喹烯酮在鸡体内的吸收与分布

1、中国兽医科技1998年第28卷第3期量过多, 就会对人工接种时漏免或吃到卵囊很少的鸡产生一定的影响。为了把这种负影响减少到最低限度, 除了选用安全性高的弱毒疫苗之外, 有两个环节应该重视:第一, 人工免疫31接种一定要尽量作到均匀一致; 第二, 注意垫料管理, 特别要避免垫料湿度过大。我们在第2, 3批试验中将垫料湿度控制在25%30%左右, 取得了较为理想的效果。喹烯酮在鸡体内的吸收与分布王玉春薛飞群赵荣材严相林李金善杜小丽徐忠赞张继瑜(中国农业科学院中兽医研究所兰州730050药效试验及临床验证表明, 喹烯酮对肉用鸡具有抗菌及促生长作用; 毒理学试验证明喹烯酮的毒性极小, 不在体内蓄积,

2、也没有致癌、致突变、致畸形作用。本试验是为了解鸡经口服大剂量的喹烯酮后, 其在鸡体内的吸收与分布情况。1材料与方法1. 1仪器与药剂薄层扫描仪:CS -930型, 日本岛津产; 硅胶G F 254板:100mm ×200mm ×0. 2mm, 青岛海洋化工厂产, 在105活化1h 后置干燥器中备用; 微量进样器:10 L , 上海安亭微量进样器厂产; 喹烯酮:中国农业科学院中兽医研究所研制的新产品; 展开剂:体积比为3 1的乙酸乙酯与石油醚(沸程6090 。1. 2扫描条件反射法锯齿扫描, 在波长254nm 处检出荧光熄灭的暗红色斑点即是喹烯酮, 最大吸收波长320nm ,

3、 线性参数SX =3, 外标一点法, X =0. 2, 光束狭缝=2mm ×2mm 。1. 3喹烯酮标准液的配制取喹烯酮标准品2. 0mg , 加苯配制成200 g /mL 喹烯酮苯溶液, 置棕色容量瓶中保存备用。1. 4供试品溶液的制备1. 4. 1血样制备给10只出栏肉用鸡按体重2. 0g/kg 一次灌服喹烯酮后0, 15, 30min 及1, 2, 4, 8, 12, 24h 采血, 肝素抗凝, 以800r /min 离心10min 分离血浆, 取血浆1mL 置于10共进行3次, 合并提取mL 分液漏斗中, 用5mL 乙酸乙酯萃取。液, 置8090水浴箱蒸干乙酸乙酯后置于干燥器

4、中保存, 检测时用1m L 苯溶液定容。1. 4. 2组织样制备将制备血样的试验鸡在最后一次采血后放血处死, 取其心、肝、肺、肾和肌肉等组织各10g , 剪碎研磨后称取5g , 用乙酸乙酯萃取, 以后的步骤同血样制备。1. 5线性关系考察准确吸取喹烯酮的标准液1, 2, 3, 4, 5和6 L, 分别点于同一硅胶GF 254薄层板上, 按上述层析条件和扫描条件操作, 测定各斑点的面积分值并以点样量为横坐标, 斑点面积积分值为纵坐标作图。1. 6稳定性试验准确吸取喹烯酮标准苯溶液3 L 点于硅胶G F 254板上, 按上述层析条件展开, 在室温下避光保存, 每隔1h 按前述扫描条件测定一次峰面积

5、。3讨论中图分类号S859. 7收稿日期1997-08-1112341234样品加入量( g 0. 40. 40. 40. 40. 80. 80. 80. 8测得量( g 0. 250. 260. 250. 250. 700. 710. 700. 70回收率平均回收率(% 63. 7063. 7063. 4563. 9088. 0988. 1387. 7288. 0387. 990. 1860. 2163. 460. 2050. 32(%SD变异系数(CN%1. 7精密点测定在同一100mm ×200m m ×0. 2mm 硅胶G F 254薄板上点9个5 L 标准溶液点,

6、 按上述层析条件和扫描条件测峰面积积分值。1. 8回收率测定取鸡血浆2份, 每份1mL , 分别加入喹烯酮标准液, 使血浆内喹烯酮浓度分别为200和400 g/mL , 振荡均匀后放入冰箱内4h, 再用乙酸乙酯提取3次, 合并萃取液, 放入8090水浴箱中蒸干乙酸乙酯, 置干燥器中保存, 检测时用苯溶液定容。将样品及标准品液各点2 L 于同一硅胶G F 254板上, 每个样品液及标准品液各点2个点, 展开后测定斑点面积值, 用标准品的斑点浓度值计算喹烯酮的平均回收率。1. 9样品测定将已处理好的试样品用1mL 苯溶液定容溶解, 各取5 L 点于硅胶G F 254板上, 展开, 按上述扫描条件测

7、定峰面积。2结果线性关系考察表明, 喹烯酮在0. 21. 2 g 之间具有良好的线性关系; 回归方程为Y =13856. 59+3118. 09X , r =0. 9998。稳定性试验中形成稳定的斑点, 峰面积积分值不变。精密点测定结果, X=1737. 22, CV =2. 99%(n=9 。回收率测定结果详见表1。样品测定结果表明在血液及组织中均未测到喹烯酮的斑点面积值(扫描极限为0. 2 g 。表1喹烯酮回收率测定结果按上述层析条件和扫描条件, 测得喹烯酮标准品的斑点2,32Chinese Jour nal o f Vet erinar y Science and T echno lo

