芳酸及其酯类药物含量测定

1、药品检验技术课程单元教学设计情境：芳酸及其酯类药物的分析（06） 任务：芳酸及其酯类药物含量测定(04) 教学目标设计序号5上课地点理实一体化教室授课形式讲授、学生操作练习教 学 目 标技能目标知识目标能够利用酸碱滴定法测定阿司匹林、苯甲酸、布洛芬的含量、利用双相滴定法测定苯甲酸钠的含量、利用紫外可见分光光度法测定丙磺舒的含量水杨酸类药物含量测定原理；苯甲酸类药物含量测定原理；布洛芬类药物含量测定原理。教 学 重 点能够利用酸碱滴定法测定阿司匹林、苯甲酸、布洛芬的含量、利用双相滴定法测定苯甲酸钠的含量、利用紫外可见分光光度法测定丙磺舒的含量教 学 难 点能够利用酸碱滴定法测定阿司匹林、苯甲酸、

2、布洛芬的含量、利用双相滴定法测定苯甲酸钠的含量、利用紫外可见分光光度法测定丙磺舒的含量能力训练任务及案例通过案例分析和实验操作让同学们更好的掌握酸碱滴定法测定阿司匹林、苯甲酸、布洛芬的含量、双相滴定法测定苯甲酸钠的含量、紫外可见分光光度法测定丙磺舒的含量。教学进程设计（下面各格均可合并）步骤教学内容教学方法教学手段学生活动时间分配知识点讲解含量测定原理的讲解结合案例分析测定方法教师举例、点评、归纳概括引出知识点。任务引导分组实验操作，让同学们更好的掌握实验操作技能45分钟本课主要讲解了芳酸及其酯类药物含量的测定例如：一、水杨酸类药物的含量测定1酸碱滴定法含有游离羧基的芳酸类药物，呈酸性，且酸性

3、较强，如水杨酸、双水杨酯、阿司匹林原料药均可用碱滴定液直接滴定测定其含量。例8：阿司匹林的含量测定取本品约0.4g，精密称定，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）20mL溶解后，加酚酞指示液3滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）滴定。每1mL氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）相当于18.02mg的C9H8O4。其反应式为：此法为直接滴定法，测定结果计算如下： （6-1）式中，T滴定度，每1mL滴定液相当于多少克数； V滴定液体积，mL； ms供试品质量，g； F浓度校正因子，本测定中为滴定液实际浓度/0.1。为了增加阿司匹林的溶解性，且防止阿司匹林酯结构在滴定时水解，致使测定结果偏高，故选用中

4、性乙醇溶液溶解样品进行滴定。本品是弱酸，用氢氧化钠滴定时，化学计量点偏碱性，故指示剂选用在碱性区变色的酚酞。滴定时应在不断振摇下稍快地进行，否则会因碱局部浓度过大引起阿司匹林水解，温度应控制在040之间为宜。本法简便、快速，但缺乏专属性，易受水杨酸及乙酸的干扰，因此不宜用于水杨酸含量较高样品的测定。2高效液相色谱法高效液相色谱法具有在线分离分析的功能，能消除药物制剂中的杂质、辅料等成分所产生的干扰，因此被广泛应用于药物制剂的含量测定。中国药典2010年版（二部）采用高效液相色谱法测定阿司匹林片、阿司匹林肠溶片、阿司匹林肠溶胶囊、阿司匹林泡腾片、阿司匹林栓的含量。例9：阿司匹林泡腾片的含量测定（

5、1）色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈-四氢呋喃-冰醋酸-水（20:5:5:70）为流动相；检测波长为276nm。理论塔板数按阿司匹林峰计算不低于3000，阿司匹林峰与水杨酸峰之间的分离度应符合要求。（2）测定法 取本品10片，精密称定，充分研细，精密称取细粉适量（约相当于阿司匹林10mg），置100mL量瓶中，加1%冰醋酸的甲醇溶液强烈振摇使溶解，并用1%冰醋酸的甲醇溶液稀释至刻度，摇匀，用有机相滤膜（孔径：0.45m）滤过，精密量取续滤液10L，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取阿司匹林对照品约20mg，精密称定，置200mL量瓶中，加1%冰醋酸的甲醇溶液强烈振

