维生素AD胶丸中维生素A的含量测定ppt课件

1、维生素维生素AD胶丸中胶丸中维生素维生素A的含量测定的含量测定 维生素维生素A的构造为具有一个共轭多烯醇侧链的构造为具有一个共轭多烯醇侧链的环己烷，由于其中有多个不饱和键，性质不稳的环己烷，由于其中有多个不饱和键，性质不稳定，易被空气中氧或氧化剂氧化，易被紫外光裂定，易被空气中氧或氧化剂氧化，易被紫外光裂解，并且其对酸不稳定。其醋酸酯比维生素解，并且其对酸不稳定。其醋酸酯比维生素A稳稳定，临床运用普通将本品或棕榈酸酯溶于植物油定，临床运用普通将本品或棕榈酸酯溶于植物油中运用。因此，维生素中运用。因此，维生素A及其制剂除需密封在凉及其制剂除需密封在凉暗处保管外，还需充氮或参与适宜的抗氧剂。暗处保

2、管外，还需充氮或参与适宜的抗氧剂。 维生素维生素A与氯仿、乙醚、环己烷或石油醚能与氯仿、乙醚、环己烷或石油醚能恣意混合，在乙醇中微溶，在水中不溶。恣意混合，在乙醇中微溶，在水中不溶。一、实验目的一、实验目的二、主要仪器和试剂二、主要仪器和试剂 紫外分光光度仪，紫外分光光度仪，100ml容量瓶，烧杯假容量瓶，烧杯假设干个，维生素设干个，维生素A胶丸规格胶丸规格2.5万单位万单位/粒环粒环己烷，乙醚己烷，乙醚 掌握掌握UV三点校正法的原理和维生素三点校正法的原理和维生素A含量含量测定的方法。测定的方法。三、实验原理三、实验原理 本法是在三个波优点测得吸收度，根据校正公式本法是在三个波优点测得吸收度

3、，根据校正公式计算吸收度计算吸收度A校正值后，再计算含量，故本法称为校正值后，再计算含量，故本法称为“三点校正法。该原理主要基于：三点校正法。该原理主要基于：1杂质的无关吸收在杂质的无关吸收在310nm340nm的波长范围内的波长范围内 几乎呈一条直线，且随波长的增长吸收度下降。几乎呈一条直线，且随波长的增长吸收度下降。2物质对光吸收呈加和性的原理。即在某一样品的吸物质对光吸收呈加和性的原理。即在某一样品的吸 收曲线上，各波优点的吸收度是维生素收曲线上，各波优点的吸收度是维生素A与杂质吸与杂质吸 收度的代数和，因此吸收曲线也是二者的叠加。收度的代数和，因此吸收曲线也是二者的叠加。 一胶丸内容物

4、平均分量的测定一胶丸内容物平均分量的测定四、实验过程四、实验过程 取胶丸取胶丸20粒，精细称定，用注射将内容物抽粒，精细称定，用注射将内容物抽出，再用刀片切开丸壳，用乙醚逐个洗涤丸壳三次，出，再用刀片切开丸壳，用乙醚逐个洗涤丸壳三次，置置50 ml烧杯中，再用乙醚浸洗烧杯中，再用乙醚浸洗12次，置通风处，次，置通风处，使乙醚挥散，精细称定，算出每丸内容物的平均分使乙醚挥散，精细称定，算出每丸内容物的平均分量。量。四、实验过程四、实验过程二供试品溶液的制备与测定二供试品溶液的制备与测定 取维生素取维生素AD胶丸内容物适量，精细称定，用环胶丸内容物适量，精细称定，用环己烷溶解并定量稀释成每己烷溶解

5、并定量稀释成每1 mL中含中含915单位的溶液。单位的溶液。按照分光光度法，测定其吸收峰的波长，并在以下各按照分光光度法，测定其吸收峰的波长，并在以下各波优点测定吸收度。计算各吸收度与波长波优点测定吸收度。计算各吸收度与波长328 nm处吸处吸收度的比值和波长收度的比值和波长328 nm处的处的E1%1cm值。值。 第一法第一法计算计算 求求 ：由：由 A= CL， 求得求得 =A/CL。 求效价求效价IU/g：效价系指每克供试品中所：效价系指每克供试品中所含维生素含维生素A的国际单位数的国际单位数IU/g。 即即IU/g= 1900。 求维生素求维生素A占标示量的百分含量：占标示量的百分含量

6、： 标示量标示量%=AD1900W100%/ W100L标示量标示量100%。A值的选择值的选择首先计算吸收度比值即首先计算吸收度比值即Ai/A328 假设最大吸收波长在假设最大吸收波长在326nm329nm之间，之间，并分别计算并分别计算5个波长下的差值，均不得超越个波长下的差值，均不得超越0.02时，那么不用校正公式计算吸收度，而时，那么不用校正公式计算吸收度，而直接用直接用328nm处测得的吸收度处测得的吸收度A328求得。求得。 假设最大吸收波长在假设最大吸收波长在326nm329nm之间，之间，并分别计算并分别计算5个波长下的差值，如有一个或几个个波长下的差值，如有一个或几个超越超越

7、0.02，这时应按以下方法判别：，这时应按以下方法判别： 假设假设A328校正与校正与A328的吸收度相差不超越的吸收度相差不超越3.0%，那么不用校正吸收度，仍以未经校正的，那么不用校正吸收度，仍以未经校正的A328求求得得 。 假设假设A328校正与校正与A328的吸收度相差在的吸收度相差在 -15%-3%之间，那么以之间，那么以A328校正得校正得 。 假设假设A328校正与校正与A328的吸收度相差小于的吸收度相差小于-15%或或大于大于+3%，那么不能用本法测定，而运用第二法皂化法，那么不能用本法测定，而运用第二法皂化法测定含量。测定含量。 假设最大吸收波长不在假设最大吸收波长不在3

