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文档简介
1、河南农业大学考研专业课现代分子生物学课程试卷(含答案)学_年第 _学期考试类型:( 闭卷)考试考试时间 : 90 分钟年级专业学号1、分析题( 5 分,每题5 分)姓名1. 现要求以某一植物或动物组织 cDNA为模板扩增A基因,并构建该基因的重组表达质粒pET28aA并在大肠杆菌BL21中进行表达。宁 波大学 2019 研答案:1)从组织中提取 RNA 的步骤如下: 将组织在液氮中磨碎,每 50 100mg组织加入1ml TRIzol 裂解液溶解样品,充分吹打混匀。 每 1ml TRIzol 加入 2.0ml 氯仿,剧烈震荡 15s ,室温放置5min 。 4 C, 10000g 离心15mi
2、n,此时RNA 主要开始集中在水相中。 将延展水相转移至新的离心管中,加入等体积异丙醇,室温放 置 10min 。 4C, 10000g 离心 10min ,此时可在离心管底部观察到白色 沉淀,即为 RNA 。 用75冷的乙醇洗涤沉淀,450, 以下,离心5min,弃上清。 超净台中吹干,加入无 RNase的水溶解。(2)检测 RNA 质量的方法如下: 凝胶成像:取适量RNA溶液加入电泳缓冲液后,跑琼脂糖凝胶 电泳,如果 28S 和 18S 条带明亮、清晰,并且 28S 的亮度在 18S 条 带的两倍以上,则认为 RNA 的质量是好的。 吸光度检测:使用紫外分光光度计检测 RNA样品在260n
3、m、 280nm 处的吸光度,若两者的比值在 1.82.0时,可认为RNA纯 度良好,蛋白质等其他物质的污染源污染可以接受。解析:2、判断题( 55 分,每题 5 分)1. 许多蛋白质的三维结构是由其分子伴侣决定的。()答案:错误 解析:2. 真核生物基因表达的调控单位是操纵子。( )答案:错误解析:原核生物基因表达的调控单位是操纵子,真核生物基因一般不 组成操纵子。3. 端粒的序列在同一细胞各条染色体上都是相同的。( ) 答案:正确 解析:端粒为每个染色体末端特化的部位,着色较深。由端粒 DNA 和 端粒蛋白组成。积极作用其示范作用主要是防止染色体降解、粘连, 抑制细胞凋亡,与细胞寿命长短有
4、关。端粒 DNA 通常是由富含鸟嘌呤 核苷酸(G)的短片段串联重复序列组成,伸展到染色体的3 '端。一个基因组内则的所有端粒,即一个细胞里不同染色体的端粒都由相同的 重复序列组成,但不同物种的染色体端粒的重复序列是各异的。4. 密码子的偏爱性是指不同种属的生物对简并密码子具有不同的使 用频率。( )答案:正确解析:5. nick 和gap的含义是不同的,前者指 DNA的单链中有较小的缺失,后者仅是断开了一个磷酸二酯键。()答案:错误解析:nick指仅是断开了一个磷酸二酯键,gap指DNA的单链中有 较小的缺失。6. tRNA 一般具有一柄三环,其空间结构呈“三叶草”形。( ) 答案:错
5、误解析:7. 阻遏作用和诱导作用的解释都是以乳糖操纵子学说为基础。()答案:正确解析:乳糖操纵子包括调节基因、启动基因、操纵基因和结构抗体。 当培养基没有乳糖时,阻遏蛋白与操纵基因结合,从阻止了 RNA 聚合 酶与DNA的结合,转录停止,即阻遏作用。但是有乳糖时,在B半乳糖苷酶的作用下,乳糖转变为异构乳糖从而与阻遏蛋白结合,并使 之构象发生改变,不可与操纵基因序列结合,从而 DNA 可转录,即诱 导作用。8. SDSPAGE 时,不同大小蛋白质分子的电荷质量比值趋近于相同。 ()答案:正确解析:9. RNA干扰是一种由双链RNA所引起的序列特异性基因沉默,它是原核生物中基因转录后沉默作用的重要
