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文档简介
1、微生物细胞进展大小丈量和细胞计数的方法。加强微生物细胞大小的感性认识。二、根本原理1、微生物细胞大小的丈量 微生物细胞的大小是微生物根本的形状特征,也是分类鉴定的根据之一。微生物大小的测定,需求在显微镜下,借助特殊丈量工具测微尺包括镜台测微尺和目镜测微尺。 测微尺原理:镜台测微尺是中央部分刻有准确等分线的载玻片,普通是将1mm等分为100格,每格长0.01mm(即10m)。镜台测微尺并不直接用来丈量细胞的大小,而是用于校正目镜测微尺每格的相对长度,然后再用目镜测微尺丈量微生物细胞的大小。二、根本原理2、显微直接计数 显微镜直接计数法是将小量待测样品的悬浮液置于一种特别的具有确定面积和容积的载玻
2、片上又称计菌器,于显微镜下直接计数的一种简便、快速、直观的方法。 血细胞计数板原理:计数板是一块特制的载玻片,其上由四条槽构成三个平台,中间较宽的平台又被一短横槽隔成两半,每一边的平台上各该有一个方格网,每个方格多共分为九个大方格,中间的大方格即为计数室。二、根本原理 每个计数室大方格边长为1mm,那么每个大方格的面积为1mm2,盖上盖玻片后,盖玻片与载玻片之间的高度为0.1mm,所以计数室的容积为0.1mm3即万分之一毫升。 每个计数室有25或16个中方格。计数时,通常数五个中方格的总菌数,然后求得每个中方格的平均值,再乘以25或16,就得出一个大方格的总菌数,然后换算成1ml菌液中的总菌数
3、。3、仪器或其他器具:目镜测尺、镜台测微尺、血球计数板、盖玻片、无菌吸管、酒精灯、显微镜、擦镜纸、滤纸等使两尺在某一区域内两线完全重合数出两重合线之间镜台测微尺和目镜测微尺所占的格数根据两测微尺重合格数,计算出目镜测微尺每格实践长度 。按上述步骤分别校正低倍镜、高倍镜和油镜的下目镜测尺每小格的实践长度。操作要点:察看光阴线不宜过强,否那么难以找到镜台测微尺的刻度。换高倍镜和油镜校正时,防止接物镜压坏镜台测微尺和损坏镜头。水冲洗计数室后,再用无水乙醇将血球计数室冲洗干净 置枯燥箱枯燥 。个菌体计算;个菌体计算;操作要点:操作要点:血球计数室要清洁。血球计数室要清洁。察看光阴线不宜过强,否那么难以
4、找到计察看光阴线不宜过强,否那么难以找到计数室。数室。汲取菌液前菌液要充分摇匀。汲取菌液前菌液要充分摇匀。血球计数室充溢菌液后,要静置血球计数室充溢菌液后,要静置5min。接目镜放大倍数:接目镜放大倍数:2将各菌测定结果填入下表将各菌测定结果填入下表mmmmm下次实验工程:培育基的配制与高压蒸汽灭菌校正公式:校正公式: 目镜测微尺每格长度目镜测微尺每格长度(m)(m)两重合线间镜台测微尺小格数两重合线间镜台测微尺小格数10/10/两重合线间目镜测微尺小格数两重合线间目镜测微尺小格数 16小方格小方格 25中方格计数室中方格计数室 25小方格小方格 16中方格计数室中方格计数室计数室的刻度有两种规格:计数室的刻度有两种规格: 计算公式:计算公式:25个中方格计算公式:个中方格计算公式:总 菌 液 中 的 总 菌 数 个总 菌 液 中 的 总 菌 数 个 / m l A/525104B 50000AB16个中方格计算公式:个中方格计算公式:总 菌 液 中 的 总 菌 数 个总 菌 液 中 的 总 菌 数 个
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