6、摇使溶解，并用1%冰醋酸的甲醇溶液稀释到刻度，摇匀，同法测定，按外标法以峰面积计算，即得。 （6-2）式中，cx对照品溶液的浓度，mg/mL；Ax和AR供试品和对照品阿司匹林的峰面积； m阿司匹林泡腾片样品的称取量，g；供试品的平均片重，g；标示量泡腾片“规格”项下的标示值。二、苯甲酸类药物的含量测定1酸碱滴定法苯甲酸、甲芬那酸等分子结构中苯环直接与羧基相连，显酸性，可将其溶解在中性乙醇中，用氢氧化钠滴定液直接滴定。例11：苯甲酸的含量测定取本品约0.25g，精密称定，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）25mL溶解后，加酚酞指示液3滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）滴定。每1mL氢氧化钠滴

7、定液（0.1mol/L）相当于12.21mg的C7H6O2。2双相滴定法苯甲酸钠为芳酸碱金属盐，易溶于水，其水溶液呈碱性，可用盐酸标准滴定溶液滴定，但在滴定过程中析出的游离酸不溶于水，并且使滴定终点的pH 突跃不明显，不利于终点的正确判断。因此，中国药典2005年版（二部）收载的苯甲酸钠含量的测定采用双相滴定法，即利用苯甲酸能溶于有机溶剂的性质，在水相中加入与水不相混溶的有机溶剂，并置于分液漏斗中进行滴定反应，将滴定过程中产生的苯甲酸不断萃取入有机溶剂层中，减少苯甲酸在水中的浓度，使滴定反应完全，终点清晰，同时可降低苯甲酸的离解。其方法为：取本品1.5g，精密称定，置分液漏斗中，加水25mL

8、、乙醚50mL 及甲基橙指示液2 滴，用盐酸标准滴定溶液（0.5mol/L）滴定，随滴随振摇，至水层显橙红色，分取水层，置具塞锥形瓶中，乙醚层用水5mL 洗涤，洗液并入锥形瓶中，加乙醚20mL ，继续用盐酸标准滴定溶液（0.5mol/L）滴定，随滴定随振摇，至水层显持续的橙红色。每lmL 盐酸标准滴定溶液（0.5mol/L）相当于72.06mg 的C7H5O2Na。3非水滴定法利用双相滴定法测定苯甲酸钠的含量，在测定时需消耗乙醚，在提取时易带来微小损失，而且终点颜色观察略显困难。因此，在中国药典2010年版中，苯甲酸钠的含量测定方法改为非水滴定法。其方法为：取本品，经105干燥至恒重，取约0.

9、12g，精密称定，加冰醋酸20mL使溶解，加结晶紫指示液1滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L）滴定至溶液显绿色，并将滴定的结果用空白试验校正。每1mL高氯酸滴定液（0.1mol/L）相当于14.41mg的C7H5NaO2。4银量法泛影酸为有机碘化物，测定时要进行预处理，使其中的有机碘转变为无机碘化物，再用银量法测定含量。含卤素的有机药物分子中，如果卤素与有机分子结合的不太牢固（如卤素结合在脂肪族碳链上），可加碱回流，使卤素脱下后用银量法测定。也可在适当溶剂中加过量硝酸银直接回流，使卤素脱下生成卤化银沉淀，再用硫氰酸铵回滴剩余硝酸银，测定含量。如果卤素结合在芳环上，卤素与有机分子结合的比较牢固

