作物生长环境单元6-5 实训任务单

1、7.7作物生长环境/教学单元6作物生长的营养环境/技能训练土壤速效磷含量的测定/实训任务单（书）实训项目名称技能训练 土壤速效磷含量的测定（0.5mol/L NaHCO3浸提钼锑抗比色法）编号技能训练6-5学习目标了解土壤速效磷含量测定的基本原理，熟悉土壤速效磷测定的操作，并能计算出土壤速效磷含量, 为合理分配和施用磷肥提供科学依据。工作任务1.学习土壤速效磷含量测定的基本原理2.熟悉土壤速效磷测定的操作3.分小组进行土壤速效磷的测定，计算出土壤速效磷含量。阅读资料作物生长环境课程教学资源，主要包括教学单元6学习手册文本、学习性任务单、实训任务单文本、学习评价表。教学单元6技术资料的文本、多媒

2、体课件、视频、图片等。实训任务实施（工作步骤、注意事项及工作记录）一、方法原理 用pH 8.5的0.5 mol/L NaHCO3作浸提剂处理土壤，由于碳酸根的存在抑制了土壤中碳酸钙的溶解，降低了溶液中Ca2+浓度，相应地提高了磷酸钙的溶解度。由于浸提剂的pH较高，抑制了Fe3+和AI3+的活性，有利于磷酸铁和磷酸铝的提取。此外，溶液中存在着OH-、HCO3-、CO32-等阴离子，也有利于吸附态磷的置换。用NaHCO3作浸提剂提取的有效磷与植物吸收磷有良好的相关性，其适应范围也较广。浸出液中的磷，在一定的酸度下，用硫酸钼锑抗还原显色成磷钼蓝，蓝色的深浅在一定浓度范围与磷的含量成正比，因此，可用比

3、色法测定其含量。二、仪器、试剂 1仪器用品 振荡机、分光光度计、天平（0.01g）、无磷滤纸、漏斗、量筒（100mL）、带塞三角瓶（250mL）、三角瓶（100mL）、吸量管（5mL、10mL）、容量瓶（50mL）。2试剂配制（1）0.5 mol/L NaHCO3溶液 称取化学纯NaHCO3 42.0g溶于800mL蒸镏水中，以0.5 mol/L NaOH溶液调节pH至8.5（用酸度计测定），然后稀释至1000mL。若贮存期超过一个月，使用前应重新调整pH。（2）无磷活性碳 化学纯，粉末状，不含磷。若含磷，先将活性炭用1：1（V/V）的盐酸浸泡过夜，然后在布氏漏斗上抽气过滤，用蒸馏水冲洗多次至

4、无CI-为止。再用0.5mol/L NaHCO3溶液浸泡过夜，在布氏漏斗上抽滤，用蒸馏水洗尽NaHCO3，检查至无磷为止，烘干备用。（3）7.5 mol/L硫酸钼锑抗贮存液 在1000mL烧杯加入约400mL蒸馏水，将烧杯浸在冷水中，然后缓慢注入208.3mL浓H2SO4（分析纯），并不断搅拌，冷却至室温。另称取分析纯钼酸铵20.0g溶于约60的150mL蒸馏水中，冷却。再将硫酸溶液慢慢倒入钼酸铵溶液中，不断搅拌，最后加入100mL 0.5%酒石酸锑钾溶液，用蒸馏水稀释至1000mL，摇匀，贮于棕色试剂瓶中避光保存。（4）硫酸钼锑抗混合显色剂 称取1.50g抗坏血酸（左旋，分析纯）溶于100m

5、L硫酸钼锑抗贮存液中，混匀。此试剂有效期在室温下为24h，在28的冰箱中可贮存7d。（5）磷标准溶液 准确称取在105烘箱中烘干2h的分析纯KH2PO4 0.2195g，溶于约400mL蒸馏水中。加浓硫酸5mL，然后转入1000mL容量瓶中，用蒸馏水定容，此溶液为50mg/L磷标准溶液。吸取上述磷标准溶液25mL，稀释至250mL，即为5mg/L磷标准溶液。此溶液不宜久贮。三、操作规程1磷标准曲线的绘制 分别吸取5mg/L磷标准溶液0 mL、1 mL、2 mL、3 mL、4 mL、5mL于50mL容量瓶中，再各加入0.5 mol/L NaHCO3溶液至10 mL，硫酸钼锑抗显色剂5.00mL，

6、充分摇动，赶净气泡，定容，摇匀，即得0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mg/L的磷系列标准液。30min后与待测液同时进行比色，读取吸光度值。在方格坐标纸上以吸光度值为纵坐标，磷溶液浓度为横坐标，绘制成工作曲线。2土壤浸提 称取通过1mm筛孔的风干土样5.00g置于250mL三角瓶中，加入一小勺无磷活性碳和100mL 0.5 mol/L NaHCO3浸提剂，塞紧瓶塞，于振荡机上在2025条件下振荡30min，取出后立即用干燥漏斗和无磷滤纸过滤，滤液承接于干燥三角瓶中。同时作空白实验。3待测液中磷含量的测定 吸取滤液10.00mL（含磷量高时，可吸取5mL或2mL，同时用0.5 mol/

7、L NaHCO3浸提剂补足至10mL）于50mL容量瓶中，加硫酸钼锑抗混合显色剂5.00mL，充分摇动，赶净气泡，定容。30min后，在分光光度计上用660nm波长比色，以空白测定调零，读取待测液的吸光度值，在工作曲线上查出显色液的磷浓度值（mg/L）。四、结果计算土壤速效磷（P，mg/kg）=式中：待测液磷含量为从工作曲线上查得的待测液磷浓度（mg/L）；待测液体积本实验为50mL；分取倍数为浸提液总体积（mL）/ 吸取滤液体积（mL）；烘干土质量单位为g。五、注意事项1.如果土壤速效磷含量较高，应减少浸提液的吸样量，并加浸提剂补足至10.00mL后显色，以保持显色时溶液的酸度，计算时按所取

8、浸提液的分取倍数计算。2.土样风干和贮存后，测定的速效磷含量可能稍有改变，但一般无大影响。3.对于酸性土壤，一般采用Bray法（盐酸-氟化铵提取钼锑抗比色法）。4. 在结果计算时，也可以用烘干土样的质量：烘干土质量风干土样质量×5此法温度影响很大，一般测定应在2025的温度下进行。如室温低于20，可将容量瓶放入3040热水中保温20min，取出冷却后比色。6加入混合显色剂后，即产生大量的CO2气体，由于容量瓶口小，CO2气体不易逸出，在混匀过程中易造成试液外溢，造成测定误差，因此必须小心慢慢加入，同时充分摇动排出CO2，以避免CO2的存在影响比色结果。7土壤速效磷含量等级参考标准见表实8-1。表实 8-1 耕层土壤速效磷含量等级（0.5mol/L NaHCO3浸提钼锑抗比色法）土壤速效磷（mg/kg）<101020>20土壤供磷