升清胶囊对胆囊胆固醇结石小鼠模型生化学指标的影响

1、升清胶囊对胆囊胆固醇结石小鼠模型生化学指标的影响 09-08-14 10:24:00 作者：章学林 编辑：studa20【摘要】 观察疏肝利胆中药升清胶囊对胆囊胆固醇结石小鼠生化学指标的影响。 方法：38只C57BL/6J雌性小鼠随机分为正常对照组(n=10)、模型组（n=15）和升清胶囊组(n=13)。除正常对照组外，模型组和升清胶囊组小鼠采用高脂饮食诱发法建立胆固醇结石模型。造模过程中，升清胶囊组小鼠予升清胶囊0.22 g/(kgd)灌胃治疗。8周后观察各组小鼠的成石率、血脂含量、血清钙离子浓度、肝脏丙二醛（malondialdehyde，MDA）含量及超氧化物歧化酶（superoxide

2、 dismutase，SOD）活性。 结果：模型组成石率为73.33%，明显高于正常对照组和升清胶囊组，差异有统计学意义（P0.01）。升清胶囊组血清总胆固醇和低密度脂蛋白含量低于模型组（P0.01），高密度脂蛋白含量高于模型组（P0.01）；升清胶囊组小鼠肝脏SOD活性升高和MDA含量下降，与模型组比较，差异有统计学意义（P0.05）。结论：升清胶囊可通过降低小鼠胆固醇结石模型成石率，改善血清和肝脏的生化学相关指标，从而发挥防治胆石病的作用。 【关键词】 升清胶囊 胆固醇结石 小鼠 胆固醇 丙二醛 超氧化物歧化酶 Zhang XL, Liang XQ, Gu HG, Ma EW, Lin T

3、B, Sun X, Zhang JZ. J Chin Integr Med/Zhong Xi Yi Jie He Xue Bao. 2008; 6(10): 10451048. Received April 10, 2008; published online October 15, 2008. Free full text (PDF) is available at . Indexed/abstracted in and full text linkout at PubMed. Forward linking and reference linking via CrossRef. DOI:

4、10.3736/jcim20081011Open Access Effects of Shengqing Capsule on biochemical parameters in mice with cholesterol gallstone Xuelin ZHANG1, Xiaoqiang LIANG2, Honggang GU1, Enwei MA1, Tianbi LIN1, Xun SUN1, Jingzhe ZHANG1 1. Department of Hepatobiliary Surgery, Longhua Hospital, Shanghai University of T

5、raditional Chinese Medicine, Shanghai 200032, China 2. Institute of Chinese Traditional Surgery, Longhua Hospital, Shanghai University of Traditional Chinese Medicine, Shanghai 200032, China Objective: To observe the effects of Shengqing Capsule (SQC), a compound of traditional Chinese herbal medici

6、ne, on biochemical parameters in C57BL/6J mice with cholesterol gallstone. Methods: Thirtyeight C57BL/6J mice were randomly divided into normal control group (n=10), untreated group (n=15) and SQC group (n=13). Cholesterol gallstone was induced in mice of the latter two groups by feeding high choles

7、terol diet. Mice in the SQC group were intragastricly administered SQC 0.22 g/(kgd). After 8week treatment, animals were sacrificed and sampled to calculate the incidences of stone formation. The contents of serum cholesterols and Ca2+, and the malonaldehyde (MDA) content and superoxide dismutase (S

8、OD) activity in liver tissues were detected. Results: The incidences of stone formation were 73.33% in untreated group, 0% in normal control group, and 23.08% in the SQC group. And the incidence in untreated group was significantly higher than those in the normal control group and the SQC group (P0.

9、01). Contents of serum total cholesterol (TC) and lowdensity lipoprotein cholesterol (LDLC) in the SQC group were lower than that in the untreated group (P0.01), and highdensity lipoprotein cholesterol (HDLC) in the SQC group was higher than that in the untreated group (P0.01). SQC could increase th

10、e SOD activity and decrease the MDA content in liver tissues, showing significant differences as compared with those in the untreated group (P0.05). Conclusion: SQC can decrease the incidence of stone formation and improve the biochemical parameters, which may be one of the mechanisms in the treatme

