植物病原菌的接种

1、1/ 4下载文档可编辑实验五 植物病原物的接种一、实验目的人工使病原物与寄主植物感病部位接触， 创造条件使病原物侵入 并诱致寄主发病叫接种， 接种是证病过程的重要步骤， 在研究寄生现 象发病规律，测定品种抗病性，药剂防病效果时都需要接种。因此， 接种是植病工作者必须掌握的基本技术环节。植物病害人工接种方法， 是根据病害的传染方式和侵染途径设计 的，植物病害的种类很多、 其传染方式和侵染途径各异。因此接种方 法也不相同。本次实验以玉米大斑病，小麦根腐病，小麦秆锈病，梨 褐腐病等为内容学习常用的接种方法。二、内容、材料和方法（一）拌土法（小麦根腐病 ） 拌土法适于土壤传染的病害， 方法是将消毒的土

2、壤分别装入两个 小花盆中，其中一盆表层覆以一厘米厚的菌土，菌土是用玉米砂培养 菌 1 1 份加消毒土 5 5 份混合而成，另一盆不接种 （不覆菌土 ）作为对照。 将经 0.1%0.1%升汞表面消毒 3 3 分钟并用无菌水洗 3 3 次的小麦种子，分别 播种在两个花盆内，插上标牌，注明接种日期，方法病害名称及接种 人姓名，花盆放在室温下，浇水保湿，遮阴管理，待幼苗出土展开叶 子后（大约一周 ） ，观察并记载根腐病发生情况。（ 二 ） 喷雾法 （ 玉米大斑病 ） 气流及雨水传播的病害常用此法接种， 将培养好的玉米大斑病的斜面 菌种一支，用移植钩刮于装有 10100 0毫升无菌水的三角瓶中， 用力振

3、荡， 待孢子洗下后，以纱布过滤，并于滤2/ 4下载文档可编辑液中加入 0.10.1 克中性肥皂，即成 孢子菌丝悬液， 用卫生喷雾器均匀喷布在麦苗上。 同时设一不喷菌液 而喷无菌水的作对照，用塑料罩保湿 4848 小时，揭布后正常管理， 7 7 天后作发病调查。（ 三 ） 涂抹法 （ 小麦秆锈病 ） 这也是气流传播的病害常用的接种方法，用于禾本科锈病接种。 方法是用姆指沾锈菌夏孢子悬液自下向上轻轻涂欲接种的小麦叶片， 也可先用手指沾水摩擦叶片， 使叶表有一层水膜， 然后将夏孢子粉抹 在上面，以不涂抹孢子悬液或孢子粉的作为对照。塑料罩保湿 4848 小 时后揭布，正常管理， 7 7 天后作发病调查

4、。（ 四 ） 创伤接种法 （ 白菜软腐病及梨褐腐病 ） 创伤接种法是伤口侵入的弱寄生菌常用的接种方法。1.1.白菜软腐病：取切成适当大小的白菜帮两块、经水洗，待水稍 干后，以 10%10%漂白粉溶液作表面消毒，分放在两个灭过菌的上下铺有 吸水纸的培养皿中， 用酒精擦过的玻璃棒顺着白菜帮打三排不穿透的 孔穴。将培养好的白菜软腐病菌斜面菌种的菌苔以无菌水洗下作成菌 悬液。然后，先以灭过菌的兽用注射器吸取无菌水滴于菜帮的第一排 内孔作为对照，再用该注射器吸菌液滴于第二、三排孔内。注意无论 无菌水、还是菌液都不要滴的过多。以免流出孔穴，另一培养皿的菜 帮以同法处理作为重复。盖好皿盖，置于2626282

5、8C的温箱中，2424 小时后检查发病情况。2.2.梨褐腐病：取白梨以酒精火焰表面消毒后，用炽热的解剖刀， 在其上切成小手指粗的孔穴 3 35 5 个。取经分离纯化的梨褐腐病菌菌 落填抹在已切好的孔穴中， 再复以饱含无菌水的脱脂棉或纱布， 放在 密封的干燥3/ 4下载文档可编辑器或标本瓶中， 干燥器或标本瓶底部装些水， 再将干燥器 或标本瓶放于2525C的温箱中，以未接菌的作为对照，3 3 天后作发病调 查。三、 接种试验的观察和记载 认真观察和记录是做好接种试验的重要环节， 为了及时正确地分析总结试验结果，必须认真观察并做详尽的记录，如记录接种时间， 接种植物、 品种、 接种方法、 部位、 接种用的病菌名称（包括菌系和 生理小种 ）、来源、繁殖和培养方法 （培养基、培养温度、培养时间 ） 、 接种体浓度、接种的方法和步骤及接种后的管理等。四、 作业提交接种试验报告一份 （以一种病害接种结果为题材，试按试验 的目的意义， 试验材料和方法、 试验结果及结果分析和讨论等格式来 写）。五、 思考题植物接种常用的方法有哪些 ? ? 举例说明如何根据病害特点选择 接种方法 ? ?附：玉米粉砂培养基玉米粉砂培养基，常用于繁殖真菌接种土壤玉米粉 10001000 克洗净的砂 10001000 克4/ 4下载文档可编辑水 15001500 毫升玉米粉和砂加水混合后， 在