6、机制之一。( )答案:错误 解析: RNA 干扰是指在进化过程中所高度保守斜度的、由双链 RNA 诱发的、同源 mRNA 高效特异性降解的乱象,是真核生物细胞中的一 种对外源遗传因子(如转座子、转基因或病毒)的特异性和高效率的 降解机制,但捕捉到并没有在原核生物中被发现过。10. 乳糖操纵子存在负控诱导系统和正控诱导系统的调控机制。( ) 扬州大学 2019 研答案:正确解析:乳糖操纵子存在负控诱导系统和正控诱导系统的调控机制,分 别是阻遏蛋白的负性调节和 CAP 的正性调节。11. 信号肽的结构有一些特征,目前发现信号肽都是位于多肽链的 N 端。( )答案:错误解析:信号肽是引导新纯化的蛋白
7、质向分泌通路转移的短(长度530 个氨基酸)肽链。常指瑞维尼苏桑代讷县新合成多肽链中用于指导 蛋白质的跨膜转移(定位)的 N 末端的氨基酸序列(有时不一定在 N 端)。3 、名词解释( 50 分,每题 5 分)1. DNA 甲基化答案: DNA 甲基化是指 DNA 甲基转移酶催化 S 腺苷甲硫氨酸作为甲 基供体,将胞嘧啶转变为 5 甲基胞嘧啶( mC )的一种反应,是一种表 观遗传修饰。在真核生物的 DNA 中, 5 甲基胞嘧啶是唯一存在的化学 性修饰酪氨酸碱基, CG 二核苷酸是最主要的甲基化位点。一般说来, DNA 的甲基化会抑制基因的表达, DNA 的甲基化对维持染色体的结 构、 X 染
8、色体的失活、基因印记和肿瘤的发生发展都起着重要的作用。 解析:空2. 转化 浙江海洋大学 2019研 答案:转化是指某一基因型来自的细胞从周围介质中吸收源自另一基 因型的细胞的 DNA 而使它的基因型和表现型发生相应变化的现象。 转化是基因工程中常用的一种技术,通过电击或者热击的方法将外源 DNA 导入到受体细胞,使其在受体细胞中会稳定存在并表达,为育种 和遗传性疾病的基因治疗提供服务新的途径。解析:空3. 基因工程( gene engineering ) 答案:基因工程又称基因拼接技术和 DNA 重组技术,是指以分子遗 传学为理论基础,以分子生物学和微生物学的现代方法为手段,把不 同来源的基
9、因按预先设计的远景,在体外构建杂种 DNA 分子,然后 导入活细胞,以改变生物原有生物的遗传特点、获得新品种、生产新 产品的技术。解析:空cAMP 依赖性蛋白激酶( PKA)答案: cAMP 依赖性蛋白激酶( PKA )又称蛋白激酶 A 或 A 激酶,是 指一种由两个催化亚基(C)和两个调节亚基(R)组成的四聚体。其 活性受 cAMP 调控,每个 R 上有两个 cAMP 结合位点,当 cAMP 与 R 结合后, R 脱落,游离的 C 使底物蛋白特定的丝苏氨酸残基磷酸化。解析:空4. 模板链答案:模板链,又称反义链,是指 DNA 双链中能作为转录模板通过 碱基互补配对实例方针指导 mRNA 前体
10、合成的 DNA 链。可作为模板 转录为 RNA 的这三条链该链与转录的 RNA 碱基互补( AU ,GC)。在转录过程中,RNA聚合酶与模板链结合,并沿着模板链的 35 '方向移动,按照53 '方向催化A的合成。解析:空5. 编码链与反义链( antisense strand )答案: 编码链,又称有意义链,是指在转录过程中会,双链 DNA 中不能需要进行转录的那一条 DNA 链,该链的核苷酸序列与转录生 成的 RNA 的序列一致(在 RNA 中是以 U 取代了 DNA 中的 T)。反义链,又称模板链,是指另一条根据碱基互补配对原则指导mRNA 合成的 DNA 链。解析:空同工
