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文档简介
1、全血基因组 DNA/RNA 提取纯化试剂盒说明书一、产品简介【中文名称】 全血基因组 DNA/RNA 提取纯化试剂盒【英文名称】 Blood Genomic DNA/RNA Isolation and Purification Kit【提取原理】本产品磁性颗粒可高度特异性地结合核酸分子 DNA 及 RNA。提取过程中,生物样品经裂解液处理后,释放出的 DNA/RNA 特异性地结合在磁珠表面.磁珠粒子被磁性材料捕获后,通过洗涤过程将非特异结合物除去.结合在磁珠上的 DNA/RNA 被洗脱液洗脱。【试剂盒特点】全血基因组 DNA/RNA 提取试剂盒采用本公司发明并拥有专利的 UniQ 系列磁珠微粒
2、子分离纯化技术,可从同一生物样品同时提取纯化 DNA 及 RNA. 本产品特点是操作简便、快捷,纯化程度高,可重复性好,并可广泛适用于多种生物样品,包括全血,体液,细胞,组织等。提取的 DNA、RNA 可应用于 PCR,RT-PCR,测序,Nouthern 杂交,Southern 杂交,突变分析,SNP,RNAi 及其它常见的分子生物学下游应用。整个操作步骤不需要中和、澄清,等步骤.特别适合于大量提取。操作流程-样品处理,UniQ 系列磁珠吸附,洗涤和洗脱。 【技术优势】UniQ系列磁珠法从同一生物样品中同时纯化核酸DNA及RNA为世界首创技术.此技术具有巨大优势:UniQ磁珠微粒子独特的品质
3、(大小和形状的一致性) 使得对目标物的结合和处理更加快速并有效;微量样本,高效纯化;操作流程快速且简单;无需有机溶剂;无需高盐溶液;无抑制物混杂;除了样本处理过程,均无需离心。二、试剂盒组成 (100T)组成数量裂解液(Lysis Buffer) 1 瓶,45ml/瓶洗液(Washing Buffer)10 瓶,45ml/瓶洗脱液(Elution Buffer)13 管,1ml/管UniQ 磁珠(UniQ Magnetic Beads)10 管,1ml/管使用手册 (Manual)1 份三、储存/稳定性1 所有试剂均储存于室温(+15 to 25) ,所有未开封的试剂盒在标签上注明的有效期内很
4、稳定。2 产品外包装注明有效期,请在有效期内使用。四、需用户自备的材料水(不含 DNA 酶和 RNA 酶)、各类试剂、样品以及具备标准实验设备。五、试验须知和试验技巧在开始试验操作前,建议你阅读此内容。1)使用前必须充分了解各项操作规定以及仔细阅读说明书,严格按说明书操作。2)操作过程中应自始至终佩戴一次性手套并经常更换手套,以避免手、臂上以及裸陋皮肤接触到各类试剂,一旦溅到皮肤上,应立即用大量的水冲洗干净。3)在下列实验步骤操作中,其中 第 4-7 步骤如发现管壁或管盖上有液体时,最好离心将其甩至管底。4)在下列实验步骤操作中,可视实验不同需要在实验步骤 2 或 PCR 实验之前加入标准品。
5、六、操作步骤1. 每份 250l(最多)生物样品(用 DNA 标准品时此时可用适当 buffer 稀释)加入 50l protease K(25mg/ml in nuclease free water), 轻柔混匀。2. 每份混合物中加入 300l Lysis buffer, 轻柔混匀后室温孵育 10min(如用纯化 RNA 进行实验,RNA 在此时加入混合物中) 。3. 每份上述混合物中加入 0.1 ml 磁珠(加磁珠前尽量使磁珠充分悬浮混匀) ,用旋转混合器室温孵育20min(60-120 rpm) 。4. 用磁力架(promega 12 well magnetic seperator)分
6、离磁珠与液体,30sec-1min 弃上清。5. 加入 750l 洗液 washihg buffer,轻柔混匀(avoid pepitting and vortex) ,分离 30sec-1min,弃上清。重复 4 次。最后一次尽量除尽液体,并晾干 10min。6. 每管加入 25-100l 洗脱液(标准品通常用 100l,血浆样品通常用 25l) ,混匀,60孵育 10min,期间每 2-3min 混匀一次。7. 用磁力架分离磁珠与洗脱产物,收集洗脱产物,取适量跑 agrose 胶或进行后续 PCR 反应。注:操作流程图如图1,目前UniQ系列磁珠法全血基因组DNA/RNA纯化试剂盒用于大部分样品的DNA/RNA提取。
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