CD7抗原阳性急性髓系白血病免疫学分型及P糖蛋白检测

1、CD7抗原阳性急性髓系白血病免疫学分型及P糖蛋白检测【摘要】目的研究CD7阳性急性髓系白血病(CD7+AML)的临床生物学特征。方法对30例初治CD7+AML患者进行细胞形态学、免疫表型、多药耐药P糖蛋白、细胞遗传学检测。结果30例CD7+AML在同期262例患者中占11.4%, FAB分型中以M1多见，CD7+AML有较高的白细胞总数及原始细胞比例，与CD34表达、P糖蛋白表达高度相关。完全缓解率为43.3%，中位缓解时间为4个月。达缓解的中位时间为48天。结论CD7+AML患者缓解率低，缓解时间短，具有独特的临床生物学特征。【关键词】白血病，髓样，急性抗原，CD7免疫表型分型P糖蛋白 Im

2、munophenotype and P-glycoprotein expression in CD7 positive adult acute myeloid leukemiaHUA Dong,LI Jianyong,XIA Xueming,et al.First Affiliated Hospital,Suzhou Medical College,Jiangsu Institute of Hematology,Suzhou215006【Abstract】ObjectiveTo study the immunophenotype and P-glycoprotein expression in

3、 CD7 positive adult acute myeloid leukemia (CD7+AML).MethodsMorphology,P-glycoprotein,cytogenetics and immunophenotype were examined in 30 previously untreated CD7+AML patients.ResultsThe CD7 positive rate was 11.4% in 262 AML patients.CD7+AML patients had a significantly higher incidence of periphe

4、ral leukocytosis and blasts and FAB M1 subtype and were associated with CD34 and P-glycoprotein expression.42.3% of CD7+AML achieved complete remission with a median remission duration of 4 months,and a median time to CR of 48 days.ConclusionPatients with CD7+ AML are usually CD34 and P-glycoprotein

5、 positive.These patients had a lower CR rate and a shorter remission duration.【Key words】Leukemia,myeloid,acuteAntigens,CD7ImmunophenotypingP-glycoprotein随着急性白血病免疫学表型检测的广泛开展，CD7抗原阳性的急性髓系白血病(CD7+AML)独特的临床和生物学特征已渐为人们所认识。CD7+AML占成人AML的10%20%1，2。国内对成人CD7+AML报道甚少，且缺乏大系列研究3。我们对30例初诊成人CD7+AML免疫表型、临床生物学特征、多

6、药耐药P糖蛋白(P-gp)及其对预后的影响进行了探讨。对象和方法1对象我院1995年10月1997年7月就初治成人AML 262例进行常规免疫表型分析，发现CD7+AML 30例，以同期进行免疫学检查的52例住院CD7-AML患者作为对照组。所有病例均作细胞形态学和细胞化学检查，并按FAB标准分型。2方法2.1免疫表型测定：治疗前取骨髓，肝素抗凝，常规分离单个核细胞。采用活细胞间接免疫荧光法标记，流式细胞仪(FCM)检测。单克隆抗体(单抗)染色前单个核细胞与体积分数为10%正常人AB血清孵育30分钟，以阻断Fc受体所致的非特异性结合。第二抗体为标记异硫氰酸荧光素(FITC)的羊抗鼠免疫球蛋白。

7、单抗包括髓系相关的CD13、CD33；血小板系CD42b、CD61；T系相关的CD2、CD3、CD7；B系相关的CD10、CD19、CD22及干/祖细胞抗原CD34以及抗经典多药耐药(mdr1)P糖蛋白(P-gp)细胞膜外区域单抗UIC-2。CD42b、CD61为苏州医学院血栓室自制，其余单抗购自法国Immunotech公司。结果判断：T、B系抗原阳性细胞30%为阳性标准；髓系抗原阳性细胞20%为阳性标准；CD34、P-gp阳性细胞10%为阳性标准。2.2核型分析：染色体标本采自骨髓，直接法及24小时培养法处理标本，用R带方法显带，根据国际人类染色体命名法(ISCN，1995年)命名核型。2.

8、3诱导方案：采用高三尖杉酯碱或柔红霉素与阿糖胞苷联合化疗方案。疗效判断按照1987年全国白血病化学治疗讨论会制定的标准。3统计学处理数据以s表示，组间差异采用t检验或2检验。结果1CD7抗原表达与FAB亚型CD7+AML FAB亚型主要为M1、M2、M4、M5，而M3中无一例表达CD7抗原，M1、M2分别占36.7%、33.3%，与CD7- AML相比，前者差别有统计学意义(P0.05)(表1)。表1CD7抗原的表达与FAB亚型的关系组别例数M1M2M3M4M5M6M7M8CD7+AML301110034101CD7-AML52523859101 2CD7抗原与其它T系、B系抗原CD7+AML

9、中有13例同时表达CD2或CD10或CD19，占43.3%；CD7-AML组中仅11例，占21.1%。两组比较差异有显著性(P0.05)。3CD7抗原表达与CD34和P-gp30例CD7+AML中有22例表达CD34，占73.3%，明显较CD7-AML组(30.7%)高(P0.05)；16例表达P-gp，占53.3%，显著高于CD7-AML组中P-gp阳性率(15.4%)(P0.01)。4细胞遗传学检查30例CD7+AML中13例有染色体核型异常，包括+8 1例，5q-，6q-各2例，9q- 1例，t(8；21)1例，复杂异常3例，其它异常3例。CD7-AML中有17例核型异常。CD7+AML

