![人骨肉瘤中5个新基因片段在不同骨肿瘤中的差异表达_第1页](http://file3.renrendoc.com/fileroot_temp3/2022-1/7/4c859fa4-dba7-41f3-a965-f9b38f0c8bc4/4c859fa4-dba7-41f3-a965-f9b38f0c8bc41.gif)
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![人骨肉瘤中5个新基因片段在不同骨肿瘤中的差异表达_第3页](http://file3.renrendoc.com/fileroot_temp3/2022-1/7/4c859fa4-dba7-41f3-a965-f9b38f0c8bc4/4c859fa4-dba7-41f3-a965-f9b38f0c8bc43.gif)
![人骨肉瘤中5个新基因片段在不同骨肿瘤中的差异表达_第4页](http://file3.renrendoc.com/fileroot_temp3/2022-1/7/4c859fa4-dba7-41f3-a965-f9b38f0c8bc4/4c859fa4-dba7-41f3-a965-f9b38f0c8bc44.gif)
![人骨肉瘤中5个新基因片段在不同骨肿瘤中的差异表达_第5页](http://file3.renrendoc.com/fileroot_temp3/2022-1/7/4c859fa4-dba7-41f3-a965-f9b38f0c8bc4/4c859fa4-dba7-41f3-a965-f9b38f0c8bc45.gif)
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文档简介
1、È˹ÇÈâÁöÖÐ5¸öлùÒòƬ¶ÎÔÚ²»Í¬¹ÇÖ×ÁöÖеIJîÒì±í´ï×÷Õß
2、;£ºËÕº£´¨¡¡À¡¡³Â¾ü¡¡ÑÖС¾ý¡¡·¶ÇåÓî ¡¾¹Ø¼ü´Ê¡¿¹ÇÈ
3、6;Áö ¹Ø¼ü´Ê:¹ÇÈâÁö²îÒì±í´ï»ùÒò·´×ªÂ¼PCR¼¼Êõ»ùÒò±í´ï ÕªÒª:
4、96;¿µÄɸѡÊý¸öÔÚÈ˹ÇÈâÁöÖмì³öÂʸߵIJîÒì±í´ï»ùÒòƬ¶Î
5、78;¢Ì½ÌÖÆäÁÙ´²ÒâÒå.·½·¨ÒÔɸѡ³öµÄ5¸öлùÒòƬ¶Î×÷ΪÑо¿&
6、#182;ÔÏ󣬲ÉÓÃRT-PCR¼¼Êõ¼ì²â37Àý¹ÇÈâÁö¡¢68ÀýÆäËû¹ÇÖ×Áö¼°19Àý½Ø³ý&
7、#214;«ÌåÉϵÄÕý³£¹Ç×éÖ¯±ê±¾.½á¹ûÔÚ37Àý¹ÇÈâÁöÖУ¬±í´ï¼ì³öÂ
8、2;¸ßµÄ5¸öƬ¶ÎÒÀ´ÎΪ:ZOL03Ϊ92.6%£¬1C82Ϊ89.4%£¬1C74Ϊ73.9%£¬2G12Ϊ66.5%£¬2A21Ϊ53.7%;ÔÚ23Àý¹ÇÈ&
9、#237;¹ÇÁöÖбí´ïÂÊÒÀ´ÎΪ:ZOL03Ϊ6.5%£¬1C82Ϊ14.7%£¬1C74Ϊ8.3%£¬2G12Ϊ11.9%£¬2A21Ϊ12.2%;ÔÚ29Àý¹&
10、#199;¾Þϸ°ûÁöÖбí´ïÂÊÒÀ´ÎΪ:ZOL03Ϊ8.3%£¬1C82Ϊ15.6%£¬1C74Ϊ12.5%£¬2G12Ϊ13.8%£¬2A21Ϊ5.4%;Ô
