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文档简介

1、最新修正版0.25(1 m。细菌形态学检查法考点显微镜的种类及应用不染色细菌标本检查法细菌染色标本检查法【内容讲解】细菌的形态学检查:不染色标本检查法染色标本检查法显微镜是观察细菌形态所必备的基本工具。形态学检查(镜检)的意义:可以迅速了解标本中有无细菌及大致的菌量;根据细菌形态、结构和染色性有助于对病原菌的初步识别和分类,为进一步作生化反应、血清学鉴定 提供依据。可得到初步诊断,对临床早期诊断和治疗疾病有一定的参考意义。一、显微镜普通光学显微镜暗视野显微镜相差显微镜荧光显微镜电子显微镜普通光学显微镜以自然光或灯光为光源,显微镜的最大分辨率为波长的一半,即暗视野显微镜多用于检查不染色的活细菌和

2、螺旋体的形态及运动观察。LightSpKrrwiiPhis*叭 r J iUflhtOb*ctiv*Dark-feti stop相差显微镜利用相差板的光栅作用,将光相的差异转换成光的强度的差异,使细菌中的某部分结构比其他部分深 暗,衬托出鲜明的对比。本法主要用于检查不染色活细菌的形态及某些内部结构。Pbas« Ccntratt Light Path way ftC«nd*n««rArinuUr f i尺吨UQht蠢化 Figuife 1荧光显微镜以高压汞灯产生的紫外光或蓝紫光为光源细菌经荧光素染色后,置于荧光显微镜下,即可激发荧光, 在暗色的背景下可以看

3、到发射荧光的细菌。用于细菌、病毒等的诊断或鉴别 。I;电子显微镜以电子流代替光源能分辨1nm的物体,细菌的表面形态和内部超微结构均能清楚地显现。 扫描电子显微镜:适于对细菌表面结构及附件的观察。透射电子显微镜:适于观察细菌内部的超微结构。二、不染色细菌标本的检查主要用于检查生活状态下细菌的动力及运动状况。压滴法悬滴法毛细管法:厌氧菌动力观察动力判断:细菌如有动力,有明显的方向性位移;细菌如无动力,受水分子撞击细菌呈现布朗运动,只在原地颤动而无位置的改变。三、细菌染色标本的检查在普通光学显微镜下可以观察细菌的形态、大小、排列、染色性、特殊结构(芽胞、荚膜、鞭毛)、 异染颗粒等。常用染料: 碱性染

4、料(basic dye )带正电染料。其阳离子部分为发色基团,可与细胞中带负电的组分结合。 如碱性复红、结晶紫、美蓝 等。 酸性染料(Acid dye )带负电染料。其阴离子部分为发色基团,可与细胞中带正电的组分结合。 如伊红、刚果红等。 复合染料一碱性染料和酸性染料的复合物。等。如瑞氏染料(伊红美蓝)、姬姆萨染料(伊红天青)细菌染色法H单染色注彭喋色法S胞渠色ft荚膜染6注 细胞壁染色祛1I抗彎妙I革细菌染色的基本程序:涂片7干燥7固定7染色(初染7媒染7脱色7复染)单染色法用一种染料将细菌和周围物体染成同一种颜色。细菌经单染色法处理后,可观察其形态、排列、大小 及简单的结构,但不能显示各种

5、细菌染色性的差异。复染色法用两种或两种以上染料染色的方法,称为复染色法或鉴别染色法。常用的有革兰染色法和抗酸染色法。革兰染色法(Gram Stain )由丹麦医生Ha ns Christian Gram 于1884年创立。是细菌学中最经典、最常用的染色方法。 方法:结晶紫一一碘液一一95%酉精一一稀释石炭酸复红革兰染色法(Gram Stain )临床意义:鉴别细菌:将所有细菌分为 G菌和G菌两大类,可初步识别细菌,缩小范围,有助于进一步鉴定。选择药物参考与细菌致病性有关:大多G菌的致病物质是外毒素,而G菌大多能产生内毒素,两种致病作用不同。抗酸染色将细菌分为两大类:即抗酸性细菌和非抗酸性细菌。

6、临床上主要用于结核病、麻风病等的细菌检查。疑似结核分枝杆菌感染的标本,经抗酸染色后,若查见红色抗酸杆菌,可报告为“找到抗酸分枝杆菌”,即可作出初步鉴定。对临床疾病的诊断和治疗具有重要参考价值。【例题】用于观察细菌超微结构的显微镜是A普通光学显微镜 B暗视野显微镜C相差显微镜D荧光显微镜E、电子显微镜答疑编号 502389070101【正确答案】E【例题】不属于细菌形态学观察的是 平板分区划线观察单个菌落 革兰染色观察细菌染色性 鞭毛染色观察细菌的动力 光镜观察细菌形态 暗视野显微镜观察细菌动力E、:答疑编号 502389070102【正确答案】A【例题】不染色标本在普通光学显微镜下主要用于检查细菌的形态动力结构大小排列方式答疑编号 502389070103E、【正确答案】B【例题】不染色标本在普通光学显微镜下主要用于检查细菌的动力。常用方法有 玻片法试管法压滴法划线法悬滴法E、答疑编号 502389070104【正确答案】CE【例题】结核分枝杆菌常用的染色法是 姬姆萨染色法抗酸染色革兰染色镀银染色法墨汁染色法E、答疑编号 502389070105【正确答案】BE、【例题】革兰染色所用染液的顺序是 稀释复红7碘液7酒精7结晶紫 结晶紫7酒精7碘液7稀释复红 稀释复红7结晶紫7碘

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