薄层色谱扫描法测定黄枳胶囊中大黄酚、大黄素和大黄酸的含量

1、薄层色谱扫描法测定黄枳胶囊中大黄酚、大黄素和大黄酸的含量【摘要】目的成立黄枳胶囊中大黄酚、大黄素、大黄酸的含量测定方式。方式采纳薄层色谱扫描法。展开剂：正己烷-乙酸乙酯-甲酸(30：10:，检测波长入S=435nm,XR=610nm。结果大黄酚、大黄素和大黄酸别离在652五、357五、Ug范围内呈良好线性关系。结论本法简单、准确、重复性好,可用于黄枳胶囊中大黄酚、大黄素和大黄酸的含量测定。【关键词】薄层色谱扫描法；黄枳胶囊；大黄酚；大黄素；大黄酸；含量测定Abstract：ObjectiveToestablishamethodfordeterminationofchrysophanol,emo

2、dinandrheininHuangzhicapsules.MethodChrysophanol,emodinandrheininHuangzhicapsuleswasdeterminedbyTLC-scanningwithamixtureofn-hexane-ethylacetate-formicacid(30：10：asthedevelopingsystem.Thedetectionwavelengthwas435nmand610nm.ResultsThecalibractioncurveofchrysophanol,emodinandrheinwaslinearintherangeof6

3、525,3575,Ugrespectively.ConclusionThemethodwassimple,accuratewithgoodrepeatability,andsuitableforthecontentdeterminationofchrysophanol,emodinandrheininHuangzhicapsules.Keywords：TLC-scanning；Huangzhicapsules；chrysophanol；emodin；rhein；contentdetermination黄枳胶囊是由大黄、白芍、火麻仁、瓜篓等组成,具有润肠通便的功效,关于肠燥便秘有专门好的疗效,其

4、中大黄为该制剂的君药。本实验以大黄酚、大黄素、大黄酸为指标,参考有关文献资料及实验研究,采纳薄层色谱扫描法（TLCS）测定了3批黄枳胶囊中大黄酚、大黄素、大黄酸的含量,成立和完善了木制剂的质控方式。1仪器与试药CAMAGIH型薄层色谱扫描仪；CAMAG点样仪；定量毛细管（瑞士CAMAG公司）；硅胶H薄层板（青岛海洋化工集团）。黄枳胶囊（安徽中医学院第一附属医院制剂中心提供，批号、）；大黄酚（批号0796-200208）、大黄素（批号0756-200510）.大黄酸（批号0757-200405）对照品均购自中国药品生物制品检定所。所用试剂均为分析纯。2方式与结果对照品溶液的制备别离周密称取大黄酚

5、、大黄素、大黄酸，加甲醇别离制成每1mL含有mg、每1mL含有mg、每1mL含有mg的大黄酚、大黄素、大黄酸对照品溶液。取同体积对照品混合,制成对照品混合液（内含大黄酚3mg/mLs大黄素7mg/mL、大黄酸mg/mL）o供试品溶液的制备取本品2g,周密称定，置具塞锥形瓶中。周密加入甲醇25mL,称定重量,加热回流1h,放冷,再称定重量，用甲醇补足减失的重量,摇匀，滤过。取续滤液5mL,水浴蒸干,残渣加8%盐酸溶液10mL,超声处置2min,再加三氯甲烷10mL,加热回流1h,放冷。置分液漏斗中，用少量三氯甲烷洗涤容器，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷层，酸液再用三氯甲烷提取3次,每次10mLo归

6、并三氯甲烷液,减压回收溶剂至干,残渣加甲醇10mL使溶解，作为供试品溶液1。色谱条件吸附剂：硅胶H板。展开剂：正己烷-乙酸乙酯-甲酸（30：10：,预饱和30min2o检测波长供试品溶液、对照品溶液经点样展开后，在400700nm内对大黄酚、大黄素、大黄酸进行波长扫描,3种成份的最大吸收峰相近，应选用入S=435nm,入R=610nm。线性关系的考察周密吸取对照品混合液、UL,别离点于同一硅胶H板上,展开，掏出，晾干，扫描得峰面积。以点样量为横坐标、峰面积为纵坐标作图,得标准曲线。见表1。表1线性关系实验结果（略）阴性对如实验按处方组成和工艺要求制成缺大黄的样品，按”项下方式制得阴性对照溶液。

7、取阴性对照溶液、大黄酚、大黄素和大黄酸对照品溶液与供试品溶液点于同一硅胶H板上,展开,掏出，晾干,阴性对照溶液在对照品溶液斑点相应位置上无斑点,经薄层扫描后，阴性对照溶液在对照品溶液斑点相应位置上无相应的峰，说明阴性无干扰。周密度实验吸取混合对照品溶液1uL,点于同一硅胶H薄层板上，依法展开后，掏出，晾干，扫描得峰面积积分值,结果大黄酚、大黄素、大黄酸的RSD别离为、%、%，说明周密度良好（n=6）。稳固性实验吸取供试品溶液点于同一硅胶H薄层板上,依法展开后,掏出，晾干,在室温下放置。按上述色谱条件扫描7次,每次距离30min,测得峰面积积分值，并计算平均值。大黄酚、大黄素、大黄酸的峰面积RS

8、D别离为、，结果说明3h内稳固。重复性实验周密称取同一批（批号）样品6份,按"”项下方式制备,并别离点样,展开,掏出，晾干,扫描测定峰面积积分值。得各成份峰面积积分值并计算其含量，大黄酚、大黄素和大黄酸含量的RSD别离为、和%,结果说明其重复性良好（n=6）。加样回收率实验周密称取同一批（批号）供试品5份，别离加入必然量的大黄酚、大黄素、大黄酸，并按“"项下方式制备，依法展开后，测定三者的含量,计算回收率。结果见表2。表2加样回收率实验结果（略）样品含量测定取3个批号的黄枳胶囊（批号、），按“项下方式制备，吸取供试品溶液3UL、混合对照品溶液UL和UL,点于同一硅胶H板上,依法展开，测定3批黄枳胶囊中大黄酚、大黄素、大黄酸的含量。结果见图一、表3。表3含量测定结果（略）3讨论在400700nm波长范围对大黄酚、大黄素、大黄酸进行扫描,其最大吸收峰别离为430、44二、433nm,在610nm处有最小吸收,故采纳折中的方式确信最大吸收波长为435nm,参比波长为610nm。实验中曾采纳峰高来计算含量,但误差较大,受点样量大小和温湿度的阻碍,故本实验采纳峰面积来计算含量。大黄酚、大黄素、大黄酸的含量测定要紧方式包括TLCS和HPLC法，经比较,TLCS法操作更为简便，且利用大黄酚、大黄素和大黄酸3个成份最大吸收峰相近,