高效液相色谱法测定果汁饮料中的维生素C含量_张杰

1、 文章编号:1004-1656(201208-1306-03高效液相色谱法测定果汁饮料中的维生素C含量张杰,许家胜*,刘连利(渤海大学科技实验中心,化学化工与食品安全学院,辽宁锦州121013摘要:建立饮料中维生素C含量的高效液相色谱检测方法。采用ODS C18(4.6mm250mm,5m反相色谱柱,以0.1%草酸溶液为流动相,光电二级管阵列检测器,检测波长为267nm。线性范围为20 160g/mL,相关系数为0.9983,方法的回收率为96.4% 100.2%,相对标准偏差为0.61%。该方法简便、分析速度快,能够满足果汁饮料中维生素C的检测要求。关键词:维生素C;高效液相色谱;饮料中图分

2、类号:O657.72文献标识码:ADetermination of content of Vitamin C in beverage by HPLCZHANG Jie,XU Jia-sheng*,LIU Lian-li(Center of Science and Technology Experiment,College of Chemistry,Chemical Engineering andFood Safety,Bohai University,Jinzhou121013,ChinaAbstract:In this work,HPLC has been used to determine

3、 the content of Vitamin C in beverage.ODS C18(4.6mm250mm,5m is used as reversed phase column.The0.1%oxalic acid solution is mobile phase.The wavelength of photodiode array detector is 267nm.Its recovery-ratio is96.4% 100.2%,the correlation coefficient is0.9963.The relative standard deviation was0.61

4、% .This HPLC method is simple and convenient,and is easy to control.This analysis method is fast-speed,high sensitivity,and be a-ble to meet requirements of the Vitamin C in beverage industry.Key words:Vitamin C;high performance liquid chromatography(HPLC;beverage维生素C又称抗坏血酸,是水溶性维生素,是知名度最高的营养素,不但是美容灵

5、药,更是抗氧化,保护细胞,甚至有效抗癌的维生素,它普遍存在于蔬菜水果中,但容易因外在环境改变而遭到破坏,人体自身无法合成维生素C,必须额外从食物中获取。目前常规的维生素C含量测定方法有紫外分光光度法1、碘量法2、比色法3、荧光法4等,这些方法操作步骤复杂,具有试剂和试样溶液不稳定、灵敏度低、费时等缺点。近年来发展用高效液相色谱法测定维生素C5-7。本文采用高效液相色谱法,结果表明该方法对饮料中维生素C能够快速、准确的分离分析。1实验部分1.1仪器与试剂LC-1100高效液相色谱仪(配有二极管阵列检测器,Agilent公司;色谱柱:ODS C18(4.6mm250mm,5m。流动相:0.1%的草

6、酸溶液;柱温: 40;流速1.0mL/min;检测器:DAD检测器;检测收稿日期:2011-09-12;修回日期:2011-10-19基金项目:辽宁省教育厅省级工程技术研究中心建设计划(2009402007资助联系人简介:许家胜(1977-,男,博士,副教授,主要从事新材料和食品科学研究。E-mail:jiashengxu第8期张杰等:高效液相色谱法测定果汁饮料中的维生素C 含量波长:267nm 。维生素C 标准对照品:含量100%,约100mg (中国药品生物制品检定所;草酸(纯度99.5%,分析纯,沈阳市新化试剂厂;甲醇(HPLC 级,美国Tcdia 公司;超纯水:实验室自制。果汁饮料:市

7、售。1.2色谱流动相的配制准确称取1.005g 的草酸于小烧杯中,用超纯水溶解后转移至1000mL 容量瓶中,用超纯水定容,摇匀备用。1.3标准溶液的配制用电子天平准确称量0.0500g 维生素C 标准品于干净干燥的小烧杯中,用0.1%的草酸溶液溶解,转移到50mL 棕色容量瓶中,稀释至刻度,摇匀。得到维生素C 的标准储备液,密封贮存。1.4样品前处理将果汁饮料用布氏漏斗过滤,称取1.0g 样品于25mL 的容量瓶中,用0.1%的草酸溶液定容,摇匀,使用前用0.45m 滤膜过滤。2结果与讨论2.1检测波长的选择取维生素C 标准样品,在150nm 375nm 波长范围内进行波长扫描,得到光谱扫描

8、图,如图1。结果显示在267nm 处有最大吸收,维生素C 也能达到基线分离,因此本次实验选择267nm 作为检测波长 。图1维生素C 波长扫描图Fig.1Scan image of wavelength of Vitamin C2.2标准曲线用流动相将维生素C 标准储备液逐级稀释得到浓度为20.0、40.0、80.0、100.0、160.0g /mL 的标准工作液,在优化的条件下浓度由低到高进样检测,以浓度为横坐标,色谱峰面积为纵坐标,绘制标准曲线。表1为维生素C 标准溶液的浓度及测定的结果,图2为标准曲线。由图2可见,标准工作曲线的线性方程为:y =45.743x +125.63,R 2=0

9、.9985。以2倍基线噪声所对应的浓度计本方法的检出限,维生素C 的检出限为0.006g /mL 。图2维生素C 的标准曲线Fig.2Standard curve of Vitamin C2.3样品重复性实验取同一样品8份,分别按1.4处理并进行测定,结果见表2,其RSD =0.61%。果汁的色谱图见图3。表1重复性实验结果Table 1Repetition of experiment results测定结果(g /mL 平均值(g /mL RSD (%86.9,87.4,87.8,86.1,87.3,86.5,86.8,87.086.90. 61图3果汁样品的色谱图Fig.3Chromato

10、gram of beverage sample2.4回收率实验在5个维生素C 含量均为118g 的果珍样品,分别加入40g ,80g ,160g ,240g ,320g 维生素C 标准品,测定其回收率,其结果见表2。7031化学研究与应用第24卷表2回收实验结果Table2Experiment results of recovery experiments本底值(g添加量(g测得量(g回收率(% 11840155.898.611880190.896.4118160276.199.3118240358.7100.2118320425.797.2由表2数据可知,该方法回收率在96.4% 100.2

11、%之间,说明本方法测定结果准确可靠。2.5样品的测定按照1.5色谱条件,将市售的饮料样品溶液按1.4处理后上机进行液相色谱分析,测定维生素C的含量,结果见表3。表3不同果汁饮料的维生素C含量(n=3Table3Content of Vc in different Beverages名称维生素C(g/mL每日C橙汁饮品128.5美汁源果粒橙73.8纯果乐72.83结论以0.1%的草酸为流动相和提取液,紫外检测波长267nm的条件下分析饮料中维生素C含量的研究,具有良好的线性关系,相关系数为0.9983,方法的平均回收率为96.4% 100.2%,测定结果的RSD为0.61%。该方法能够对饮料中的维生素C含量进行快速、准确检测。参考文献:1郑京平水果、蔬菜中维生素C含量的测定紫外分光光度快速测定方法探讨J光谱实验室,2006,11(4:731-7352库尔班江,赛丽曼碘量法测水果蔬菜中维生素C的含量J伊犁师范学院学报(自然科学版,2007,65(3:28-323李玉红钼蓝比色法测定水果中还原型维生素CJ天津化工,2002,1(1:31-324鲍所言,李书存,胡汉芳,等动力学荧光法测定抗坏血酸J分析实验室,2001,2