8、26nm329nm之间，也不能之间，也不能用本法测定，而运用第二法皂化法测定含量。用本法测定，而运用第二法皂化法测定含量。 第一法校正公式：第一法校正公式：A328(校正校正)=3.52(2A328-A316-A340)维生素维生素A吸收度差值吸收度差值 由扫描结果得最大吸收波长为由扫描结果得最大吸收波长为327.7nm326329nm 各个差值均不超越各个差值均不超越0.02，不需用校正公式。故直接用，不需用校正公式。故直接用A328进展计算。进展计算。 328= A328 /100ms/D =0.746/(1000.0048/100)=155.42 效价效价= 1900=155.42190

9、0=295298 标示量标示量%=(AD1900W)/(W100L标示量标示量) 100%=(0.74610019000.08714)/(0.0048 100125000) 100%=102.9%二法：二法： 方法：精细称取一定量供试品，加氢氧化钾乙醇溶液后煮方法：精细称取一定量供试品，加氢氧化钾乙醇溶液后煮沸回流，得到的皂化液再经乙醚提取、洗涤、滤过、浓缩沸回流，得到的皂化液再经乙醚提取、洗涤、滤过、浓缩和枯燥等处置，最后用异丙醇溶解残渣并稀释成每和枯燥等处置，最后用异丙醇溶解残渣并稀释成每1ml中中含维生素含维生素A为为915单位的溶液，在单位的溶液，在300、310、325、334波优点

10、测定吸光度，并确定最大吸收波长。计算同第一法，波优点测定吸光度，并确定最大吸收波长。计算同第一法，换算因子为换算因子为1830。 二法校正公式：二法校正公式：A325校正校正=6.815A3252.5553104.260A334讨讨 论：论：1、维生素、维生素A具有紫外吸收特征，在具有紫外吸收特征，在325nm328nm的范围内有最大吸收；并且，的范围内有最大吸收；并且，它能与三氯化锑试剂作用，产生不稳定的蓝色。它能与三氯化锑试剂作用，产生不稳定的蓝色。故可利用这些性质对其进展鉴别和含量测定。故可利用这些性质对其进展鉴别和含量测定。2、维生素、维生素A醋酸酯的吸收度校正公式是用直线醋酸酯的吸收

11、度校正公式是用直线方程式法即代数法推导而来；维生素方程式法即代数法推导而来；维生素A醇的醇的吸收度校正公式是用类似三角形法几何法或吸收度校正公式是用类似三角形法几何法或称称6/7定位法推导而来。定位法推导而来。 3、在运用三点校正法时，除其中一点在最大吸、在运用三点校正法时，除其中一点在最大吸收波优点测定外，其他两点均在最大吸收峰的收波优点测定外，其他两点均在最大吸收峰的两侧进展测定。假设仪器波长精度不准确时，两侧进展测定。假设仪器波长精度不准确时，会产生较大误差。因此，在测定前务必要校正会产生较大误差。因此，在测定前务必要校正波长，并可用全反式维生素波长，并可用全反式维生素A进展测定，比较测

12、进展测定，比较测定结果和比值能否与对照品相符合，以进一步定结果和比值能否与对照品相符合，以进一步核对仪器波长能否准确。测定的样品应不得少核对仪器波长能否准确。测定的样品应不得少于两份。于两份。4、本组在对维生素、本组在对维生素A含量测定实验中出现过一些问题。含量测定实验中出现过一些问题。第一次用一法测定结果不符合规定，按照要求应该用二第一次用一法测定结果不符合规定，按照要求应该用二法测定。但分析缘由后，我们重新做了一遍，用一法测法测定。但分析缘由后，我们重新做了一遍，用一法测定获得了较好结果，所给维生素定获得了较好结果，所给维生素A含量符合规定。含量符合规定。我们发现第一次实验失败的缘由是：我

13、们发现第一次实验失败的缘由是：紫外分光光度计紫外分光光度计出现了问题，波长不准确，从而导致在相应波长下测得出现了问题，波长不准确，从而导致在相应波长下测得的吸收度不准确。可见仪器波长的准确与否在实验中是的吸收度不准确。可见仪器波长的准确与否在实验中是致关重要的。致关重要的。整个操作过程没有进展暗室操作，在光整个操作过程没有进展暗室操作，在光照下暴露了较长时间，而维生素照下暴露了较长时间，而维生素A不稳定，见光易蜕变，不稳定，见光易蜕变，所以导致测定含量不准。所以导致测定含量不准。 另外，在操作中应留意：另外，在操作中应留意： 在含量测定时胶壳要尽量洗干净，防止内容在含量测定时胶壳要尽量洗干净，防止内容物残留，使粒重尽量准确。物残留，使粒重尽量准确。 由于所取的样品量非常小，所以用于搜集样由于所取的样品量非常小，所以用于搜集样品的小烧杯一定要用溶剂洗涤多次并合并入容量品的小烧杯一定要用溶剂洗涤多次并合并入容量瓶中，容量瓶口也要冲洗使样品全部转入。瓶中，容量瓶口也要冲洗使样品全部转入。 在测定不同波长下的吸收度时每一次都要用在测定不同波长下的吸收度时每一次都要用空白液进展调零。空白液进展调零。 按以下操作步骤制备供试品溶