贯叶连翘的研究进展

1、贯叶连翘的研究进展        【摘要】  贯叶连翘具有广泛的药理活性，在抑郁症、爱滋病以及肿瘤方面的应用前景而成为当前国际研究开发的热点。文章介绍了贯叶连翘的化学成分、活性成分的提取方法和药理作用，为进一步研究和开发贯叶连翘提供理论基础。 【关键词】  贯叶连翘； 化学成分； 药理作用贯叶连翘又名贯叶金丝桃1，欧洲名为St.john's wort，俗称为圣约翰草。贯叶连翘系藤黄科金丝桃属多年生草本植物，是世界上分布最广的天然植物。贯叶连翘在民间已有二千四百余年的药用。传统中医药学认为

2、，其性平，味辛苦涩，具有清心明目、舒经活血、止血生肌、解毒消炎、利湿之功效2。在欧洲等国主要用于治疗抑郁症、甲型和乙型肝炎及爱滋病等。近年来也发现其对恶性神经胶质瘤有抑制作用3。1  贯叶连翘的主要药理成分    贯叶连翘具有多种化学成分。主要有苯并二蒽酮类化合物（Naphthodianthrones）、间苯三酚化合物（Phloro glucinols）、黄酮类化合物（Flavonoids）4。深入地研究使人们发现贯叶连翘中的黄酮类在抗抑郁作用中起着不可忽视的作用。1.1  苯并二蒽酮类化合物苯并二蒽酮类化合物主要包括金丝桃素（Hyperici

3、n）、伪金丝桃素(Pseudohypericin)、异金丝桃素（Isohypericin）、环金丝桃素（Cyclopseudohpericin）、原伪金丝桃素（Protitpseudohypreicin）等。其含量以金丝桃素和伪金丝桃素为主，鲜植物中含有的原金丝桃素和原伪金丝桃素在阳光下可分别转化为金丝桃素和伪金丝桃素。1.2  间苯三酚化合物间苯三酚类物质广泛存在于藤黄科植物中。这类化合物的主要成分为贯叶金丝桃素（Hyperforin）和加贯叶金丝桃素（Adhyperforin）。贯叶金丝桃素含量为2%4.5%，加贯叶金丝桃素为0.2%1.9%。1.3  黄酮类化合物贯叶

4、连翘黄酮成分相当丰富，全草达到了9.25%，而且比金丝桃素要稳定，不用避光和热，具有较好的开发前景。已经鉴定的有槲皮素（Quercetin）、芦丁（Rutin）等，具有抗炎、抗病毒、收敛止血、止泻等功效。2  贯叶连翘中活性成分提取方法2.1  金丝桃素的提取从化学结构式分析，金丝桃素在极性溶剂和非极性溶剂中溶解度都很高，但在非极性溶剂中极易被氧化，在极性溶剂中如甲醇、乙醇、乙醚中具有较好的稳定性，同时它具有多个酚羟基呈弱酸性，易溶于弱碱物质5。醇提法存在产品易吸湿，发粘的缺点。卢群等6优化出的最佳提取工艺是：药材4倍量的甲醇，40浸提3次，12 h/次。王晓利等7以甲醇为

5、溶媒，采用回流提取与超声振荡提取，考察提取率，最后确定以甲醇超声提取30 min提取率最高。2.2  黄酮类成分的提取关于贯叶连翘中黄酮物质的提取方法少有报道。目前比较通用的方法有：水提取法、碱液提取法、微波或超声波提取法、大孔树脂法、超滤法以及超临界萃取法等。瞿发林等8研究结果表明贯叶连翘中总黄酮的最佳提取条件为60%，乙醇80 ml，回流提取3 h。李莹等9研究表明采用乙醇热回流法，以金丝桃苷为指标，用量分数为80%乙醇10倍量，热回流提取2次，每次0.5 h可以提高金丝桃苷的提取率。各种方法各有优缺点，要根据提取物的性质、提取成本、工艺设备等条件来选择合适的提取工艺，提高黄酮类

6、物质的提取率和原料的利用效果。3  贯叶连翘提取物的药理作用    目前已知，贯叶连翘提取物中至少含有10种成分有药理作用。金丝桃素被认为是贯叶连翘提取物中最具有生物活性的物质，国内外已完成了金丝桃素抗爱滋病期临床试验10，治疗恶性神经胶质瘤的临床研究也在进行之中。3.1  抗抑郁作用体外实验表明，贯叶连翘提取物的抗抑郁活性是多种成分综合作用的结果，其机制也不是单一的，不同的活性成分具有不同优势的抗抑郁机制11。    金丝桃素的抗抑郁作用较为独特，它以相近的效能同时抑制5-HT、多巴胺、去甲肾上腺素的摄取，并有广