11、tRNA扬州大学2019研答案:同工 tRNA 是指几个携带相同氨基酸的 tRNA ,在一个同工 tRNA 组内,所有 tRNA 能够被一个特殊的氨酰 tRNA 合成酶识别的 tRNA,即在3 '端接受同一种氨基酸的接纳几种tRNA,由同一种氨酰 基 tRNA 合成酶的识别。同工 tRNA 的出现使得 61 种二进制氨基酸 的三碱基序列只对应 20 种氨基酸,也减少了突变所造成的危害。解析:空6. 遗传密码 答案:遗传密码又称密码子、遗传密码子、三联体密码,指将 DNA 或 RNA 序列以三个核苷酸为一组的密码子翻译为蛋白质的氨基酸序列, 决定蛋白质中氨基酸顺序的核苷酸顺序,由 3 个
12、连续的核苷酸组成的 密码子所构成,以用于蛋白质合成。几乎所有生物都使用同样的遗传 密码,称做标准遗传密码;即使是非蛋白质结构的病毒,它们也是使 用技术规范采用遗传密码。但是也有少数生物使用一些稍微整体而言 不同的遗传密码。解析:空7. 启动子 暨南大学 2019研答案:启动子是指一段位于结构基因 5 '端上游区的DNA序列,它含 有 RNA 聚合酶特异性结合和转录起始所需的保守序列,是 RNA 聚合 酶识别、结合和开始转录的位点。原核生物的启动子带有 10 区和 35 区,真核生物启动子含有 TATA 框和 CAAT 框,这些区域是启动子与RNA 聚合酶结合的位点。启动子与 RNA 聚
13、合酶的结合活性的改变可 以影响基因的量。解析:空8. 冈崎片段答案:冈崎片段是指在 DNA 半不连续复制中,沿着后随链的模板链 合成的新 DNA 片段,随后能被连接形成一条完整的 DNA 链。冈崎片 段的长度在真核与原核生物中存在差别,真核生物的冈崎片段长度约为100200核苷酸残基,而原核生物的为 10002000核苷酸残基。解析:空4、填空题( 40 分,每题 5 分)1. RNA在细胞内行使不同的功能,含量最多,结构最复杂的 RNA是, 含稀有碱基(或修饰碱基)最多的 RNA是,代谢活跃,半衰期较短, 指导蛋白质的RNA是。答案: rRNA|tRNA|mRNA解析:2. 在DNA复制和修
14、复过程中修补大片段DNA损伤的酶为。答案:DNA聚合酶I解析:DNA聚合酶I具有3 7 5 '聚合酶活性,可以修补大片段NA 损伤。3. DNA 高级结构的主要形式是结构,可以分为和两大类答案:超螺旋 |正超螺旋 |负超螺旋解析: DNA 的高级结构是指 DNA 的二级、三级结构,主要表现形式 是超螺旋,包括正超螺旋和负超螺旋。4. 有六个密码子的氨基酸为和,而仅有一个密码子的氨基酸为和。 答案:亮氨酸 |丝氨酸|甲硫氨酸 |色氨酸解析:6组密码子中,只有61种分别代表各不相同的氨基酸,而61有 3 组密码子 UAA 、UAG 、UGA 不编码任何氨基酸,是肽链合成的 中止密码。因此不
15、是领袖人物所有的遗传密码都代表氨基酸。种密码子只编码 20 种天然的氨基酸,说明多个密码子详述可编码同一种 氨基酸。事实上, 20 种氨基酸中,除蛋氨酸( Met )和色氨酸( Try ) 只有1个密码子外,其他氨基酸都有 26个密码子,如亮氨酸(Leu ) 和丝氨酸(Ser)有六个密码子。不同的氨基酸密码子不同,所以1个密码子只编码 1 种氨基酸。5. 碱解法和清亮裂解法是分离质粒的两种常用的方法,二者的原理 是不同的,前者是根据,后者则是根据。答案:质粒和染色体构型的差异 |质粒和染色体 DNA 分子质量的差异 解析:碱裂解法是基于染色体 DNA 和质粒 DNA 的变性和复性的差异 达到分
