支气管哮喘患者血小板胞浆游离钙浓度的变化

1、    支气管哮喘患者血小板胞浆游离钙浓度的变化        我们对支气管哮喘患者急性发作期及缓解期血小板聚集功能、血小板胞浆游离钙及血小板表面P-选择素的动态变化作了观察，以了解疾病不同阶段的血小板功能变化。 对象和方法1材料ADP、N，N-羟乙基哌嗪乙烷磺酸(HEPES)、吲哚美辛、前列腺素E1(PGE1)、血小板活化因子(PAF)、Fura-2/AM为Sigma公司产品；EGTA为Fluka公司产品；Triton X-100为Room-Mass公司产品；抗人活化血小板

2、表面P-选择素单克隆抗体SZ-51为苏州医学院产品。2检测对象经广州呼吸疾病研究所确诊支气管哮喘患者,随机选择22例, 男女各半, 年龄742岁。患者在急性发作未作检测前禁用所有药物,经1个疗程治疗哮喘完全缓解后再复查;健康对照组12名，男女各6名,均为健康体检者,年龄1836岁。3血小板聚集实验取受检者空腹抗凝静脉血3ml，按Mustard法制备浓缩血小板，分别以ADP、AA、PAF、A23187为诱导剂，用比浊法测定血小板聚集百分率。4血小板表面及血浆P-选择素含量测定参照文献的方法。5Fura-2/AM标记的人血小板悬液制备及血小板胞浆游离钙离子浓度的测定参照Pollock等人的方法,

3、用岛津RF-540型荧光分光光度计在20下测定静息状态和加20mol/L ADP后激发态的荧光强度。6统计学处理计数资料采用t检验进行统计学处理。结 果1支气管哮喘患者血小板聚集功能及P-选择素的变化急性发作期血小板聚集功能增强，血浆及血小板表面的P-选择素含量显著升高，而缓解期患者则基本回复正常(表1)。2血小板胞浆游离钙离子浓度的变化细胞外无论有钙(1mmol/L)存在或无钙存在, 支气管哮喘患者血小板静息状态和ADP刺激后的激发态，急性发作期血小板胞浆游离钙离子浓度均高于缓解期患者及健康对照者(表2)。讨论我们的结果显示，支气管哮喘急性发作期血小板聚集功能显著增强，血小板胞浆内游离钙离子

4、浓度、血小板表面及血浆P-选择素含量显著升高，表明此时患者体内存在着血小板活化，大量的释放产物进入血液循环中。我们认为，在支气管哮喘的诊治中，进行血小板功能检测十分必要，在使用药物缓解支气管平滑肌痉挛时，应同时使用血小板活化抑制剂。表1支气管哮喘患者血小板聚集功能及血小板表面、血浆P-选择素的变化(<"wpe16.jpg (766 bytes)" src="/med/cano/201003/20100317174437492.jpg" 13 21>±s)组别例数血小板聚集率()血小板表面P-选择素含量(分子数/血小板)血浆P-选择素

5、含量(×107分子数/L)ADP(2mol/L)AA(100mol/L)PAF(10mol/L)A23187(5mol/L)急性发作期2255.2±10.8#69.6±9.5#78.5±12.2#70.8±12.6#3320±1258*4.88±1.82*缓解期1838.4±12.3*50.8±10.2*60.3±11.8*50.7±11.3*1195±673*2.08±1.21*健康对照组1236.8±12.446.2±10.656.5

6、7;9.550.3±10.5782±4871.65±0.75     注：与对照组比较，*P0.05, *P0.05, #P0.01 表2支气管哮喘患者血小板胞浆游离Ca2+浓度的变化(<"wpe17.jpg (766 bytes)" src="/med/cano/201003/20100317174437981.jpg" 13 21>±s)组别例数细胞外有钙时血小板胞浆内钙离子浓度(nmol/L)细胞外无钙时血小板胞浆内钙离子浓度(nmol/L)给ADP前给AD

7、P后增加量给ADP前给ADP后增加量急性发作期12172.8±18.1*388.5±32.6#210.6±36.4*102.8±18.9*174.8±16.5*70.6±26.4*缓解期12148.5±15.7*326.5±40.8*178.6±40.8*98.5±19.5*150.3±24.8*51.4±19.8*健康对照组12145.5±17.5312.1±34.7169.8±32.499.2±17.3 145.1±16.946.8±17.8     注：与对照组比较， *P0.05,