糖尿病肾病患者血清CC趋化因子升高并与AGE.肽相关

1、糖尿病肾病患者血清CC趋化因子升高并与AGE.肽相关                                        作者：孙子林，金晖，李世云，弓玉祥，李丽，张林，刘必成，刘乃丰，戴德哉【关键词

2、】  糖尿病肾病     Abstract:Objective To investigate the expression of angiotensin（Ang）type1（AT1）receptors in the kidney of diabetic rats and its effects of blocking renin-angiotensin system（RAS）.Methods Diabetic rats were given angiotensinreceptor blocker，irbesartan（40mgkg-1 ），an

3、giotensin-converting enzyme inhibitor，fosinopril（40mgkg-1 ），and irbesartan plus fosinopril（20mg1 对象和方法     1.1 研究对象     正常健康对照（NC）组46例，来自东南大学附属中大医院健康查体中心。DM病人176例，为2000年6月至2004年12月在东南大学附属中大医院内分泌科住院的病人，排除伴有急慢性感染性疾病、严重心脑血管病变、肾功能不全、其他系统性疾病以及有严重DM急性代谢并发症者，根据尿白蛋白水平

4、分为3组:正常蛋白尿（DM N）组，尿微量白蛋白（UMA）<30mg（24h）-1 ;微白蛋白尿（DM Mi）组，UMA30300mg（24h）-1 ;显性蛋白尿（DMMa）组，UMA>300mg（在预先用抗人MCP.1抗体包被的酶标孔里加入50l孔-1 的生物素标记二抗。然后50l孔-1 加入稀释的MCP.1标准品和待测样品，室温下孵育2h。洗板后加入100l孔-1 链白亲和素标记的髓过氧化物酶，孵育30min。洗板后100l孔-1 加入预混好的TMB显色液，孵育30min后加入反应终止液，酶标仪测450nm吸光度并作标准曲线，求出所测样品的MCP.1浓度（pg按试剂盒说明书操作

5、。用标准稀释剂B将标准品和血清样本稀释后加入酶标孔（100l），继之加入稀释剂A100l和辣根过氧化物标记的RANTES共轭剂50l，室温孵育2h。洗板后加入显色反应底物液200l，避光孵育30min。终止反应后酶标仪测450nm吸光度，根据标准曲线自动求出样品RANTES浓度（ngml-1 ）。      1.4 数据分析和处理     所有样品均重复3次检测，数据以x±s表示，用统计软件Prism3.0分别行方差分析和Newman-Keuls检验分析。   &#

6、160;                         2 结  果     与NC组比较，DM患者血清MCP.1（634.15±248.24）pgml-1 vs（359.36±134.30）pgml-1 ，P<0.01（图1）、RANTES（56.91±15.78）ng

7、ml-1 vs（12.34±2.28）ngml-1 ，P<0.001（图2）和AGE.P水平（2.86±0.71）Uml-1 vs（1.38±0.31）Uml-1 ，P<0.001（图3）均明显增高。 3 讨  论     越来越多的研究证实趋化因子特别是CC趋化因子（包括MCP.1和RANTES）通过募集单核巨噬细胞在肾小球或间质浸润参与DN发生的早期事件。国内外文献710 一致报道DN患者尿MCP.1和RANTES增高，但关于DM和DN患者血清MCP.1和RANTES水平的意义尚存在争议。Banba

8、等7 和Wada等8 几乎同时报道各自的小样本观察结果，显示DM不同水平蛋白尿各组之间以及和正常对照之间血清MCP.1无差异。新近Petrkova等11 观察到DM合并周围血管病变者血清MCP.1增加。而Nomura的多次结果显示DM12 以及合并高血压13 者血清MCP.1和RANTES水平显著高于无DM者。国内黄文辉等10 比较每组15例不同蛋白尿水平的DM患者与正常人血清MCP.1、RANTES水平，结果显示各组均值基本一样。而包艳等9 检测总共31例DM患者和10例健康人血清MCP.1，从无白蛋白尿到显性蛋白尿各组有逐步增加趋势，正常对照最低，但无统计学差异。  &

9、#160; 作者先前的初步观察14 发现32例糖尿病患者血清MCP.1水平明显高于23例正常对照组。本研究扩大样本后观察结果与以前一致，而且观察到血清MCP.1水平随DN加重逐步增高（尽管DM Ma组与DM Mi组无统计学差异），提示血清MCP.1有助于判断DN的程度，尤其是预测早期DN的发生。由于高糖、糖基化蛋白7 等许多因子可刺激细胞合成MCP.1，DM N组MCP.1增高可能与高血糖及其相关的代谢产物作用有关。此外，DM患者血清RANTES水平高于正常对照，与Nomura等的结果12，13 一致。但DM各亚组间RAN-TES水平无统计学差异，提示血清RANTES水平对判断DN病变程度帮助

10、不大。参考文献          1WOLF G.New insights into the pathophysiology of diabetic ne-phropathy:from haemodynamics to molecular pathologyJ.Eur J Clin Invest，2004，34（12）:785.796.    2YAMAGISHI S，INAGAKI Y，OKAMOTOT，et al.Advanced gly-cosylation end produc

11、t-induced apoptosis and overexpression of vas-cular endothelial growth factor and monocyte chemoattractant pro-tein-1in human-cultured mesangial cellsJ.J Biol Chem，2002，277（23）:20309.20315.    4WANG B R，LIUN F.Gene expression of monocyte chemoattrac-tant protein-1in human monocytes by

12、 exposure to advanced glyco-sylation end productsJ.Acta Pharmacol Sin，2001，22（1）:67.70.    6李世云，孙子林，刘乃丰，等.AGEs-BSA对人肾系膜细胞分泌RANTES的影响初探J.东南大学学报（医学版），2003，22（6）:363.365.    7BANBA N，NAKAMURAT，MATSUMURAM，et al.Possible re-lationship of monocyte chemoattractant protein-1with diabetic ne-phropathyJ.Kidney Int，2000，58（2）:684.690.    8WADAT，FURUICHI K，SAKAI N，et al.Up-regulation of mono-cyte chemoattractant protein-1in tubulointerstitial lesions of human diabetic nephropathyJ.Kidney Int，2000，58（4）:1492.1499.    11PETRKOVA J，SZOTKOW