16、离目的。 pH 让质粒 DNA 和染色体 DNA 变性,然后沉淀蛋白 质。接着把 pH 值调至中性,质粒 DNA 较小,很容易复性成双链。染 色体 DNA 较大,不会复性,缠结成片状不溶物质,接着可以通过离心 除去。清亮纯化裂解法一般是根据质粒和染色体 DNA 分子质量的差异。6. 真核生物的三类RNA聚合酶对a鹅膏蕈碱的敏感度不同,最敏 感,不敏感,具有种属特异性。答案:RNA聚合酶H |RN骤合酶I |RNA聚合酶皿解析:a鹅膏蕈碱是从毒蕈中分离出来的一种八肽化合物,它对细菌RNA 聚合酶的极其抑制作用极其稀薄,但可以抑制真核生物 RNA 聚 合酶。RNA聚合酶I对a鹅膏蕈碱不敏感,RNA
17、聚合酶H对a鹅膏 蕈碱敏感,RNA聚合酶皿存在物种特异性。7. 通常所讲的转录起始区的TATAAT及 TTGAC区是指DNA的上的序 列,它们的方向是。答案:启动子 |53 '解析:8. DNA中的左手螺旋是型DNA对于表达调控有一定作用。答案: Z解析:5、简答题( 35 分,每题 5 分)1. 简述tRNA mRNA和rRNA的功能。答案: (1)tRNA 的功能: tRNA 在蛋白质合成投资过程中,将 活化的氨基酸搬运到核糖体上,并根据 mRNA 遗传密码依次准确地将 它携带的氨基酸分页成多肽链,参与蛋白质的生物合成。(2)mRNA 的功能:传达 DNA 上的遗传信息,作为核酸合
18、成 的模板,决定肽链的氨基酸长链排列顺序。把 DNA 上的遗传信息精确无误地转录下来,负责将它携带的遗传信息在多核糖体上翻译成蛋 白质。(3 )rRNA 的功能:一般与核糖体蛋白质结合在一起,形成核糖 体。核糖体是合成核酸蛋白质的场所。 rRNA 还可作为 mRNA 的支架, 使 mRNA 分子在其上展开,全面实现蛋白质的合成。解析:空2. 何谓蛋白质组,简述其研究特点。答案:( 1)蛋白质组一词,源于蛋白质和基因组两个词的杂合,意思指由一个基因组一种生物或一个细胞、组织所表达的全套蛋白质, 即包括一种细胞乃至一种生物所表达的全部蛋白质。(2)其研究特点是:由于蛋白质是生命活动的主要执行者,因
19、 此,对于不同类型的细胞或同一个细胞在不同的活动状态下,蛋白质 组的构成组合成是不一样的。对于基因组而言,要测定的基因组不 论大小,其核苷酸的数量是明确的。然而,对于蛋白质组来说,蛋白 质的不管种类究竟有多少就很难说了。一个个体的基因组自个体诞 生到死亡,始终是不变的。而作为新陈代谢的主要执行者的蛋白质组, 在个体的生命活动中却总是变动不停中均的。通常位于细I胞核内,且保持稳定,因此测定基因组的 DNA 序列是不受黑暗世界的影 响。而在蛋白质组的研究中才,不仅要考虑时间的因素,更要需要考 虑空间的影响。某一个蛋白质功能的实现,通常是离不开它与其他 蛋白质间的相互作用。3. 为什么被RNA聚合酶
20、皿识别的启动子不常见?答案: 被RNA聚合酶皿鉴别的启动子不常见比对的原因如下:(1) RNA聚合酶皿负责转录一类具有转录物不编码蛋白质和基 因通常以多拷贝存在两种特征基因。(2) RNA 聚合酶皿负责转录的基因有 5S rRNA 和tRNA 基因 与其他基因的启动子不同,在研究 5S rRNA的基因5 '端的序列时发 现这类基因的启动子位于基因特征向量的内部。该基因的前 50 对核苷 酸全然缺失,对转录起始毫无损害;同样地, 84 以后序列的缺失对 转录起始也没有影响。因此, 50 到84 间的序列为 5S rRNA 基因 的启动子。(3) 更少见的是, tRNA 基因的启动子被分作
