药品质量标准中安全性项目的设定

1、药品质量标准中安全性检查项目的确定主要内容主要内容u 热原检查热原检查u 细菌内毒素检查细菌内毒素检查u 异常毒性检查异常毒性检查u 特异性毒性检查特异性毒性检查u 降压物质检查降压物质检查u 无菌检查无菌检查u 微生物限度检查微生物限度检查热原检查热原检查一、方法一、方法 系将一定剂量的供试品溶液系将一定剂量的供试品溶液, , 静脉注射家兔体内静脉注射家兔体内, , 在在规定的时间内规定的时间内, , 观察家兔体温升高的情况观察家兔体温升高的情况, , 以判定供试品以判定供试品中所含热原的限度是否符合规定。中所含热原的限度是否符合规定。 热原检查是一种限度试验，反映了热原质引起哺乳动热原检查

2、是一种限度试验，反映了热原质引起哺乳动物复杂的升温反应过程，具有物复杂的升温反应过程，具有直观、代表性好的优点，是直观、代表性好的优点，是一种成熟方法，各国药典均有收载一种成熟方法，各国药典均有收载。热原检查热原检查二、适用品种二、适用品种 主要用于生物制品、抗生素、生化药品类注射剂及在主要用于生物制品、抗生素、生化药品类注射剂及在生产过程中容易被微生物污染或适宜微生物繁殖化学药品生产过程中容易被微生物污染或适宜微生物繁殖化学药品的注射剂；的注射剂； 做静脉注射的注射液，尤其是剂量较大的静脉滴注药，做静脉注射的注射液，尤其是剂量较大的静脉滴注药，更要注意热原检查。更要注意热原检查。 某些抗生素

3、、抗肿瘤药品、放射性药品等影响家兔正某些抗生素、抗肿瘤药品、放射性药品等影响家兔正常体温常体温, , 因此不适宜采用热原检查法。因此不适宜采用热原检查法。 目前存在着细菌内毒素检查逐步替代热原检查的趋势。目前存在着细菌内毒素检查逐步替代热原检查的趋势。热原检查热原检查三、剂量限值的确定三、剂量限值的确定家兔美家兔美1Kg1Kg体重注射体积不得少于体重注射体积不得少于0.5ml0.5ml；注射给药体积不超过注射给药体积不超过10ml/kg10ml/kg；如果供试品溶液浓度太低，给药体积需超过如果供试品溶液浓度太低，给药体积需超过10ml/kg10ml/kg才才能保证制剂安全性的，一建议改用细菌内

4、毒素检查；能保证制剂安全性的，一建议改用细菌内毒素检查；对大容量注射剂，应考虑供试品溶液的等渗、对大容量注射剂，应考虑供试品溶液的等渗、pHpH值等，值等，必要时需进行调整。必要时需进行调整。 热原检查热原检查四、结果判定四、结果判定如果如果3 3只家兔中，体温升高均低于只家兔中，体温升高均低于0.60.6，并且，并且3 3只家兔只家兔体温升高总和低于体温升高总和低于1.41.4。或在复试的或在复试的5 5只家兔中，体温升高只家兔中，体温升高0.60.6或或0.60.6以上的以上的家兔仅有一只，并且初试复试合并家兔仅有一只，并且初试复试合并8 8只家兔的体温的总只家兔的体温的总和为和为3.53

5、.5或或3.53.5以下，均认为供试品的热原检查符以下，均认为供试品的热原检查符合规定。合规定。细菌内毒素检查细菌内毒素检查一、方法：一、方法： 系利用鲎试剂来检测或量化由革兰阴性菌产生的细菌内系利用鲎试剂来检测或量化由革兰阴性菌产生的细菌内毒素，以判断供试品中细菌内毒素的限量是否符合规定的一毒素，以判断供试品中细菌内毒素的限量是否符合规定的一种方法。种方法。 在在GMPGMP条件下，无内毒素即无热原，控制内毒素就是控制条件下，无内毒素即无热原，控制内毒素就是控制热原，这是用细菌内毒素检查法代替热原检查法的依据。热原，这是用细菌内毒素检查法代替热原检查法的依据。 u两种方法：凝胶法和光度测定法

6、两种方法：凝胶法和光度测定法u凝胶法为凝胶法为限量限量测定方法，光度测定法为测定方法，光度测定法为定量定量测定方法测定方法细菌内毒素检查细菌内毒素检查u凝胶法分为：限量试验和半定量试验；凝胶法分为：限量试验和半定量试验； 光度测定法包括：动态浊度法、终点浊度法、光度测定法包括：动态浊度法、终点浊度法、 动态显色法、终点显色法动态显色法、终点显色法u两种方法可任选一种进行内毒素的检测两种方法可任选一种进行内毒素的检测u当测定结果有争议时，除有另有规定外，以凝胶法结当测定结果有争议时，除有另有规定外，以凝胶法结果为准果为准u标准品：国家标准品标准品：国家标准品标定、复核、仲裁标定、复核、仲裁 工作

