不明原因的血 栓形成。栓形成。 二二. .获得性获得性PCPC缺乏：常见于缺乏：常见于DICDIC、肝功能不全、大、肝功能不全、大 手术后、长期制动、口服抗凝剂患者。手术后、长期制动、口服抗凝剂患者。 三三.PC.P

42、C抗原或活性增高：主要见于代偿性增加如抗原或活性增高：主要见于代偿性增加如 冠心病、糖尿病、肾病综合征、妊娠后期等。冠心病、糖尿病、肾病综合征、妊娠后期等。From the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H O50;.蛋白蛋白C GlobalC Global试验试验检测方法：检测方法： 在待测血浆中加入蛇毒温育，蛇毒可直接激活PC转 变为APC。随后加入APTT试剂以检测依赖PC活性的血浆凝固时间（Protein C activity-dependent clotting time，PCAT）。若待

43、测血浆中的PC系统正常，则加入Ca2+后 血浆凝固时间显著延长。为了避免诸多因素的影响,本 试验设计了对照组，即在试验过程中以缓冲液代替PC 激活剂，血浆不依赖PC活性的血浆凝固时间(PCAT/O) 其结果应短于60秒。From the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H O51;.参考值：参考值： PCATPCAT为为8585200200秒，秒，PCAT/OPCAT/O为为33335555秒（秒（n n234234），），PCAT:PCAT/0PCAT:PCAT/0 本实验结果应以正常化比率本实验结

44、果应以正常化比率(Normalized (Normalized Ratio,NRRatio,NR) ) 来表示。来表示。 NR NR(PCAT:PCAT/0)(PCAT:PCAT/0)样本样本CFCF CF CFSV/(PCAT:PCAT/0)SV/(PCAT:PCAT/0)正常人血浆正常人血浆 CF CF：校准系数，：校准系数，SVSV：试剂对正常人血浆的敏感值。：试剂对正常人血浆的敏感值。 NR:0.69-1.56 NR:0.69-1.56From the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H O5

45、2;.临床意义：临床意义： PCAT:PCAT/0小于0.8，说明蛋白C系统有缺陷。 本试验多用于蛋白C、蛋白S、FV Leiden突变和 FII 20210 GA突变的检测，起到蛋白C系统筛选 检测作用。 本试验也有假阳性，见于凝血因子V、VIII活性升 高，口服抗凝剂和狼疮抗凝物等。 From the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H O53;.凝固与纤溶凝固与纤溶: : 一种精密的平衡一种精密的平衡形成血栓溶解血栓产生凝血酶产生凝血酶产生纤溶酶产生纤溶酶From the desk of K .

46、S.H OFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H O54;.纤溶的降解产物纤溶的降解产物纤溶酶纤溶酶纤维蛋白原纤维蛋白原凝血酶凝血酶纤溶酶纤溶酶纤维蛋白纤维蛋白纤维蛋白原降解纤维蛋白原降解产物产物FibrinogenolysisFibrinogenolysisprimaryprimaryactivationactivation纤维蛋白降解纤维蛋白降解产物产物FibrinolysisFibrinolysissecondarysecondaryactivationactivationFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H OFrom the desk of K .S.H O55;.纤维蛋