21、 A 和 B 两部分, 它们之间的序列缺失不影响启动子的运行效率。解析:空4. 为什么操纵区和启动子突变总是顺式显性、反式隐性突变?而编 码阻抑蛋白的基因突变,则既是顺式显性、又是反式显性呢?答案: 顺式导致是指由操纵子结构中的顺式位点发生突变显性整 条链失活,效应在表型上呈现显性效应的现象。反式指称显性是指乳 糖操纵子中会,由于调节基因(编码阻遏蛋白)的突变产生的阻遏物 没有活性,它相对于野生型基因是隐性性状的,而结构基因表达便是 显性的。操纵区和启动子突变总是顺式显性、反式隐性突变,而编码阻抑 蛋白的基因突变,则既是顺式显性、又是反式显性的原因是:( 1 )操纵区和启动子突变只影响极少顺式
22、基因的表达(反式隐性 的),这正是它们是调控序列,仅仅调节相同 DNA 分子上的相邻基 因的表达。(2)阻遏物基因编码可以扩散的基因产物,因此既能影响顺式又 能影响反式基因的表达。解析:空5. 简述真核生物rRNA基因、tRNA基因和mRN基因的转录机制。答案:(1)rRNA 基因的转录机制真核生物中,由RNA聚合酶I催化前体rRNA的合成,RNA聚 合酶I转录产物是45S rRNA,经过剪接修饰产生除5S rRNA外的各 种 rRNA 。真核生物的 rRNA 基因是一类中度重复的基因,拷贝数数 千都在数百个至数万个,人类的 rRNA 基因约为 300 个拷贝。(2)tRNA 基因的转录机制R
23、NA聚合酶皿催化产生前体tRNA,经过加工后有望成为成熟的 tRNA。前体tRNA加工包括:由限制性内切核酸酶切断 tRNA两 端;外切核酸酶从5 '端逐个切去附加序列;在3 '端加上CCAOH 结构;个别碱基发生着色反应。(3)mRNA 基因的转录机制RNA聚合酶H催化前体 mRNA的合成,mRNA转录后才的加 工包括:5 '端加帽子、poly端加A)、选择性剪接和RNA的编辑6. 简述基因表达载体的主要构成元件及作用。 暨南大学 2018研答案: 表达载体是在克隆载体基本钢骨的基础上增加表达元件(如启动子、RBS、终止子等),使抗体目的基因能够表达的载体。产生表达载
24、体的主要构成元件及作用为:( 1 )结构基因:即抽取的目的基因核苷酸序列,负责编码目标蛋 白。(2) 启动子:位于编码蛋白质结构基因前的加密一段特殊结构的DNA 片段,是 RNA 聚合酶的识别部位和结合部位。(3) 终止子:位于编码蛋白质结构基因末端一段特殊的 DNA 片 段,具有终止基因转录过程的作用。(4) 复制原点:能够自我复制保证基因在受体细胞中复制遗传和 表达。( 5 )遗传标记基因:检测鉴别受体细胞中是否含有目的基因,从 而将含有目的基因的成份细胞筛选得来。解析:空7. 一般来说,外显子发生的突变概率比内含子小,请解释可能的原因。答案:(1)真核生物的结构基因往往是断裂基因,由编码
25、蛋白的外显子作为间隔序列的内含子组成。( 2 )外显子为蛋白质编码,发生基因突变后直接影响蛋白质暴发 的功能,因此选择压大,突变率低;另外,外显子突变影响一旦影响 蛋白质系统,有时候对生殖细胞是致死的,这样,统计突变率时不会统计在内(3 )内含子的序列中只有边界序列与 mRNA 的剪接有关,内部 序列突变不影响基因的蛋白质的功能,相对来说突变压力小,发生基 因型的概率大。解析:空6、论述题( 20 分,每题 5 分)1. PCR 反应包括哪些基本要素?答案: PCR 反应的基本要素如下表所示:(1) 引物:用量0.10.5卩molL。引物浓度偏高会错配或非特 异性扩增、生成引物二聚体,使目的