7、标准品工作标准品复核、阳性对照复核、阳性对照细菌内毒素检查细菌内毒素检查二、适用品种：二、适用品种： 制剂：静脉注射、鞘内注射制剂：静脉注射、鞘内注射 原料：无菌分装原料原料：无菌分装原料 静脉注射用的抗生素类原料静脉注射用的抗生素类原料 不可灭菌制剂的原料（如生化药品、生物制品）不可灭菌制剂的原料（如生化药品、生物制品） 制备分装过程无法控制内毒素的注射剂的原料制备分装过程无法控制内毒素的注射剂的原料细菌内毒素检查细菌内毒素检查确定细菌内毒素限值（确定细菌内毒素限值（L）和最大有效稀释）和最大有效稀释倍数（倍数（MVD） L=K/M MVD=cL/生物制品的细菌内毒素限值 L=K/M L为供

8、试品的细菌内毒素限值 K为人每千克体重每小时最大可 接受的内毒素剂量以EU/(Kgh）表示，注射剂K=5EU/(Kgh），放射性药品注射剂K=2.5EU/(Kgh），鞘内注射剂K=0.25EU/(Kgh） M为人用每千克体重每小时的最大供试品剂量，以ml/(Kgh） mg/(Kgh）细菌内毒素检查细菌内毒素检查u适用情况：适用情况： 当进行新药的细菌内毒素检查试验前，或无细菌内当进行新药的细菌内毒素检查试验前，或无细菌内毒素检查项的品种建立内毒素检查法时，须进行干扰毒素检查项的品种建立内毒素检查法时，须进行干扰试验试验; 当鲎试剂、供试品的配方、生产工艺改变或试验环当鲎试剂、供试品的配方、生产

9、工艺改变或试验环境中发生了任何有可能影响试验结果的变化时，须重境中发生了任何有可能影响试验结果的变化时，须重新进行干扰试验。新进行干扰试验。 细菌内毒素检查细菌内毒素检查u注意点：注意点：最大有效稀释倍数是指供试品溶液被允许稀释的最大倍数，它最大有效稀释倍数是指供试品溶液被允许稀释的最大倍数，它和具体选用的鲎试剂的灵敏度有关。和具体选用的鲎试剂的灵敏度有关。由于不同厂商生产的鲎试剂其生产工艺、配方、质量参数等存由于不同厂商生产的鲎试剂其生产工艺、配方、质量参数等存在一定的差异，鲎试剂其抗干扰能力存在差别，因此应重视对在一定的差异，鲎试剂其抗干扰能力存在差别，因此应重视对鲎试剂的选择，或对鲎试剂

10、灵敏度的考察。鲎试剂的选择，或对鲎试剂灵敏度的考察。 三、验证试验三、验证试验 至少三批样品，按确定的限值和方法进行试验。至少三批样品，按确定的限值和方法进行试验。异常毒性检查异常毒性检查一、方法一、方法 系将一定剂量的供试品溶液注入小鼠体内或口服给药系将一定剂量的供试品溶液注入小鼠体内或口服给药, , 在规定的时间内观察小鼠出现的死亡情况在规定的时间内观察小鼠出现的死亡情况, , 以判定供试品以判定供试品中是否符合规定的一种方法。中是否符合规定的一种方法。 异常毒性是检查药品在生产制造过程中外来引入的异异常毒性是检查药品在生产制造过程中外来引入的异物或药物降解产生的不正常毒性反应，主要与生产

11、工艺水物或药物降解产生的不正常毒性反应，主要与生产工艺水平有关，而不是检查药物本身毒性。平有关，而不是检查药物本身毒性。异常毒性检查异常毒性检查二、适用品种二、适用品种生化药注射剂生化药注射剂( (如肽、蛋白质、酶及辅酶、多糖、脂质如肽、蛋白质、酶及辅酶、多糖、脂质等等) )及抗生素类注射剂；及抗生素类注射剂；某些中药注射剂；某些中药注射剂；在药品生产工艺进行较大改变后，特别是改变提炼、在药品生产工艺进行较大改变后，特别是改变提炼、精制工艺时，需要在生产过程中追踪检查各工艺段的精制工艺时，需要在生产过程中追踪检查各工艺段的半成品及成品的毒性试验。半成品及成品的毒性试验。异常毒性检查异常毒性检查

12、三、剂量限值的确定三、剂量限值的确定首先测定样品小鼠单次静脉给药的半数致死量（首先测定样品小鼠单次静脉给药的半数致死量（LDLD5050）和最小致死量（和最小致死量（LDLD5 5），并了解其毒性反应症状；），并了解其毒性反应症状；异常毒性检查剂量应低于样品正常毒性剂量（异常毒性检查剂量应低于样品正常毒性剂量（LDLD5 5），），并应高于人临床最大用药剂量；并应高于人临床最大用药剂量；对于未测出对于未测出LDLD5050的注射液，以每只小鼠的注射液，以每只小鼠0.8ml0.8ml的剂量按的剂量按常规速度（常规速度（3-53-5秒）静脉注射，仍未见死亡或毒性反应，秒）静脉注射，仍未见死亡或毒性

