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文档简介
1、流通环节中蔬菜农药残留的快速检测(速测仪法) 检测意义 农药残留指用法农药后残存于生物体、农副产品和环境中的微量农药原体、有 毒代谢物、降解物和杂质的总称,以每千克样本中有多少毫克(或微克、纳克等)表 示。目前,蔬菜上所用法的农药按其化学结构大致可分为以下几类:有机氯类、有机磷类、类、类等。农药中,70%为有机磷农药,而在我国生 产用法的有机磷农药中,70%为剧毒、高毒类,而且较多是禁止在蔬菜作物上用法 的,近年来,因为蔬菜的农药残留过多而导致的食物中毒大事时有发生,严峻威逼 着人们的身体健康。 因为蔬菜本身生长过程中的病虫害比较严峻,从而农药施用量较大,加之采摘 后立刻食用,其农药残留对人们
2、身体健康的影响和危害更挺直、更严峻。随着生活 水平的不断提高,人们对农药残留问题也越来越重视。上海市作为东部沿海最发 达的工商业城市之一,也是副食品消费量最大的城市之一,各类超市与农贸市场业 已成为人们购买蔬菜的主要渠道,也已形成较成熟的市场机制。保障蔬菜农残含 量合格,不仅要对菜农用药加强监督管理,增加菜农的平安用药意识,从源头上预 防农药残留超标状况的发生,而且,准时对蔬菜样品的迅速检测分析,对不同流通 环节上的大量蔬菜样品举行较为全面的采样,准时把握数据,对保障市民饮食安 全,提高平安意识有重要意义。 酶抑制速测仪法,其检测依据是gb/t 5009. 199-2003(蔬菜中有机磷和氨基
3、甲酸酯类农药残留量的迅速检测。其试验原理为:按照有机磷和类农 药能抑制昆虫中枢和周围神经系统中的活力,造成神经传导介质乙酰胆碱的堆积,影响正常传导,使昆虫中毒致死,按照这一昆虫毒理学原理,用在对农 药残留的检测中。假如蔬菜的提取液中不含有机磷或氨基甲酸酯类农药残留或残 留量较低,酶的活力就不被抑制,实验中加入的底物就被酶水解或少部分被水解, 水解产物与加入的显色剂反应产生黄色物质。反之,假如蔬菜的提取液中含有一 定量的有机磷或氨基甲酸酯类农药,酶的活力就被抑制,实验中加入的底物就不能 被酶水解,从而不显色或色彩变幻很小,用分光光度计测定吸光值随时光的变幻, 计算出抑制率,就可以推断蔬菜中含有机
4、磷或氨基甲酸酯类农药的残留状况。 采样地点 农贸市场和大型超市作为最主要的两种蔬菜销售渠道,其所售蔬菜的来源和 种类多种多样。这两类流通环节中蔬菜的农药残留状况成为人们关注的焦点。 试验试剂与材料 (1)提取液 将提取液粉剂倒入500ml瓶内,加入510ml蒸馏水摇匀溶解后 备用。可在常温下保存。 (2)酶液每瓶酶液加3. 1ml提取液摇匀后放在冰箱4备用,配制好的酶液 在4保存下可用法6d。 (3)底物每瓶底物中加入3.1ml蒸馏水,摇匀后放在冰箱4备用,配制好 的底物溶液在4保存下可用法6d。 (4)显色剂显色剂已在棕色瓶内,挺直加入64ml提取液摇匀后置冰箱4备用。配制后的显色剂可用法半
5、年(保存时注重避开阳光直射)。 (5)样品 分离来自3个区县的农贸市场和超市,按叶菜类、果菜类、食用菌、花菜类、茎菜类和根菜类6大类分离选取常用蔬菜。 试验仪器与设备 (1)ncd-100a型多功能农产品平安分析仪(上海瑞鑫科技仪器有限公司); (2)移液枪(10 100ul、200 500l、15l)及其配套管嘴; (3)配套玻璃仪器及配件等,电子天平。 试验办法 开机后挑选农药残留模块,在项目设置中挑选主波长410nm)参数设置完成后 进入样品测试,布板后点击欲设置为检测样品的孔位,样品号从1起自动递增并显 示在该孔位上,点击对比按钮,然后点击孔位,会显示b即为对比孔位。 (1)对比液的配
6、制办法 用移液枪提取200ul提取液到酶标孔(显示b的 孔)中,再用更换过新枪头的移液枪分离提取20ul酶液及20ul显示剂到设置好 的对应酶标孔内(显示b的孔)。 (2)样品的配制办法 取表面整洁的蔬菜,用天平精确称取1g,叶菜类取叶片部分,瓜果类取表面。 将叶片或瓜皮肉等剪成1cm见方大小置于小烧杯内,用移液枪加入5ml提 取液浸泡,在常温下放置10min)期间搅拌多次。 待烧杯中的提取液略沉淀后用移液枪吸取上清液200l(即为检液)移入对 应样品孔内。 在放入200l检液的样品孔内加20l酶液及20l显色剂。 (3)测定 将上述配制的对比液和样品液(半成品)放置15min (建议在37恒温培养箱 中培养),时光到后,用8道移液枪往每个孔内加入20ul底物并混匀,立刻将酶标 板放入仪器内,盖好盖板,按开头键开头检测。两次走板结束后显示测试结果,点 击结果键显示测试结果。检测结束,显示的是吸光度差值,点击结果按钮查看结 果,显示的是抑制率结果。 结果判定 检测结果以酶被抑制的程度(抑制率)表示,抑制率=(a0 -a1)/a0 x 100%,式中, a0对比溶液反应3min吸光度的变幻值; a1样品溶液反应3min吸
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