26、DNA 片段产率下降。退火温度 与引物Tm值有关,引物Tm值在5580 C范围较为理想。PCR产 物的特异性取决于引物与模板 DNA 互补的程度。(2) 镁离子浓度:一般用量 1.52.0mmolL , TaqDNA 聚合 酶活性需要 Mg2 。 Mg2 浓度过低,可显著降低酶活性。 Mg2 浓度过高又而使酶催化非特异性扩增增强。 Mg2 浓度还会影响引物 的退火、模板与 PCR 产物的解链温度,从而影响扩增片段的产率。(3) 底物浓度:工作浓度 20200卩molL dNTPs的质量与浓 度和 PCR 扩增效率有密切关系。浓度过高可加快反应速度,也不断增 加碱基的错配率和实验成本。降低浓度会
27、导致反应速度下降,可提高 反应的特异性。在 PCR 反应中, 4 种 dNTP 必须以等摩尔浓度配制, 以减少 PCR 反应的错配误差并增加使用效率。(4) TaqDNA 聚合酶:7580 C前一天具有最高的聚合酶活性,150个核苷酸秒;具有良好的热稳定性,95 C仍有活性,应用浓度一般为1 2.5 1 100反应体积。(5)PCR 反应的缓冲液: TrisHCl 缓冲液; KCl 促进引物的退火, 浓度太高时会抑制 TaqDNA 聚合酶活性;加入 BSA 或亚硝酸盐有利 于保护 TaqDNA 聚合酶活性;必要时加入适量二甲基亚砜( DMSO ) 或甲酰胺利于破坏模板二级结构,提高 PCR 反
28、应特异性。(6)模板:模板模板核酸的量与钝化敏感度是 PCR 破天荒与否 的关键环节之一。(7)副反应温度和循环次数。解析:空2. 为什么细菌的RNA聚合酶能在恰当的区域停止转录?浙江海洋大学 2019研答案: 因为细菌的各个转录单位中存在促进转录终止的终止子序 列,转录出的终止子序列形成发夹结构延宕了 RNA 聚合酶的前进,进 而在富含 A 示范作用的序列或终止因子的作用下从 DNA 模板链上释 放奇迹般地,终止转录,原核生物的转录终止四种有两种类型:(1 )赖于p因子的终止,p因子能催化NTP水解促使新生的RNA 链从三元转录复合物中所解离出来,从而终止转录。(2 )不依赖于p因子的终止,
29、模板DNA上回波存在终止转录信 号终止子,终止位点上游一般都存在一个富含 GC 的二重对称区,该 段 DNA 转录产生的 RNA 容易形成发卡式结构。新生 RNA 中的发卡 式结构会导致RNA聚合酶的暂停,破坏 RNADNA 杂合链5 '端的正 常结构。终止位点前有一段由48个A组成的序列,因此,转录物 的3 '端为寡聚U,寡聚U的存在以使杂合链的3 '端部分出现不稳定的 rUdA 区域。这两者共同积极作用使得 RNA 从三元转录复合物中所解 离出来。解析:空3. 什么是表观遗传学?基因组的表观遗传调控有哪些主要方式? 答案:(1)表观遗传学是研究在不能细胞核 DNA
30、序列改变的情况时,基因功能的可逆的、可遗传的改变。(2 )表观遗传贡瑟兰过快上涨有染色质重塑、 DNA 甲基化及线 粒体修饰、 X 染色体失活、非编码 RNA 调控、微 RNA 介导的基因转 录调控等多方面的研究: 染色质重塑是表观遗传修饰中一种常见手法的方式,是指导致 从上到下细胞分裂周期中染色质位置和结构改变的过程。染色质重塑 是 DNA 修复和基因表达调控过程中的一个重要环节。它可使染色质 组织变化趋势结构发生一系列重要的变化,如染色质去凝集,核小体 演变成开放式的疏松结构,使转录因子等更易接近并结合 DNA ,从而 调控基因转录等。 DNA 甲基化是指由 DNA 甲基转移酶介导,催化甲