11、nt and prevention of cholesterol gallstone disease. Keywords: Shengqing Capsule; cholesterol gallstone; mice; cholesterol; malondialdehyde; superoxide dismutase 胆石病是一种世界范围的常见和多发疾病，其防治依然是当今医学界关心和注重的研究主题。临床上一般以手术治疗为主，但手术治疗存在适应症的限制和一定的风险，术后并发症、残留及复发结石的处理仍很棘手。因此，非手术疗法愈来愈受到重视，中医药在胆石病治疗中的优势正日显突出。本学科的前期研究工

12、作表明，疏肝利胆方药对胆石病具有确切的临床疗效1，但其药效规律和作用机制尚不明确。为此，本研究采用C57BL/6J小鼠胆囊胆固醇结石模型，拟进一步观察疏肝利胆中药对模型小鼠相关生化学指标的影响，为胆石病中医药治疗的更加系统和规范提供实验依据。 1 材料和方法 1.1 实验动物 38只雌性C57BL/6J小鼠，10周龄，体质量（202）g，SPF级，由上海必凯动物实验有限公司提供，批号为SCXK(沪)20030002。 1.2 仪器与试剂 Mgna FTIR750型红外光谱仪，美国Nicolet公司生产；CX31型生物显微镜，日本Olympus公司生产；AA200DS型电子天平，美国G&G公司生

13、产；Beckman J301高速冷冻离心机，美国Beckman公司生产；WFE UV2102 C型紫外可见分光光度计，上海Unico有限公司生产。总胆固醇（total cholesterol，TC）试剂盒，上海荣盛生物有限公司提供，批号为国食药监械(试)字2004第3060255号；低密度脂蛋白胆固醇（lowdensity lipoprotein cholesterol，LDLC）和高密度脂蛋白胆固醇（highdensity lipoprotein cholesterol，HDLC）试剂盒，北京北化康泰临床试剂有限公司提供，批号分别为国食药监械（准）字2004第3061197号和国食药监械（准

14、）字2004第3400558号；丙二醛（malondialdehyde，MDA）试剂盒、过氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）试剂盒和钙离子试剂盒，南京建成生物有限公司提供，MDA批号为20050106，SOD批号为20050108，钙离子试剂盒批号为20050107。 1.3 实验药物和致石饲料 升清胶囊（Shengqing Capsule, SQC）由生大黄、陈皮、虎杖3味中药组成，0.3 g60粒/瓶。批号为沪药制字Z05170981，由龙华医院制剂室生产提供。致石饲料配方为普通啮齿科饲料中加入15%脂肪（猪油）、1%胆固醇和0.5%胆酸，由上海斯莱克实验动物

15、有限责任公司提供。 1.4 动物分组、造模及药物处理 将C57BL/6J小鼠体质量均衡后，按随机数字表法随机分为正常对照组（n=10）、模型组（n=15）和升清胶囊组（n=13）。造模期间不限饮食、摄水。采用高脂饮食诱发法2建立小鼠胆囊胆固醇结石动物模型，正常对照组小鼠喂正常饲料，模型组小鼠喂致石饲料，升清胶囊组在喂致石饲料的同时予升清胶囊灌胃。升清胶囊灌胃剂量按成人用药剂量（60 kg体质量，升清胶囊2.7 g/d）与实验动物体型系数换算法计算3，灌胃剂量为36 mg/(kgd)，用生理盐水将升清胶囊配成144 mg/ml悬混液，1次/d灌胃。模型组及正常对照组小鼠予等体积生理盐水灌胃，连续

16、8周后取材。期间每周称取体质量一次，用以调整给药剂量。 1.5 标本采集和制备 各组动物均于灌胃第8周末，以15%乌拉坦腹腔注射麻醉，抽血处死。肉眼观察胆汁中成石情况，然后在冰盘上迅速摘取胆囊组织和肝脏，再仔细观察胆囊内成石情况。胆囊和肝脏组织于4 预冷的生理盐水中洗去余血，置80 冰箱保存备测。此外，将所抽血液在室温中静置2 h，低温离心获取血清，置于80 冰箱保存备测。 1.6 胆石红外光谱定性 采用溴化钾压片法测定胆结石样品。具体方法：均匀研细胆结石样品，取12 mg粉末与干燥的溴化钾粉末200 mg，在玛瑙研钵中均匀混合，然后装入压模，抽真空12 min，再加10 T左右的压力（同时抽真空），取出压片，放入Mgna FTIR750型红外光谱仪的样品光路，进行测试，参比光路置放溴化钾压片。 1.7 血清及肝脏相关指标的测定 血清TC、LDLC、HDLC含量及肝脏MDA含量、SOD活性均采用赖氏法测定；血清Ca2含