10、染色体核型异常与CD7-AML组相比，差异无显著性(P0.05)。5CD7+AML临床生物学特征CD7+组中男性患者比例，外周血白细胞计数及原始幼稚细胞比例比CD7-组高(P0.05)，虽然CD7+组平均年龄较CD7-组低，但差异无显著性，二组之间血小板、血红蛋白、肝脾肿大差异均无显著性(表2)。 表2CD7+AML患者的临床生物学特征组别例数年龄(岁)性别(男/女)外周血WBC(109/L)外周血原始细胞肝、脾肿大百分率(%)BPC(109/L)Hb(g/L)CD7AML3035.711.021/956.447.00.7020.18956.742.538.240.721.4CD7-AML52

11、41.415.727/2524.533.70.5450.32141.640.721.472.417.4P值0.050.050.050.050.050.050.05 6治疗效果6.1缓解率：在治疗的26例CD7+AML中，仅11例(42.3%)获得完全缓解，52例CD7-AML中完全缓解率为73.1%，CD7+AML的完全缓解率明显低于CD7+ AML(P0.05)。CD7+AML组从诱导治疗到获得完全缓解的时间为(42.615.6)天，显著较CD7-AML组(28.37.2)天长。6.2持续缓解期：随访了31例完全缓解病例，其中包括8例CD7+及23例CD7-AML。8例CD7+AML中6例复

12、发，其中5例在6个月内复发，中位缓解期仅4个月，2例分别缓解10和15个月；23例CD7-AML中，16例复发，6个月、1年复发率分别为13.1%和52.1%，中位缓解期为10.5个月。 讨论CD7抗原为一相对分子质量为40103的单链糖蛋白，主要表达在所有胸腺细胞，大部分外周血的T淋巴细胞和NK细胞表面，因此，在白血病免疫分型间期作为T系早期的一个良好标志用于T淋巴细胞白血病的诊断及其亚型的划分。随着免疫分型的开展，人们发现在部分AML细胞表面有CD7抗原表达，阳性率一般在10%20%，我们在262例初治成人AML中发现30例CD7抗原表达阳性，阳性率为11.4%，与CoCo等4的结果相仿，

13、而低于Poeta等5的报告。这可能与所用的检测方法及单克隆抗体的种类有关。文献报道，CD7抗原在FAB分型各亚型的表达阳性率M1、M5高于M2、M4，M6偶见，M3迄今为止未发现CD7阳性病例，而我们的研究报告中以M1、M2为最多， 分别占36.7%、 33.3%， M4、M5较少，M3未见表达。有人认为，微小分化型急性髓系白血病(M0)中CD7表达较多，而我们仅发现1例M0有CD7表达，可能部分病例与我们免疫分型时有髓系分化抗原表达而诊断为AML的其它类型有关。CD7AML不仅干/祖细胞抗原CD34表达较高，而且存在着CD2及B淋巴系抗原CD10、CD19的表达，但按照Catovsky等6制

14、定的系列积分标准，尚不足以诊断杂合性白血病，提示CD7+AML可能是起源于CD7/CD34多能造血干细胞或更早期造血阶段的独立类型。我们发现CD7AML主要发生在青壮年男性，且外周血白细胞、原始幼稚细胞比例较高。与文献报道基本一致，但中枢神经系统侵犯CD7AML患者未见明显增多。本组30例CD7AML患者中仅11例获完全缓解，且持续完全缓解时间较短，这可能与CD34抗原、P-gp高表达有一定关系，提示CD7对现行的各种AML化疗方案治疗反应差，预后不良。有人提出对CD7AML标准诱导无效的患者改用急性淋巴细胞白血病方案治疗，有可能取得一定的疗效，在今后的工作中我们将作进一步研究。作者单位：21

15、5006李建勇、夏学鸣（苏州医学院附属第一医院、江苏省血液研究所）华东(现在江苏省无锡市第四人民医院)；王爱青、耿美菊、阮长耿(苏州医学院核医学重点实验室)参考文献1 Eto T,Akashi K,Harada M,et al. Biological characteristics of CD7 positive acute myeloid leukemia. Br J Haematol,1992,82:508.2 Kita K,Miwa H,Nakase K,et al. Clinical importance of CD7 expression in acute myelocytic le

16、ukemia. Blood,1993,81:2399-2405.3 刘征辉,张学光,夏学鸣,等. 表达CD7 抗原的急性髓细胞白血病.中华血液学杂志,1996,17:84.4 lo CoCo FL,de Rossi G,Pasqualetti D,et al. CD7 positive acute myeloid leukemia: A subtype associated with cell immaturity. Br J Haematol,1989,73:480.5 Poeta GD,Stasi R,Venditti A,et al. CD7 expression in acute myeloid leukemia. Blood,1993,82:2929-2932.6 Catovsky D,Mafutes E,Buccheri V,et al.