31、基基团从 5 腺苷甲硫氨酸向胞嘧啶的 C5 位点转移的过程。在脊椎动物中, CpG 二核苷酸是 DNA 甲基化发生的主要包括位点。 DNA 甲基化影响到蛋 白的表达,与肿瘤的会发生密切相关。甲基化状态的发生改变是改变 致癌作用的一个关键因素,它包括基因组总体而言甲基化水平降低和CpG 湾局部甲基化程度的异常偶发升高,这将导致基因组的不会稳定。 组蛋白修饰是指核小体上的某些氨基酸被共价修饰的现象,主 要包括核糖乙酰化、磷酸化、甲基化和泛素化,它们能拖累松紧染色 质的压缩松紧程度,因此在基因表达中起主要的调节作用。上述它们 不仅与染色体的重塑和功能状态紧密相关,而且在决定细胞无情、细 胞生长中会以
32、及致癌作用的过程中发挥着主要的作用。 X染色体失活是指在中幼兽哺乳动物中,两条 X染色体有一个 是失活的,称为 X 染色体的剂量补偿。 X 染色体失活的选择和起始发 生在胚胎发育的早期,这个过程被 X失活中心(Xie )所控制,是一种 反义 RNA 调控模式。这个烷化中心存在着 X 染色体失活特异性转录 基因 Xist ,当失活的命令下达时,这个基因就会产生一个 17kb 不翻 译的 RNA 与 X 染色体结合,引发失活。 X 染色体的失活状态需要表 观遗传修饰,如 DNA 甲基化来维持,这种失活可以通过有丝或减数 分裂遗传给子。 非编码 RNA 调控,非编码 RNA 是指非特异不能译者为蛋白
33、质 的功能性 RNA 分子。包括 siRNA 、miRNA 、piRNA 以及长链非编 码 RNA 。非编码 RNA 在表观遗传学修饰中扮演了重要的角色,能在 基因组水平及染色体水平对基因表达进行调控,决定细胞分化的羁绊。 miRNA 介导的基因转录调控已经成为表观遗传修饰的一种新的 形式。 miRNA 首先由 RNA 聚合酶转录成长的 RNA 前体,再由内切 酶加工成短的前体 miRNA 。随后前体 miRNA 被转运到胞质中,最 后由特异性内切酶加工成长度为 1926nt的小RNA。小RNA以碱 基互补的方式与靶mRNA的3 ' UT结合,弓I起mRNA翻译抑制或 者裂解。 miR
34、NA 介导的表观遗传调控已成为干细胞研究的新领域。许 多特异性 miRNA 在动物不同的发育阶段以组织特异性方式表达,对 发育中细胞命运的选择舍去至关重要。 piRNA是近些年在哺乳动物细胞内发现的长度为 2431nt的 RNA 分子,因在生理状态下能与 Piwi 蛋白偶联,故命名为 piRNA (piRNA )。由于 Piwi 为一表观遗传学宏观调控政策因子,能与 PcG 蛋白共同结合于基因组 PcG 应答元件上,协助 PcG 沉默同义异 型基因,因此推测与 Piwi 相关的 piRNA 也应具有表观遗传学的有著 调控作用。解析:空4. 分别举例说明影响细胞分化的主要原因。答案: 损害细胞分
35、化的主要动因原因有:(1 )胞外信号分子对核酸细胞分化的影响:在早期胚胎发育中的 胚胎诱导现象就是通过细胞旁分泌产生的信号分子来实现的,如在眼 的发育中,早期的视泡诱导与之接触的外胚层上皮细胞发育成品状体。(2)细胞记忆与决定:细胞可以将信号水分子短暂有效的作用储 存起来形成长时间的记忆,逐渐向特定方向分化。例如,小鼠不同的 果蝇成虫盘发育为成虫不同器官。(3)细胞质的不均一性对细胞分化的影响:在卵母细胞的细胞质 中存在着和初始状态蛋白质结合成非活性状态的隐蔽 mRNA ,不能被 核糖体识别。受精后早期的细胞分裂中,这些隐蔽 mRNA 被不均一地 分配到子细胞中,从而决定未来细胞分化的残酷无情