11、18;16ÀýÈí¹ÇÈâÁöÖбí´ïÂÊÒÀ´ÎΪ:ZOL03Ϊ9.4%£¬1C82Ϊ14.3%£¬1C74Ϊ7.5%£¬2G12Ϊ6.8%£¬2A21Ϊ6.2%
12、;ÔÚ19ÀýÕý³£¹Ç×éÖ¯±ê±¾Öбí´ïÂÊÒÀ´ÎΪ:ZOL03Ϊ0£¬1C82Ϊ6.4%£¬1C74Ϊ0£¬2G12Î
13、70;4.8%£¬2A21Ϊ3.9%;Õâ5¸ö»ùÒòƬ¶Î¼ì³öÂÊÔÚ¹ÇÈâÁöÓëÆäËû¹ÇÖ×ÁöÖдæÔ&
14、#218;ÏÔÖø²îÒ죨P<0.01£©Æä¼ì³öÂÊÔÚ¹ÇÈâÁöÓëÕý³£¹Ç×éÖ¯ÖдæÔÚÏ
15、ÔÖø²îÒ죨P<0.01£©.½áÂÛZOL03£¬1C82£¬1C74£¬2G12¼°2A21Õâ5¸ö»ùÒòƬ¶Î¿ÉÄÜÓë¹ÇÈ
16、âÁöµÄ·¢Éú¡¢·¢Õ¹Óйأ¬¼à²â¹Ç×éÖ¯ÖдË5¸ö»ùÒòƬ¶ÎµÄ±í´
17、;ïˮƽµÄ±ä»¯¿ÉÄܶԹÇÈâÁöµÄÔçÆÚ·¢ÏÖ¸üÓÐÒâÒå. Keywords:osteosarcoma;differentialexpressedgene;RT-
18、PCR;geneexpression ¡¡¡¡Abstract:AIMToscreenseveralgenesdifferentiallyex-pressedinhumanosteosarcomawithhigherexaminationratesanddiscussitsclinicalsignificance.METHODSByusingZOL03£¬1C82£¬1C74£¬2G12and2A21asresearchtargets£¬37specimensofhumano
19、steosarcomaand68specimensofothermusculoskeletaltumorsaswellas19specimenswerescreenedbyquantitativeRT-PCR.RESULTSIn37speci-mensofosteosarcoma£¬percentagesofthe5fragmentswithhigherexaminationratewere92.6%£¨ZOL03£©£¬89.4%£¨1C82£©£¬73
20、.9%£¨1C74£©£¬66.5%£¨2G12£©and53.7%£¨2A21£©sequentially.In23specimensofosteochondroma£¬percent-agesofthe5fragmentswithhigherexaminationratewere6.5%£¨ZOL03£©£¬14.7%£¨1C82£©
21、£¬8.3%£¨1C74£©£¬11.9%£¨2G12£©and12.2%£¨2A21£©respectively.In29specimensofgiantcelltumorofbone£¬thepercentagesofthe5fragmentsinturnwere8.3%£¨ZOL03£©£¬15.6%£¨1C82£
22、9;£¬12.5%£¨1C74£©£¬13.8%£¨2G12£©and5.4%£¨2A21£©.In16specimensofchondrosarcoma£¬thepercentagesinsuccessionwere9.4%£¨ZOL03£©£¬14.3%£¨1C82£©£¬7.5%£&