13、反应，可以该剂量作为异常毒性检查限值。可以该剂量作为异常毒性检查限值。 异常毒性检查异常毒性检查四、相关进展四、相关进展目前异常毒性检查法仅中国药典和英国药典有收载；目前异常毒性检查法仅中国药典和英国药典有收载；国外药典中，对大多数生物提取的生化药或由现代生国外药典中，对大多数生物提取的生化药或由现代生物技术得到的组份单一、结构明确的产品物技术得到的组份单一、结构明确的产品, ,一般不设定一般不设定异常毒性检查项；异常毒性检查项；WHO WHO 生物测定专家委员会在生物测定专家委员会在19971997年曾开会讨论异常毒年曾开会讨论异常毒性检查的必要性问题，认为其缺乏专属性和科学性，性检查的必要

14、性问题，认为其缺乏专属性和科学性，在实施在实施GMPGMP条件下生产的药品应当取消该项检查。条件下生产的药品应当取消该项检查。降压物质检查降压物质检查一、方法一、方法 系比较组胺对照品与供试品引起麻醉猫血压下降的程系比较组胺对照品与供试品引起麻醉猫血压下降的程 度，以判定供试品中所含降压物质的限度是否符合规定。度，以判定供试品中所含降压物质的限度是否符合规定。 降压物质是指某些药物中含有的能导致血压降低的杂降压物质是指某些药物中含有的能导致血压降低的杂 质，包括组胺、类组胺或其他导致血压降低的物质。质，包括组胺、类组胺或其他导致血压降低的物质。 降压物质检查降压物质检查二、适用品种二、适用品种

15、有可能产生类组织胺样急性降血压反应的静脉注射剂，有可能产生类组织胺样急性降血压反应的静脉注射剂，如生化药注射剂如生化药注射剂( (肽、蛋白质、酶及辅酶、多糖、脂质肽、蛋白质、酶及辅酶、多糖、脂质等等) )及抗生素注射剂；及抗生素注射剂；在用动物脏器或组织为原料制备生化药物的过程中，在用动物脏器或组织为原料制备生化药物的过程中，正常组织内存在的组胺及部分氨基酸脱羧形成的组胺、正常组织内存在的组胺及部分氨基酸脱羧形成的组胺、酪胺等胺类物质，均为这类杂质的来源。酪胺等胺类物质，均为这类杂质的来源。 降压物质检查降压物质检查三、动物灵敏度检查三、动物灵敏度检查 自静脉依次注入上述对照品稀释液，剂量按自

16、静脉依次注入上述对照品稀释液，剂量按动物体重每动物体重每1kg注射组胺注射组胺0.05ug、0.1ug及及0.15ug，重复，重复23次，如次，如0.1ug剂量所致的血剂量所致的血压下降值均不小于压下降值均不小于2.67kPa，同时相应各剂量，同时相应各剂量所致反应的平均值有差别，可认为该动物的所致反应的平均值有差别，可认为该动物的灵敏度符合规定。灵敏度符合规定。注： 组胺浓度为0.5ug/ml，则给药量为0.1、0.2、0.3ml/kg降压物质检查降压物质检查 取对照品稀释液按动物体重每取对照品稀释液按动物体重每1kg注射组胺注射组胺0.1ug的剂量的剂量(ds)，供试品溶液按品种项下规，供

17、试品溶液按品种项下规定的剂量定的剂量(dT),照下列次序注射一组照下列次序注射一组4个剂量：个剂量：ds、dT、dT、ds。然后以第一与第三、第二与第四剂量所致的然后以第一与第三、第二与第四剂量所致的反应分别比较；如反应分别比较；如dT致的反应值均不大于致的反应值均不大于ds所致反应值的一半，即认为供试品的降压物所致反应值的一半，即认为供试品的降压物质检查符合规定。质检查符合规定。无菌检查无菌检查微生物限度检查法非无菌药品的微生物限度标准是基于药品的给药途径非无菌药品的微生物限度标准是基于药品的给药途径及对患者健康潜在的危害而制订的。及对患者健康潜在的危害而制订的。（三）细菌与霉菌（三）细菌与霉菌口服给药制剂口服给药制剂细菌数每细菌数每1g不得过不得过l000cfu。每。每lml不得过不得过100cfu。霉菌和酵母菌数每霉菌和酵母菌数每lg或或lml不得过不得过100cfu。大肠埃希菌每大肠埃希菌每1g或或lml不得检出不得检出.活螨活螨 不得检出不得检出（一）致病菌 口服制剂每g或每ml不得检出大肠埃希菌，含动物药及脏器的药品同时不得检出沙门菌 含中药原生药粉还不得检出大肠菌群（大肠杆菌） 外用每g或每ml不得检出铜绿假单胞菌（绿脓杆菌）、金黄色葡萄球菌；梭菌；大肠埃希菌（眼、鼻、呼吸） 阴道、创伤、溃疡用制