HPLC法测定咳停口腔崩解片中盐酸麻黄碱的含量

1、HPLC法测定咳停口腔崩解片中盐酸麻黄碱的含量                        【摘要】 目的 建立咳停口腔崩解片中盐酸麻黄碱的含量测定方法，为咳停口腔崩解片质量标准研究提供科学依据。方法 采用HPLC法测定了中药咳停口腔崩解片中盐酸麻黄碱的含量。色谱条件：Diamnosil C18(4.6mm×250mm,5m)柱，以乙腈-0.5%

2、磷酸(含0.2%三乙胺) (10:90)为流动相；检测波长为210nm。结果 此方法线性良好，平均加样回收率为99.2%。结论 本方法精密度高，重现性好，可用于中药咳停口腔崩解片的质量控制。(含0.2%三乙胺) (10:90)为流动相；检测波长为210nm。结果 此方法线性良好，平均加样回收率为99.2%。结论 本方法精密度高，重现性好，可用于中药咳停口腔崩解片的质量控制。【关键词】 咳停口腔崩解片 盐酸麻黄碱 高效液相色谱 含量测定【Abstract】 Objective To establish the content determination method of ephedrine h

3、ydrochloride in Keting orally disintegrating tablets. Method HPLC method was established,Diamnosil C18(4.6mm×250mm,5m) Column was used, mobile phase consisted of Acetonitrile 0.5%phosphate(contain 0.2%triethylamine) (1090)and detected at UV 210nm。Results Linearity of this method was well with t

4、he average recoveries was 99.2%。Conclusions Thismethod is accurate, reliable and reproducibility and suitable for the quality control of Keting orally disintegrating tablets. 【Key words】Keting orally Disintegrating tablets Ephedrine hydrochloride HPLC determination 咳停口腔崩解片是由麻黄、桔梗、苦杏仁、甘草等多味中药为原料制成的中药

5、复方制剂，具有止嗽、定喘、祛痰之功效。用于咳嗽，喘急气短。方中麻黄是咳停口腔崩解片的君药，其所含的药用有效成分主要是盐酸麻黄碱(Ephedrine Hydrochloride)。故我们选择盐酸麻黄碱作为含量测定指标，对本品中所含的盐酸麻黄碱的含量进行测定。因本品药味多，成分复杂，干扰严重，本文对样品处理方法学进行了考察，经色谱条件优化，建立了HPLC法并测定了该制剂中盐酸麻黄碱。该方法专属性强，灵敏度高，重复性好，为中药咳停口腔崩解片的质量标准研究提供了科学依据。 1 仪器与试药 1.1仪器 高效液相色谱仪：Waters 600E泵；Shimadzu Libror AEL 40SM(十万分之一

6、)天平(日本岛津所); SYZ-A石英亚沸高纯水蒸馏器(江苏信达仪器厂)。 1.2试药 盐酸麻黄碱(中国药品生物制品检定所提供，批号：171241-200404)；乙腈(色谱纯, Tedia Company, Inc., Fairfield, OH,USA)，磷酸、三乙胺(广州试剂厂，分析纯)；咳停口腔崩解片规格：0.5g/片。 2 实验方法与结果 2.1 色谱条件的选择 色谱柱：Diamnosil C18(4.6mm×250mm,5m) (迪马公司产)；流动相：乙腈-0.5%磷酸(含0.2%三乙胺) (1090)；柱温：30；流速1ml/min；检测波长为210nm。在此色谱条件下

7、，盐酸麻黄碱与样品中其他组分分离良好，理论板数按盐酸麻黄碱对照品峰计大于3000。缺麻黄阴性对照无干扰 2.2 供试品溶液的制备 取口崩片细粉4 g，精密称定，置索氏提取器中，加浓氨试液5ml、乙醚25ml，放置24小时，加乙醚置水浴上加热回流提取4h，将提取液移至分液漏斗，容器用少量乙醚洗涤，洗液并入分液漏斗中，加盐酸滴定液(0.5mol/L)振摇提取3 次（20、10、10ml），合并酸液，滤过，滤液加氢氧化钠试液使呈碱性，加氯化钠饱和，用乙醚振摇提取3 次（20、10、10ml），合并乙醚液，减压蒸干，残渣加甲醇溶解，转移至50ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，微孔滤膜(0.45m)滤过，