23、#168;1C74£©£¬6.8%£¨2G12£©and6.2%£¨2A21£©.Theexpressionratesofthe5fragmentsbetweenosteosarcomaandothermusculoskeletaltumorsweresignificantlydifferent£¨P<0.01£©.Andin19specimensofnormalbonetissue£¬theexpre
24、ssionratesofthe5frag-mentswere0£¨ZOL03£©£¬6.4%£¨1C82£©£¬0£¨1C74£©£¬4.8%£¨2G12£©and3.9%£¨2A21£©.Theexpressionratesofthe5fragmentsbetweenosteosarcomaandnormalbonetissuewere
25、significantlydifferent£¨P<0.01£©.CONCLUSIONThe5fragmentsofdifferentiallyexpressedgenesisolatedfromhu-manosteosarcomatissuemaybecorrelatedwithoccurrenceandprogressofosteosarcoma. ¡¡¡¡0ÒýÑÔ ¡¡¡¡¹ÇÈ
26、26;Áöµ¥´¿ÊÖÊõÖÎÁƺ󸴷¢Âʽϸß.ZOL03£¬1C82£¬1C74£¬2G12¼°2A21ÊÇÎÒÃDzÉÓòî
27、;ÒìչʾPCR£¨DD-PCR£©¼¼Êõ´ÓÈ˹ÇÈâÁö×éÖ¯ÓëÕý³£¹Ç×éÖ¯Ö®¼äɸѡ
28、179;öµÄ²îÒì±í´ï»ùÒòƬ¶Î£¬Í¨¹ý¶ÔÊÕ¼¯µÄ¹ÇÈâÁö¡¢ÆäËû¹ÇÖ×
29、193;ö¼°Õý³£¹Ç×éÖ¯±ê±¾½øÐж¨Á¿RT-PCR¼ì²â£¬Äâɸѡ³öÔÚ¹ÇÈâÁö×
30、233;Ö¯Öмì³öÂʸߵIJîÒì±í´ï»ùÒòƬ¶Î£¬Îª½¨Á¢¹ÇÈâÁöµÄ»ùÒ
31、242;Õï¶Ï·½·¨´òÏ»ù ¡¡¡¡1²ÄÁϺͷ½·¨ ¡¡¡¡1.1²ÄÁϢٱ걾:¹ÇÈâÁö&
32、#202;ÖÊõ±ê±¾37ÀýÆäËû¹ÇÖ×ÁöÊÖÊõ±ê±¾68Àý£¬ÆäÖÐ23ÀýΪ¹ÇÈí¹ÇÁö£&
33、#172;29ÀýΪ¹Ç¾Þϸ°ûÁö£¬16ÀýΪÈí¹ÇÈâÁö½Ø³ýÖ«ÌåÉϵÄÕý³£¹Ç×é
34、14;¯±ê±¾19Àý.ËùÓб걾¾ù²É¼¯ÓÚÌƶ¼Ò½ÔºÈ«¾ü¹Ç¿ÆÖÐÐÄ/È«¾ü¹Ç
35、;Ö×ÁöÑо¿Ëù£¬ËùÓб걾¾ù¾²¡ÀíHEȾɫȷÕï.¢ÚÒýÎï:PCRÒýÎïÓÉ
36、3;Õº£´¨²©Ê¿ÓëÀ˶ʿ¹²Í¬Éè¼Æ£¬ÉϺ£ÉúÎ﹤³Ì¹«Ë¾ºÏ³É.
37、62;ÛÊÔ¼Á:MMLV·´×ªÂ¼Ã¸¹º×ÔPromega¹«Ë¾£¬PE5700ÐÍPCRÀ©ÔöÒÇÓÉÃÀ¹úPE¹«Ë¾Ìṩ
38、3;¬ÆäËûÊÔ¼Á¾ùÓɵÚËľüÒ½´óѧȫ¾ü»ùÒòÕï¶Ï¼¼ÊõÑо¿ËùÌá
39、5;©. ¡¡¡¡1.2·½·¨ËùÓб걾»ñÈ¡ºó£¬Á¢¼´Í¶ÈëÒºµªÖб£´æ.²ÉÓÃPromega