36、。例如,果蝇的卵细胞后端存在决定生殖细胞分化的成分,即生殖质,是种质细胞的 决定子。(4)细胞间的化学键和位置效应:细胞所处的位置突出不同对细 胞分化的命运也有明显的影响。例如,鸡原生质发育的原肠胚时期, 远离脊索的细胞分化成运动神经元,成靠近脊索的细胞分化变成底板。( 5 )环境对性别决定的影响:环境对性别决定制约的影响最典型 的例子是爬行动物蜥蜴在较低温条件下发育成雌性,而在较高温条件 下所发育成雄性。(6)染色质变化细胞质与基因重排对细胞分化的影响:在马蛔虫 等一些生物中,发育成肝细胞的早期消减胚胎细胞有染色质消减现象; 产生抗体的 8 淋巴细胞是浆细胞经基因重排分化而来的。解析:空7、
37、选择题( 12 分,每题 1 分)1. (多选)下列有关DNA拓扑异构酶I和H差别的说法,其中正确的有( )。A. I型主要与转录有关,H型主要与复制有关B. I型和H型都只能引入负超螺旋C. I型使DNA勺一条链发生断裂和再连接,而H型使 DNA勺两条链 同时发生断裂和再连接 I型催化反应不需要消耗 ATP H型需要消耗ATP答案: C|D解析: N 拓扑异构酶为催化 N 拓扑异构体相互转变的酶的总称。根据 拓扑异构体的变化方式分为两个型,切断一个链而改变线性结构的称 为I型,切断两个链而改变扭曲拓扑结构的称为H型。其中I型拓扑 异构酶不需要 TP 提供能量。2. 在真核基因表达调控中,(
38、)调控元件能促进转录的速率。A 增强子B TATA boxC 衰减子D Repressor答案:A解析:增强子的作用在于增强转录的速率。增强子所共同的特征是: 增强子可以在很远的距离作用于顺式连接的启动子,增强子的这种作 用没有方向性。项,衰减作用的实质是以翻译手段控制基因的转录。 衰减子碱基本身不能核苷酸实现衰减作用,而必须通过对前导序列上14 个氨基酸的前导肽的翻译才能实现。项, Repressor ,即阻遏蛋白, 是与操纵子结合的宏观调控蛋白质。项, TT box 是控制转录精确性的 序列。3. 一个病毒有一个由单链负链RNA组成的基因组,以下哪一个过程正确描述了病毒RNA的产生?()A
39、. 先合成单链正链DNA而后再转录成mRNAB. 先合成单链正链RNA而后以新合成的正链作为mRNA病毒单链负链RNA直接作为mRNAC. 单链负链RNA病毒的基因组只编码tRNA答案:A解析:含有负链 RN 的病毒(如狂犬病毒),由单链负链 RN 先合成 单链正链 N ,而后再转录成 mRN 。4. 下面哪项不属于原核生物操纵子的结构?( )A. 启动子B. 操纵基因C. 内含子D. 终止子答案: C解析:真核生物细胞 N 中的间插序列。这些序列被转录在前体 RN 中, 经过剪接被去除,再次不存在于成熟 RN 分子中。5. 色氨酸生物合成操纵子为下列( )方面的例子。 浙江海洋大学 2019 研A.正调控可诱导操纵子B.正调控可抑制操纵子C.负调控可抑制操纵子D.负调控可诱导操纵子解析:6. 分化程度高的细胞比分化程度低的细胞对于外界因子的反应能力 ( )。A 下降B 上升C 一样D 前三者都有可能答案:A 解析:细胞分化是指同一来源的细胞逐渐产生出形态结构、功能特征 各不相同的细胞类群的过程,其线粒体结果是在空间上细胞产生差异, 在时间上同一细胞与其从前的状态有所不同,其本质是基因组在时间 和空间上的选择性表达。分化程度越高,细胞对于外界因子的反应能 力越低。7. 传统的SAGE技术用()个碱
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