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文档简介
1、南京晓庄学院南京晓庄学院生命科学系实验教学中心生命科学系实验教学中心指点教师:吴雨龙指点教师:吴雨龙上课班级:上课班级:1. 了解溶血景象及其发活力制。2. 了解细胞膜的浸透性及各类物质进入细胞的速度。一、实验目的:一、实验目的: 细胞膜是细胞与环境进展物质交换的选择通透性屏障,是一种半透膜,可选择性控制物质进出细胞。 将红细胞放在低渗盐溶液中,水分子大量渗到细胞内,可使细胞胀破,血红蛋白释放到介质中,由不透明的红细胞悬液变为红色透明的血红蛋白溶液,这种景象称为溶血。二、实验原理:二、实验原理: 将红细胞放在某些等渗盐溶液中,由于红细将红细胞放在某些等渗盐溶液中,由于红细胞膜对各种溶质的通透性
2、不同,有的溶质可进入,胞膜对各种溶质的通透性不同,有的溶质可进入,有的溶质不能进入,进入红细胞的溶质能提高红有的溶质不能进入,进入红细胞的溶质能提高红细胞的浸透压,使水进入红细胞,引起溶血。由细胞的浸透压,使水进入红细胞,引起溶血。由于溶质透入速度不同,溶血时间也不同,因此,于溶质透入速度不同,溶血时间也不同,因此,发生溶血景象所需时间长短可作为丈量物质进入发生溶血景象所需时间长短可作为丈量物质进入红细胞速度的一种目的。本实验选用红细胞作为红细胞速度的一种目的。本实验选用红细胞作为细胞膜透性的实验资料,将其放入不同的介质溶细胞膜透性的实验资料,将其放入不同的介质溶液中,察看红细胞的变化。液中,
3、察看红细胞的变化。二、实验原理:二、实验原理: 1. 1. 器材:器材: 50ml50ml烧杯、烧杯、10ml10ml移液管、滴管、试管移液管、滴管、试管1212支、试管架支、试管架 2. 2. 试剂:试剂: 0.9%0.9%生理盐水;生理盐水; 2 2种低渗溶液:种低渗溶液:0.017mol/L0.017mol/L氯化钠和氯化钠和0.032mol/L0.032mol/L葡萄葡萄糖;糖;1010种等渗溶液:种等渗溶液:0.17mol/L0.17mol/L氯化钠、氯化钠、0.32mol/L0.32mol/L葡葡萄糖、萄糖、0.17mol/L0.17mol/L氯化铵、氯化铵、0.17mol/L0.
4、17mol/L醋酸铵、醋酸铵、0.17mol/L0.17mol/L硝酸钠、硝酸钠、0.12mol/L0.12mol/L草酸铵、草酸铵、0.12mol/L0.12mol/L硫酸硫酸钠、钠、0.32mol/L0.32mol/L甘油、甘油、0.32mol/L0.32mol/L乙醇、乙醇、0.32mol/L0.32mol/L丙丙酮。酮。 3. 3. 兔血兔血三、实验资料:三、实验资料:1. 兔红细胞悬液的制备: 取50ml小烧杯一只,加1份兔血和10份0.17mol/L氯化钠溶液,构成一种不透明的红色液体,此即稀释兔血。 四、实验步骤:四、实验步骤:2. 2. 溶血景象的察看:溶血景象的察看: 取试管
5、取试管2 2支,分别参与支,分别参与0.017mol/L0.017mol/L氯化钠氯化钠和和0.032mol/L0.032mol/L葡萄糖低渗溶液葡萄糖低渗溶液5ml 5ml ,再参,再参与与0.5ml0.5ml制备好的兔红细胞悬液,留意察看制备好的兔红细胞悬液,留意察看溶液颜色的变化,由不透明的红色悬液变溶液颜色的变化,由不透明的红色悬液变成透明的血红蛋白溶液红细胞发生破裂,成透明的血红蛋白溶液红细胞发生破裂,呵斥呵斥100%100%红细胞溶血,使光线比较容易透红细胞溶血,使光线比较容易透过溶液。过溶液。四、实验步骤:四、实验步骤:3. 3. 红细胞的浸透性红细胞的浸透性1 1取试管一支,参
6、与取试管一支,参与0.17mol/L0.17mol/L氯化钠溶氯化钠溶液液5ml5ml,再参与,再参与0.5ml0.5ml制备好的兔红细胞悬制备好的兔红细胞悬液,悄然摇动,混匀后静置于温室中,察液,悄然摇动,混匀后静置于温室中,察看试管中发生溶血的时间及其变化。看试管中发生溶血的时间及其变化。 留意能否有颜色变化?能否有溶血景象?为留意能否有颜色变化?能否有溶血景象?为什么?什么?四、实验步骤:四、实验步骤:2 2分别在以下几种等渗溶液中进展实验,分别在以下几种等渗溶液中进展实验,步骤同步骤同1 1。 0.32mol/L0.32mol/L葡萄糖葡萄糖 0.17mol/L0.17mol/L氯化铵
7、氯化铵 0.17mol/L0.17mol/L醋酸铵醋酸铵 0.17mol/L0.17mol/L硝酸钠硝酸钠 0.12mol/L0.12mol/L草酸铵草酸铵 0.12mol/L0.12mol/L硫酸钠硫酸钠 0.32mol/L0.32mol/L甘油甘油 0.32mol/L0.32mol/L乙醇乙醇 0.32mol/L0.32mol/L丙酮丙酮四、实验步骤:四、实验步骤:1 1、离心机运用时,要将配平后的离心管对称、离心机运用时,要将配平后的离心管对称放置在离心机内,制止未配平就放入离心放置在离心机内,制止未配平就放入离心机和非对称放置离心管。机和非对称放置离心管。2 2、试管中有红细胞和测试溶液时,不应强力、试管中有红细胞和测试溶液时,不应强力摇摆,以免呵斥人为的红细胞破裂。摇摆,以免呵斥人为的红细胞破裂。3 3、目测法判别规范:快速溶血:;慢、目测法判别规范:快速溶血:;慢速溶血:或;不溶血:。速溶血:或;不溶血:。五、本卷须知:五、本卷须知:记录察看到的景象,并对实验结果进展分析和比较。记录察看到的景象,并对实验结果进展分析和比较。六、实验结果:六、实验结果:试管编号试管编号是否溶血是否溶血时间时间结果分析结果分析1.5ml氯化钠+0.5ml稀释兔血2.5ml氯化铵+0.5ml稀释兔血3.5ml醋酸铵+0.5ml稀释兔血4.5ml
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