40、85;«Ë¾PolyATtract¡ðRSystem1000ÊÔ¼ÁºÐ¿ìËÙÌáÈ¡±ê±¾×éÖ¯ÖеÄmRNA£¬¾×ÏÍâɨÃ趨&
41、#193;¿ºóÏ¡ÊͳÉ0.1g・L-1£¬Á¢¼´½øÐÐmRNA·´×ªÂ¼:ÒÔoligo£¨dT£©18ΪÆðʼÒýÎ
42、0;À´Î¼ÓÈëÎÞRNaseµÄÈýÕôË®10.4¦ÌL£¬5¡ÁBuffer4.0¦ÌL£¬dNTP£¨250¦Ìmol・L-1£©1.6¦ÌL£¬mRNA£¨0.1g&#
43、12539;L-1£©1.0¦ÌL£¬oligo£¨dT£©18ÒýÎï2.0¦ÌL;·´Ó¦Ìõ¼þΪ:65¡æ5min£¬37¡æ60min£¬75¡æ5min£¬MMLV·´×
44、70;¼ø£¨200mU・L-1£©ÔÚ37¡æ10minʱ¼ÓÈë.È¡·´×ªÂ¼²úÎï2¦ÌL×÷Ϊģ°å£¬ÒÀ
45、80;μÓÈë:10¡ÁPCRBuffer3¦ÌL£¬2.5mmol・L-1dNTPs3¦ÌL£¬ÉÏÓÎÒýÎï¸÷1¦ÌL£¨10pmol£©£¬ÏÂÓÎÒýÎï
46、¸÷1¦ÌL£¨10pmol£©£¬ddH2O10¦ÌL£¬»ìºÏºó¼ÓÈë2.5UTaqøPCRÑ»·Ìõ¼þΪ:94¡æ36s£¬55¡æ1min£
47、2;72¡æ35s£¬35¸öÑ»·£¬×îºóÔÚ72¡æÌõ¼þÏÂÑÓÉì7min.ÔÚͬһÌõ¼þÏ£¬Ã¿´
48、206;PCRÒÔ¦Â-actin×÷ÄÚ¶ÔÕÕ£¬ÒÔ¿Ë¡ÖÊÁ£×÷ÑôÐÔ¶ÔÕÕ.PCR²úÎï½øÐÐ10g・L-1Çí&
49、#214;¬ÌǵçÓ¾20minºó£¬ÔÚGQS-9600ÐÍ»ùÒò¶¨Á¿·ÖÎöϵͳÖÐɨÃèÉãÈëµçӾͼ
50、Ïñºó£¬¶ÔÌØÕ÷ÐÔÌõ´ø½øÐÐÎü¹â¶ÈɨÃè£Û2£Ý£¬½«²úÎïÎü¹â¶È
51、;/¶ÔÕÕ²úÎïÎü¹â¶È±ÈÖµ½øÐгɶÔ×ÊÁÏͳ¼Æѧ´¦Àí. ¡¡¡¡2½á¹û ¡
52、¡¡¡2.1²îÒì±í´ï»ùÒòƬ¶ÎÔÚ¹ÇÈâÁöÖбí´ïÔÚ37Àý¹ÇÈâÁö±ê±¾ÖÐ&
53、#163;¬±í´ï¼ì³öÂʸߵÄ5¸ö»ùÒòƬ¶ÎÒÀ´ÎΪ:ZOL03µÄ¸ß±í´ïÂÊΪ92.6%£¬1C82¸
54、23;±í´ïÂÊΪ89.4%£¬1C74¸ß±í´ïÂÊΪ73.9%£¬2G12¸ß±í´ïÂÊΪ66.5%£¬2A21¸ß±í´ïÂÊΪ53.7%.
55、×ÜÌåÀ´¿´£¬Õâ5¸ö»ùÒòƬ¶ÎÔÚ¹ÇÈâÁö×éÖ¯Öеıí´ïÂʽϸߣ¬
56、;ËüÃǵÄPCRÀ©Ôö²úÎïµçÓ¾½á¹ûÈçFig1. ¡¡¡¡2.2²îÒì±í´ï»ùÒòƬ¶ÎÔÚÆä
57、;Ëû¹ÇÖ×Áö±ê±¾Öбí´ïÔÚ23Àý¹ÇÈí¹ÇÁöÖбí´ïÂÊÒÀ´ÎΪ:ZOL03±í´ï
58、94;ÊΪ6.5%£¬1C82±í´ïÂÊΪ14.7%£¬1C74±í´ïÂÊΪ8.3%£¬2G12±í´ïÂÊΪ11.9%£¬2A21±í´ïÂÊΪ12.2%
59、.ÔÚ29Àý¹Ç¾Þϸ°ûÁöÖбí´ïÂÊÒÀ´ÎΪ:ZOL03±í´ïÂÊΪ8.3%£¬1C82±í´ïÂÊΪ15.6%
60、163;¬1C74±í´ïÂÊΪ12.5%£¬2G12±í´ïÂÊΪ13.8%£¬2A21±í´ïÂÊΪ5.4%.ÔÚ16ÀýÈí¹ÇÈâÁöÖб