7、谱的摄取抑制作用，还可抑制-氨基丁酸和L-谷氨酸的摄取。这种广谱的摄取抑制作用提示金丝桃素的抗抑郁作用机理可能与其他抗抑制药不同，即它可能不是通过与不同的迁移分子上特定的位点结合，而是通过介入神经递质转化功能而发挥抗抑郁作用。    贯叶连翘中的金丝桃素对单胺氧化酶丙二醛（MAO）的抑制作用一直被公认为贯叶连翘抗抑郁的主要作用机理，然而该假设并未在一些实验中得到证实。金丝桃素对神经递质的摄取抑制作用为贯叶连翘抗抑郁作用的主要作用机理，其他的一些药理作用也可以解释其临床疗效。贯叶连翘的蒽酮部分也有抗抑郁作用，但是似乎不是其抗抑郁作用的主要成分，因为去掉蒽酮的贯叶连翘

8、提取物仍然具有抗抑郁作用。由于贯叶连翘提取物及其制剂与传统化学抗抑郁药相比具有疗效好、副作用小等特点12，贯叶连翘已经是世界上最畅销的抗抑郁症植物药之一。其中最有说服力的是Linde等13的报道，治疗轻度和中度抑郁症患者时，含有金丝桃素类成分的贯叶连翘提取物治疗效果明显优于安慰剂，与标准抗抑郁药物（三环类）相比，疗效相同而副作用小。3.2  抗病毒作用3.2.1  对HIV的作用朱晓薇等14报道了金丝桃素抗HIV逆转录酶的作用。金丝桃素2 g/ml与HIV一同培养，结果显示HIV逆转录酶活性降低了75%。美国研究人员采用口服0.5 mg/kg金丝桃素，对30例爱滋病感染者进

9、行临床观察，结果16人CD4值保持稳定或有所上升，表明患者免疫状况好转。3.2.2  对包膜病毒的作用实验者将金丝桃素与病毒预培养后接种于细胞，发现0.781.56 g/ml金丝桃素可有效杀灭型单纯疱疹病毒（HSV-1）、流感病毒A（Brazil）和莫洛尼鼠白血病毒。Maraleda等15通过对乙肝病毒（DHBV）模型研究金丝桃素对乙肝病毒的抗病毒活性，结果表明浓度为110 g/ml，金丝桃素可在5 d或更长时间中阻断感染DHBV的细胞产生病毒颗粒。3.3  抗肿瘤作用3.3.1  金丝桃素抗肿瘤作用金丝桃素是贯叶连翘中最具生物活性的物质之一，也是贯叶连翘抗抑郁、

10、抗病毒、抗肿瘤的主要活性成分之一。目前用金丝桃素进行肿瘤的光动力治疗（PDT），在体外细胞药效、动物实验等方面的研究十分活跃。金丝桃素的“抗癌谱”非常广，对多种癌症均有良好的疗效，其中皮肤癌的PDT已经进入期临床试验阶段。目前已知金丝桃素的抗肿瘤机制至少有3种，即直接杀灭、引发凋亡和局部血管闭塞导致的续发性细胞死亡。3.3.2  贯叶金丝桃素抗肿瘤作用贯叶金丝桃素对光、氧气、温度敏感，极其不稳定，存放几个星期可以完全分解，因此它的药效作用常被忽视。但随着对贯叶连翘提取物活性作用的研究发现，贯叶金丝桃素不仅是贯叶连翘提取物抗抑郁的主要活性成分之一，且还具有显著的抗肿瘤活性。Schemp

11、p CM等16认为其机制可能是贯叶金丝桃素激活了线粒体介导的信号转导通路，从而诱导肿瘤细胞凋亡。Katarina Hostanska等17的报道证实了贯叶金丝桃素与金丝桃素在抑制K562和U937细胞生长时的协同作用。由于贯叶金丝桃素具有显著的抗肿瘤活性、体内低毒性、天然资源含量丰富，使其有望开发成一种新型的抗肿瘤药物。3.3.3  黄酮类化合物抗肿瘤作用贯叶连翘中的槲皮素作为界分布最广的黄酮类化合物，不仅对多种致癌剂、促癌剂有拮抗作用，而且可以抑制多类恶性肿瘤细胞的生长和转移18。其他许多黄酮类物质均有类似的抗癌活性。贯叶连翘中的黄酮类物质含量相当丰富，在贯叶连翘的抗癌活性中所起的