8、gy 1998Vo l . 28N o . 3在消化道中起作用, 之后通过粪、尿排出体外, 所以在血液中测不到喹烯酮, 证明在体内存留极少。液及组织中均未测得喹烯酮的斑点面积积分值(扫描最低极限为0. 2 g 。初步说明喹烯酮经口服后, 不易被机体吸收, 仅来 稿 摘 登临床症状大部分雏鸡呼吸困难、气喘, 张口呼吸并伴有雏雉鸡硒缺乏症的诊治1997年5月, 河南省西峡县某雉鸡场引进美国七彩雏雉鸡2000只, 以当地玉米、豆粕等饲料饲喂, 19日龄时发生以共济失调、头颈扭曲为主要特征的疾病, 以公雉多见, 发病率为34. 0%, 死亡率为21. 7%, 曾用抗生素、维生素A 、维生素D 3和维生

9、素B 1治疗, 效果不明显。临床症状病雏精神萎顿, 闭目缩颈, 翅下垂, 食欲减低或废绝, 腹泻, 排白色或水样粪便, 头下垂或后仰, 冠苍白, 流泪, 腹部和腿部皮下水肿, 呈蓝绿色; 共济失调, 行动迟缓, 两腿阵发性痉挛, 部分呈角弓反张, 最后衰竭死亡。剖检变化死雏雉鸡皮下组织水肿, 尤以胸、腹部为重, 呈黄色胶冻样浸润; 胸、腿部肌肉色泽苍白, 有出血点和出血斑, 并伴有黄白色条状、点状坏死灶; 心肌变性、坏死; 肌胃切面呈黄白色; 肝质脆, 呈棕黄色; 部分肠道和食道有坏死灶; 脑膜水肿, 表面有出血点。实验室检查病原分离无菌取死雏雉鸡的心、肝等组织, 接种于普通琼脂和麦康凯琼脂培

10、养基上, 经37培养24h, 未发现致病菌; 按常规方法进行病毒分离, 亦未发现致病病毒。显微镜检查抽取病雉鸡雏翅下静脉血抹片, 结晶紫染色、显微镜检查, 可见许多大小不等的颗粒, 说明病雏雉鸡体内谷胱苷肽过氧化物酶活性降低。血清学检查分别抽取10只病雉鸡雏翅下静脉血, 用定量分析法测定其血硒平均含量为2 g /L 。饲料分析从饲料中取样, 用定量分析法测定, 其硒含量质量分数为12 g/kg 。诊断确诊为雏雉鸡硒缺乏症防治大群用4mg /L 的亚硒酸钠水溶液饮水, 连用3d , 停药2d, 再用3d, 同时给加有维生素K 3的口服补液盐; 全群按每只300mg 投服维生素E 胶囊, 10d

11、1次, 连给3次; 重症者每只用1. 0g /L 的亚硒酸钠水溶液胸部肌肉注射1mL , 10d 1次, 共给3次; 更换饲料, 改喂全价日粮, 同时提高日粮中蛋白质尤其是含硫氨基酸的水平。(河南省西峡县畜牧局474500袁方赵金焕温学超张灵先朱少华罗音; 食欲减退或废绝, 饮欲增加; 下痢; 个别鸡一侧或双侧眼球发生白色混浊; 少数出现共济失调、角弓反张、麻痹等神经症状。剖检变化病变主要在肺、胸气囊, 可见炎症变化并散在大量黄色或灰黄色针尖至米粒大的结节, 有的呈绿色斑块, 有的气管可见同样病变。严重病例肺发生实质性变化, 胸气囊可见绒毛状绿色物; 腹腔浆膜表面有结节或灰绿色斑块; 脑、眼球

12、可见灰色病灶。实验室检查直接镜检采取肺部或气囊上的病变结节, 放入灭菌平皿内, 用镊子撕开, 取少量结节中心部分或菌丝团, 置于载玻片上, 滴加150g /L K OH 溶液12滴, 加盖玻片, 用酒精灯微微加温, 然后轻压盖玻片, 在低倍显微镜下观察。可见分枝状并带有横隔的菌丝和分生孢子, 菌丝直径约35 m 。分离培养以无菌小镊子取肺部小结节或斑块, 撕开, 以点种法接种于沙堡弱氏琼脂培养基平板上, 37培养2448h , 可见大量灰黄色至绿色菌落, 随着培养时间的延长, 菌落变为土黄色或暗绿色, 反面无色或黄褐色, 菌落从绒毛状变为羊毛状。挑取少许培养物置载玻片上, 滴加12滴生理盐水,

13、 以解剖针将菌丝体分开, 加盖玻片在低倍显微镜下观察, 可见具横隔的分枝菌丝, 分生孢子柄短、光滑, 常带淡绿色, 孢子囊顶端呈烧瓶状。诊断确诊为烟曲霉菌病处理选出无临床症状的雏鸡300多只, 移至无霉菌污染的笼舍饲养, 给予0. 5g /L 的硫酸铜溶液自由饮服4d , 同时按1kg 饲料中拌入100万IU 的制霉菌素, 连用5d 。鉴于病情严重, 建议销毁病鸡及污染垫料, 然后彻底清洁环境, 消毒鸡舍和用具, 最后用0. 5g /L 硫酸铜溶液喷洒。(福建省泉州市畜牧兽医站362000翁碧芬张瑞清 中国兽医科技敬告作者本刊已实行计算机编排, 敬请有条件的作者投稿时尽可能将打印稿和录排该稿件的磁盘同时寄于本部。排版软件可用北大方正、