61、37;´ïÂÊÒÀ´ÎΪ:ZOL03±í´ïÂÊΪ9.4%£¬1C82±í´ïÂÊΪ14.3%£¬1C74±í´ïÂÊΪ7.5%£¬2G12±í´ï
62、194;ÊΪ6.8%£¬2A21±í´ïÂÊΪ6.2%.¸Ã5¸ö²îÒì±í´ï»ùÒòƬ¶ÎÔÚÆäËû¹Ç×éÖ¯Ö×
63、ÁöÖеıí´ïÂʶ¼½ÏµÍ. ¡¡¡¡Í¼15¸ö²îÒì±í´ï»ùÒòƬ¶ÎÀ©Ôö²úÎ
64、239;µçÓ¾½á¹û¡¡ÂÔ ¡¡¡¡2.3²îÒì±í´ï»ùÒòƬ¶ÎÔÚÕý³£¹Ç×éÖ¯±ê±¾
65、4;бí´ïÔÚ19ÀýÕý³£¹Ç×éÖ¯±ê±¾ÖУ¬5¸ö»ùÒòƬ¶ÎµÄ±í´ïÂÊÒÀ´Î&
66、#206;ª:ZOL03µÄ±í´ïÂÊΪ0£¬1C82µÄ±í´ïÂÊΪ6.4%£¬1C74µÄ±í´ïÂÊΪ0£¬2G12µÄ±í´ïÂÊ&
67、#206;ª4.8%£¬2A21µÄ±í´ïÂÊΪ3.9%.Õâ5¸ö²îÒì±í´ï»ùÒòƬ¶ÎÔÚÕý³£¹Ç×éÖ¯ÖÐ
68、;µÄ±í´ïÂʶ¼ºÜµÍ»ò²»±í´ï. ¡¡¡¡½«²úÎïÎü¹â¶È/¶ÔÕÕ²úÎïÎü¹
69、226;¶ÈµÄ±ÈÖµ½øÐÐͳ¼Æѧ´¦Àíºó£¬·¢ÏÖÕâ5¸ö»ùÒòƬ¶Î¼ì³öÂÊÔ&
70、#218;¹ÇÈâÁö×éÖ¯±ê±¾ÓëÆäËû¹ÇÖ×Áö×éÖ¯±ê±¾ÖдæÔÚÏÔÖø²îÒì£&
71、#168;P<0.01£©ÔÚ¹ÇÈâÁö×éÖ¯ÓëÕý³£¹Ç×éÖ¯ÖÐÆä¼ì³öÂÊ´æÔÚÏÔÖø²îÒ
72、죨P<0.01£©.Òò´Ë£¬ÎÒÃÇÈÏΪÕâ5¸ö²îÒì»ùÒòƬ¶ÎÊǹÇÈâÁö¸ß±í
73、80;ï»ùÒòƬ¶Î£¬¿ÉÄÜÓë¹ÇÈâÁöµÄ·¢Éú·¢Õ¹ÓйØ. ¡¡¡¡3ÌÖÂÛ ¡¡¡¡
74、;ÈËÃÇ·¢ÏÖ¹ÇÈâÁöÓë¶àÖÖ°©»ùÒòÏà¹Ø£¬ÇÒÓ뿹°©»ùÒòµÄʧ»î
75、;ÓйأÛ2£Ý£¬ÕâЩ»ùÒòµÄ¸Ä±äÒÔ¼°±í´ïµÄ±ä»¯¾ö¶¨Á˹ÇÈâÁ
76、6;µÄÉúÎïѧÓëÁÙ´²ÐÐΪÕâЩ»ùÒòÔÚ¹ÇÈâÁö·¢Éú·¢Õ¹¹ý³ÌÖг
77、6;ÏÖµÄʱ¼ä²»Í¬¡¢±ä»¯²»Í¬¡¢ÒâÒ岻ͬ£¬¶à»ùÒò¶à±í´ïµÄ¼
78、6;²â¶ÔÓÚ¹ÇÈâÁöµÄÔçÆÚÕï¶Ï¡¢¼ø±ðÕï¶ÏÒÔ¼°¶ñÐԳ̶ȵÄÅж
79、7;¾ù¾ßÓÐÖØÒªÒâÒå.Ä¿Ç°ÒѲûÃ÷ÁËһЩ»ùÒòÓë¹ÇÈâÁöµÄ·¢Éú¡
80、62;·¢Õ¹Ïà¹ØÁª£Û3-5£Ý.ÎÒÃÇÔÚÒÔÇ°µÄ¹¤×÷ÖУ¬»ñµÃÁË123¸ö¹ÇÈâÁö
81、178;îÒì±í´ï»ùÒòƬ¶Î£¬´ÓÖÐÕÒ³öÁË11¸öͬԴÐԺܵ͵ÄÐòÁУ¬Æä
82、ÖÐ2¸öÐòÁб»GenBankÊÕ¼.ÎÒÃǸù¾ÝËù»ñµÃµÄÐòÁÐÉè¼ÆÁË11¶ÔÒýÎ&
83、#212;ËÓö¨Á¿PCR¼¼Êõ¶ÔÊÕ¼¯µÄ¶à¸ö¹ÇÈâÁö×éÖ¯±ê±¾½øÐÐÁ˱í´ïˮƽµÄ¼ì²â£¬É¸Ñ¡³öÁ˱&
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