12、作用不容忽视。1         4  应用成果    受社会竞争加剧和人口老龄化的影响，我国抑郁症的发病率已呈现出上升趋势。但在抗抑郁症药物开发方面许多化学药物副作用给应用带来影响，国内外已着眼于天然植物药的提取与筛选，寻求疗效更好的天然药物及保健品。其中应用较多的为贯叶连翘。200008，国家食品药品监督管理局批准了德国威玛舒培博士大药厂的圣约翰草提取物片剂进入，商品名为“路优泰”。 据报道，在德国所有的抑郁症药物中，这一系列药物占了临床用药的40%。贯叶连翘提取物及其制

13、剂在我国属于中药5类药物，是当前的热门品类。国内关注这一药物的较多，而且贯叶连翘提取物其制备方法及药物组合物的中国专利已被授权。据了解，湖北丽益科技有限公司、上海市中药研究所、北大维信的开发工作均有了实质性的进展。    随着贯叶连翘抗抑郁作用认识的不断深入，贯叶连翘及金丝桃素类成分已越来越成为国外医药工作者研究的热点。贯叶金丝桃浸膏制剂已在德国上市，并占德国抗轻度、中度抑郁症药市场的50%。在抗病毒方面的研究工作发现金丝桃素在细胞培养中可抑制逆转录病毒的复制，美国和以色列的家发现金丝桃素和伪金丝桃素具有抗逆转录病毒的作用，现已完成了它的抗爱滋病临床研究。5

14、60; 研究意义    贯叶连翘具有良好的药理活性，因为其在治疗抑郁症、爱滋病以及肿瘤方面的应用前景而成为当前国际研究开发的热点。我国的贯叶连翘资源十分丰富，但研究和利用尚在起步阶段，还未载入任何形式的法定质量标准，在剂型标准和提取工艺上忽视了对贯叶金丝桃素的研究。贯叶连翘提取物及其制剂的研究不但涉及重大疾病的治疗，而且还与重大社会问题有关。鉴于此，有必要对贯叶连翘的化学成分、活性成分的提取方法、药理作用等方面进行研究，以期能结合中西医理论和临床经验，开发各类新药。【】  1 吴建铭，祝 建，夏春镗，等.贯叶连翘中金丝桃素的合成与积累研究进展J.热带亚热

15、带植物学报，2007，15(3)：263.2 中科院西北植物研究所.秦岭植物志(第一卷，第三册)M.北京：科学出版社，1981：303.3 Anke L,Gopalakrishna R,Jones KD, et al.Hypericin in adjuvant brain tumor therapyJ.Drugs of the Fubure, 1995,20(5):511.4 徐 皓.贯叶连翘化学成分及药理作用研究J.安徽农业科学，2007，35(14):4219.5 赵 晶，张致平，陈鸿珊.金丝桃素和乙基金丝桃素的合成及对人体免疫缺陷逆转录酶的抑制活性J.药学学报，1998，33(1)：67

16、.6 卢 群.正交试验法研究金丝桃素提取工艺J.广东药学院学报，2002，18(4)：270.7 王晓利，张俊松，罗 谦，等.HPLC法测定贯叶连翘药材及提取物中金丝桃素的含量J.中药材，2006，29(10)：1047.8 瞿发林.贯叶连翘药材中总黄酮的含量测定研究J.时珍国医国药，2004，15（7）：395.9 李 莹，禹玉洪，杨书良，等.贯叶连翘的提取与除鞣工艺研究J.哈尔滨商业大学学报（科学版），2006，22(2)：12.10 杨得彼，甘良春，王冬梅.贯叶连翘薄膜片中金丝桃素和金丝桃素类化合物的HPLC和UV测定J.中国医药杂志，2004，35(9)：548.11 杨得彼，甘良春，

17、胡海燕.国外对贯叶连翘抗抑郁疗效的临床验证J.中西医学结合学报，2004，2(3)：231.12 Anna R.B. etal Evaluation of chemical stability of st.John's wort commercial extract and some preparationsJ.Internation Journal of Pharmacentics. 2001，213：199.13 Linde K,Ramirez G, Mulrow CD, et al. st.John's wort for depression-an overview an

18、d meta-analysis of randomized clinical trialsJ.BMJ,1996,313(7052):253.14 朱晓薇.贯叶金丝桃研究进展-药代动力学、药效学和临床应用J.国外医药：植物药分册，1998，13(5)：210.15 Maraleda g，wu tt,jilbert ar,et al.Inhibition of duck hepatitis Bvirus replication by hypericinJ.Antiviral Res,1993,20(3):235.16 Schempp cm,Kirkin v,Simon-haarhavs b et al. Inhibition of tumor cell growth by hyperforin, a novel anticancer drug from st.John's wort that acts by induction of apoptosisJ.oncogene,2002,21(8):1242.17 Katarina Hostanoka,Juergen Reichlin,Silvia Bommer, et al.Hyperforin a constituent of St.John's wort (