8、取续滤液，作为供试品溶液。 2.3 线性关系考察 精密称取盐酸麻黄碱对照品10.42mg，置50ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，得盐酸麻黄碱对照品溶液；分别精密吸取上述对照品溶液5l、10l、20l、30l、40l，注入液相色谱仪，按上述色谱条件测定盐酸麻黄碱峰面积，以对照品进样量X(g) 为横座标、峰面积值Y(mv.s) 为纵座标，绘制标准曲线，测定结果表明，盐酸麻黄碱对照品在进样量1.042g-8.336g范围内呈良好的线性关系，回归方程为：Y=2723963X50686r=0.9996。        

9、;                      2.4 精密度试验 精密吸取上述对照品溶液20l, 重复进样5次, 测定盐酸麻黄碱峰面积值，相对标准偏差RSD为0.8%，结果表明进样精密度良好。 2.5 稳定性试验 取样品1份，照上述方法制备供试品溶液，精密吸取同一供试品溶液20 l，在上述条件下，每隔一定时间进样, 测定盐酸麻黄碱峰面积值,求得相对标准偏差RSD为1.5%, 结果表明样品在24小时

10、内基本稳定。 2.6 重复性试验 取咳停口腔崩解片6份，照供试品溶液制备方法制备供试品溶液，精密吸取供试品溶液20l进样，测定，计算含量，求得盐酸麻黄碱含量平均值为1.256mg/片；相对标准偏差RSD为2.7%。结果表明本法测定的重复性良好。 2.7 准确度试验 采用加样回收法, 取已知含量样品(盐酸麻黄碱含量为：1.256mg/片)6份，精密称取各约2g，分别精密加入盐酸麻黄碱对照品，照供试品溶液制备方法制备，按上述色谱条件，精密吸取供试品溶液20l进样，测定，计算，求得盐酸麻黄碱平均回收率为99.2%；相对标准偏差RSD为1.4%。 2.8 样品的测定 照前述方法，对三批样品进行盐酸麻黄

11、碱的含量测定。结果三批的含量分别为1.256mg/片、1.284mg/片、1.243 mg/片，平均值为1.261 mg/片。 3 讨论 3.1 检测波长的选择查阅盐酸麻黄碱的HPLC测定文献，其中有选择了207nm、210nm，254nm，257nm等不同波长来进行含量测定，我们通过对照品的UV图谱测定，确定了测定波长应为210nm，此波长下各组分分离良好，满足含量测定的要求。 3.2 流动相的选择 HPLC测定选择了几种流动相体系，以乙腈-水(2080)；乙腈-0.2 mol·L-1磷酸二氢钾(1090)；乙腈-0.5%磷酸(含0.2%三乙胺) (1090)；通过比较分离情况，确

12、定了上述体系为流动相，采用含少许碱性的三乙胺溶液作为洗脱剂，可以有效的改善盐酸麻黄碱的分离效果，使各成分得到了较好的分离，满足含量测定的要求。 3.3样品的处理在筛选供试品制备方法时发现，采用简单乙醚萃取就可以进行水苏碱的含量测定，但所得图谱中杂质峰较多。改用酸萃取后再碱化再乙醚萃取法净化后，能除去样品中的大部分杂质，改善分析效果，所以我们采用此法对样品进行处理。经回收试验证明此方法可行。 3.4 小结 本研究建立的HPLC法，可以测定咳停口腔崩解片中主要成分盐酸麻黄碱的含量。此方法具有操作方法简捷，分析条件易于精确控制，待测成分易于分离等优点，且具有较好的重现性和较高的精密度，为中药咳停口腔崩解片的质量标准的制订提供了科学依