10、，用上述方法不能使卤素脱下，就要在碱性溶液中用锌粉还原，使碳卤键断裂，形成无机卤化物，再用银量法测定。中国药典2010年版中，规定用锌粉和碱液还原泛影酸分子中碳碘键中的碳，使碘脱下，经醋酸酸化后，以曙红钠为指示剂，用硝酸银液滴定测定含量。其反应式如下：其方法为：取本品约0.4g，精密称定，加氢氧化钠试液30mL与锌粉1.0g，加热回流30min，放冷，冷凝管用少量水洗涤，滤过，烧瓶与滤器用水洗涤3次，每次15mL，合并洗液与滤液，加冰醋酸5mL与曙红钠指示液5滴，用硝酸银滴定液（0.1mol/L）滴定。每1mL硝酸银滴定液（0.1 mol/L）相当于20.46mg的C11H9I2N2O4。中国

11、药典2010年版规定泛影酸钠注射液、泛影葡胺注射液也用上述碱性还原法使有机碘转化为无机碘，再用银量法测定。5紫外-可见分光光度法丙磺舒片剂中含量的测定是利用其在249nm波长处有最大吸收，采用紫外-可见分光光度法测定含量。其方法为：取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于丙磺舒60mg），置200mL量瓶中，加乙醇150mL与盐酸溶液（9100）4mL，置70水浴上加热30min，放冷，用乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5mL，置100mL量瓶中，加盐酸溶液（9100）2mL，用乙醇稀释至刻度，摇匀。照紫外-可见分光光度法（附录IV A），在249nm的波长处测定吸光度，

12、按C13H19NO4S的吸收系数（）为338计算，即得。6高效液相色谱法中国药典2010年版（二部）丙磺舒含量的测定采用高效液相色谱法。其方法为：（1）色谱条件与系统适用性试验 用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.05mol/L磷酸二氢钠（加1%冰醋酸，用磷酸调节pH值至3.0）-乙腈（50:50）为流动相；检测波长为245nm。理论塔板数按丙磺舒峰计算不低于3000。（2）测定方法 取本品适量，精密称定，加流动相溶解并定量稀释制成每1mL中含60g的溶液，精密量取20L，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取丙磺舒对照品，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。三、布洛芬类药物的含量测定1酸碱滴定

13、法布洛芬结构中具有羧基，遇碱发生中和反应，可采用酸碱滴定法测定含量。中国药典2010年版（二部）对布洛芬、酮洛芬原料药的测定均采用此法。（1）布洛芬的含量测定 取本品约0.5g，精密称定，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）50mL溶解后，加酚酞指示液3滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）滴定。每1mL氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）相当于20.63mg的C13H18O2。（2）酮洛芬的含量测定 取本品约0.5g，精密称定，加中性乙醇（对酚酞指示液显中性）25mL溶解，加酚酞指示液3滴，用氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）滴定。每1mL氢氧化钠滴定液（0.1mol/L）相当于25.43mg的

14、C16H14O3。2紫外-可见分光光度法非诺洛芬钙片含量的测定是利用其在272nm波长处有最大吸收，采用紫外-可见分光光度法测定含量。其方法为：取本品20片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于非诺洛芬0.2g），置200mL量瓶中，加冰醋酸5mL，振摇1min，加甲醇100mL，振摇5min，用甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液5mL，置100mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，摇匀，在272nm的波长处测定吸光度，按C15H14O3的吸收系数（）为80.7计算，即得。3高效液相色谱法中国药典2010年版（二部）中，布洛芬片剂、胶囊、口服液、混悬滴剂及酮洛芬肠溶胶囊、搽剂等的测定均采用高效液相色谱法。（1）布洛芬口服液的含量测定色谱条件与系统适用性试验。用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以醋酸钠缓冲溶液（取醋酸钠6.13g，加水750mL使溶解，用冰醋酸调节pH值至2.5）-乙腈（40:60）为流动相；检测波长为263nm。理论塔板数按布洛芬计算不低于2500。测定法。用内容量移液管，精密量取本品适量，用甲醇定量稀释制成每1mL中含布洛芬0.5mg的溶液，精密量取20L，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取布洛芬对照品，同法测定。按外标法以峰面积计算，即得。（2）酮洛芬搽剂的含量测定色谱条件与系统适用性试验。用十八烷基硅