传递窗紫外线消毒效果验证

1、福州健立莱医疗器械有限公司验证报告名 称:验证编号:传递窗紫外灯表面消毒效果生效日期:编写：日期年月日审核：日期年月日批准：日期年月日1. 验证目的进入洁净区(十万级)的物品通过传递窗，经过紫外消毒后进入洁净区。为了确认传递窗紫外灯的消毒效果， 对传递窗紫外灯消毒效果进行验证，对其在今后日常生产中可靠性和 质量稳定性提供保证。2. 验证设备及器材设备及器材名称型号或规格净化工作台SW-CJ-27-D咼压蒸汽火菌锅YX280B恒温培养箱DHP-9162生化培养箱LRH-150F电热恒温干燥箱DHG-9140A火菌刻度吸管1ml火菌试管火菌平皿90mm玻片1.0*1.0cm3. 验证材料及试剂蒸馏

2、水营养琼脂培养基改良马丁琼脂培养基营养肉汤培养基改良马丁培养基金黄色葡萄球菌ATCC ( B) 25923枯草芽孢杆菌ATCC ( B) 9372大肠杆菌ATCC (B) 25922白色念珠菌ATCC ( F) 10231稀释剂0.9%NaCI溶液4. 验证内容 4.1辐照强度测定 4.2照射剂量4.3 细菌及其芽孢和真菌杀灭效果的测定5验证方法5.1 试验环境试验在洁净度 10 000 级下的局部洁净度 100 级的单向流空气区域内进行，全过程严格 遵守无菌操作。单向流空气区、工作台面及环境定期按医药工业洁净室（区）悬浮粒子、 浮游菌和沉降菌的测试方法的现行国家标准进行洁净度验证。5.2 试

3、验前准备5.2.1 器具灭菌将所有与试验接触的器具置压力蒸汽灭菌器内121 C灭菌30min备用。5.2.2 试剂和培养基制备取试管20支，加入10ml 0.9%氯化钠溶液置于高压蒸汽灭菌器内121 C灭菌20min备用。营养琼脂培养基配方：营养琼脂培养基31.0g蒸馏水1000ml配制：根据需要量称取营养琼脂培养基置适宜容器中， 按配方比例加入蒸馏水， 水浴加热使溶解，调pH至7.1 ±.2，分装于三角烧瓶，置高压灭菌器灭菌121 C 20分钟。改良马丁琼脂培养基配方：改良马丁琼脂培养基42.0g纯化水1000ml配制：根据需要量称取改良马丁琼脂培养基， 按配方比例加入蒸馏水， 水

4、浴加热使溶解， 调 pH至6.4 ±0.2，分装于三角烧瓶，置高压灭菌器灭菌121 C 20分钟。改良马丁培养基配方：改良马丁培养基28.0g纯化水1000ml配制：根据需要量称取改良马丁培养基粉， 按配方比例加入纯化水， 水浴加热使溶解， 调 pH至6.4 ±.2，分装于适宜容器，置高压灭菌器灭菌121 C 20分钟。营养肉汤培养基配方:营养肉汤培养基20g纯化水1000ml培养48小时作活菌计数，真菌放2328 C培养72小时作活菌计数。配制:称取营养肉汤培养基 20克，力口 1000ml纯化水，加热溶解，加热至沸，冷却至常温,分装于适宜容器，置高压灭菌器灭菌121 C

5、 X20分钟。5.3试验方法 5.3.1辐照强度测定开启紫外灯5min后，用中心波长为 253.7nm的紫外线强度测定仪在灯管下方垂直1m220V。的中心处测量其辐照度值（uW/cm2）。测量时，电压应稳定在5.3.2照射剂量表面消毒接受的照射剂量，应达杀灭目标微生物所需。对大肠杆菌，照射剂量应达到7.5 X 103 uW-s/cm2,对金黄色葡萄球、白色念珠菌、枯草芽孢杆菌应达到2.53 X 104uW-s/cm2。照射剂量计算:照射剂量（uWs/cm2）=紫外灯管强度（uW/cm2）x时间（s）5.3.3细菌及其芽孢和真菌杀灭效果的测定5.3.3.1菌液的制备接种菌种名称接种培养基培养条件

6、金黄色葡萄球菌新鲜培养物营养肉汤培养基3035 C培养1824小时大肠杆菌新鲜培养物枯草芽孢杆菌新鲜培养物白色念珠菌新鲜培养物改良马丁培养基2328 C培养2448小时5.3.3.2将灭菌载体平放于灭菌平皿内，每个载体滴注定量菌悬液，（载体回收菌量达5X 1055X 106 cfu/片），涂匀，放37C培养箱烘干。开启紫外灯 5min后，将16个染菌玻片平放于灭菌平皿内，水平放于适当距离照射， 于4个不同间隔时间（15min、30 min、45 min、60 min）30 35 C各取出4个染菌玻片，分别投入 4个盛有10ml洗脱液试管中，振打 80次。5.3.3.3经稀释后，取1ml洗脱液，作平板倾注，每个染菌玻片接种两个，细菌放5.3.3.4阳性对照：除不做照射处理外，取4个染菌玻片，分别投入4个盛有10ml洗脱液试管中，振打80次。其余按