基因工程复习知识点

1、基因工程复习资料一、知识点1. 根据基因工程的定义，能替代基因工程的术语。2. 含有II型限制性内切酶切位点的DNA片段的特点。3. 已知一双链DNA分子，分别用限制酶I、限制酶U切割单独切割得到不同片段； 同时用限制酶I和限制酶U切割时， 得到另外的片段，据此分析该双链DNA分子 结构及酶切位点情况。4 质粒分子生物学的描述。5 在植物基因工程中广泛使用的载体。6质粒带有：互补的lacZ 标记基因，那筛选培养基中加入显色底物和诱导物分别为？7载体常用的选择性标记：抗生素、生化标记、营养缺陷型标记的包括哪些（要能区分缩写符号）。8. DNA双链是靠什么化学键维持？9. 能有效区分重组子与非重组

2、子的是方法有哪些？10. 离体cDNA合成中所涉及的工具酶是有哪些？11. 强化基因转录的元件是哪些？12. 基因调控元件中属于负调控顺式作用元件的是哪些？13. 关于包涵体的叙述。14. 在单子叶、双子叶植物及动物的遗传转化过程中， 应用最成功的间接转化法 分别是什么15. 在对转基因植物进行分子鉴定时，检测外源基因的整合、表达、转录，分别 可以采用哪些方法？16. 细菌存在限制-修饰的现象，其生理意义是什么？17. Taq DNA聚合酶的发现使得PCR技术的广泛运用成为可能，是利用其哪个 特点？18. 关于柯斯质粒（cosmid）描述。19. Cosmid、一DNA、Plasmid几种常用

3、载体的装载量大小比较20. 载体质粒pBR322上的两个选择性标记：Apr、Tc。它们分别含有一 个单一酶切位点：Pst I 、Sph I。若将一外源基因插入 Ap中的Pst I位 点，那么转化子和重组子如何筛选，若插入 Sph I又如何筛选？21. DNA-DNAQNA-RN分子杂交的化学原理是什么（靠什么维持其双链稳定 性）？22. cDNA法获得目的基因的特点表现为？23. 原核生物启动子的特征是有哪些？24. 强化mRNA翻译的元件是哪些？25. 高等哺乳类动物基因在大肠杆菌中高效表达时，包涵体形成的原因是？26. 动物基因转移法中的胚胎干细胞法有何特点？（）27. 如何正确理解基因漂

4、移？28. 熟悉pBR322 pUC18/19载体的组成元件及作用、简写所代表的含义。29. 基因表达载体表达盒的组成必需含有启动子、终止子、复制原点、目的基因、报告基因30. 动物基因转移过程中，实际应用中主要有哪些方法？二、专业术语1. 基因工程；2.酶的星号活性；3.黏性末端；4.人工染色体；5.质粒的不相 容性；6.核酸分子杂交；7.逆转录PCR 8.RACE 9.简并序列；10.基因组文 库；11.衔接物；12.感受态细胞；13.核糖体结合位点；14.基因漂移；15.同 质性原则。三、思考题1. DNA连接酶有何作用特点和使用价值？2. 质粒及其基本特征是什么？3. PCR技术的原理

5、和基本过程是什么？4. pBR322质粒载体有tet r和amp表型，如果在tet r中有一 EcoR I的酶切位 点，现用EcoR I切割载体进行基因重组，如何利用抗生素变化筛选含有插入 片段重组体？如果EcoR I的酶切位点amp又如何？（插入失活法）5. 基因组DNA文库构建需要的满足条件及其基本步骤是什么？6. 原核生物基因表达与调控具有怎样的特点？7. 原核生物基因表达与调控具有怎样的特点？8. 如何以pUC19为载体进行DNA片断克隆（全过程）？9. Klenow片段和大肠杆菌DNA聚合酶I有何异同？10. 载体及其在基因工程时必须具备的条件？11. 影响DNA琼脂凝胶电泳的因素有哪些？12. 多种载体中都米用互补的方式筛选重组子，如何利用-互补进行重组子 筛选?（过程和原理）13. cDNA文库构建的需要满足条件和基本步骤是？14. 大肠杆菌表达载体的必须结构元件及作用？1