实验室生物安全管理

1、 实验室生物安全管理2011.062011.06 提 纲n实验室生物安全的核心管理n实验室生物安全概念n国际通行管理方法与中国特色n生物安全管理体系n生物安全管理制度实验室生物安全的核心管理 提 纲n生物安全-管理是关键n飞行安全的“海恩法则”n实验室感染的必然性与可控性生物安全管理是关键n技术要求n管理要求管理要求n政治责任生物安全管理是关键n如果缺乏健全和行之有效的管理体系，无论多么高级的实验室硬件设施，都难以发挥其安全作用n与发达国家的差距主要在人员素质和管理（国外专家认为中国大部分BSL-3实验室硬件比较好） 生物安全管理是关键n据不完全统计，国内外绝大多数生物安全实验室的感染事件和遗

2、漏事故都是由管理不善而导致的实验室感染相关事故n1941年美国发生74例实验室相关的吸入性布氏杆菌感染事故n1974年丹麦某医院临床生化检验室的工作人员肝炎发病率比普通人群高出 7倍n1976年英国某医学实验室的工作人员体检时发现结核菌感染者比其他人员高5倍n1978年英国报告一个商业洗衣房因清洗来自一Q热实验室的内衣裤及外衣时发生6例雇员和1例参观者感染Q热实验室感染相关事故n1992年美国报告职业性感染艾滋病者13例，其中1例是实验室工作者，12例是临床医护人员n1993年国内某医院报告225名医院工作人员（医生、护士、食堂工作人员、检验人员）HBV检测结果，其中检验人员感染率最高，阳性率

3、为81.2%n2004年新加坡、中国台湾、中国CDC SARS实验室感染事故频发的背后是“海恩法则” n关于飞行安全的“海恩法则”n一起重大的飞行安全事故背后有个事故征兆n每个征兆背后有 个事故苗头n每个苗头背后还有个事故隐患n几乎所有的灾难都是多个漏洞的叠加。只要认真落实已有的规则、规定，很多事故完全可以避免实验室感染必然性和可控性n必然性与可控性n可控制性条件n领导重视：意识、态度和责任n科学管理：条例、完善、提高n可靠的硬件：过硬、齐全、验证n高素质的科技队伍：坚持、培养、提高n不断完善的技术和SOP生物安全实验室概念提 纲n定义n生物安全实验室n三项技术措施n一级屏障和二级屏障nP3

4、实验室与BSL-3实验室n实验室生物安全n生物安全柜与超净台n洁净实验室与生物安全实验室生物安全实验室n硬件:实验室设计建造 实验设备的配置 个人防护装备n软件:管理规程 标准化的操作程序 n确保: 工作人员 周围环境 实验因子生物安全实验室n 生物安全分级（BSLs）n 实验室的操作规程和技术n 标准的操作规程n 特殊的操作规程n 安全设备（一级屏障）n 特殊设计和建筑要求（二级屏障）生物安全实验室n三项技术措施n样品隔离技术（机械、气幕），防止传染因子进入环境接触人体n定向流技术（三级负压系统），防止传染因子扩散n消毒灭菌技术（物理、化学），灭活传染因子生物安全实验室n一级屏障（prima

5、ry barrier）是操作者和被操作对象之间的隔离，也称一级隔离n如生物安全柜 分3级-I、II、III级n个体防护装备 口罩、面具、眼镜，防护衣、帽、裤、鞋、靴、袜、手套、正压服等 个人防护装备（个人防护装备（PPEPPE） 生物安全柜（BSC-Biosafety cabinet）生物安全实验室n二级屏障(secondary barrier) 生物安全实验室和外部环境的隔离，也称二级隔离 n实验室的设施结构n通风空调系统 n给水排水n电气和控制系统n二级隔离的防护能力取决于实验室分区和定向气流 n一般按照实验因子污染的概率把实验室分为洁净、半污染和污染三个区 生物安全实验室nP 3 实验室

6、与BSL-3实验室nP1-P4 (Physical protection )nBSL 1-4 (Biosafety level )实验室生物安全操作者、合作者、辅助人员操作者、合作者、辅助人员操作对象操作对象环境环境实验室生物安全n生物安全柜与超净台n生物安全柜n提供了对样品、人、环境的保护n超净台n仅提供对样品的保护生物安全柜类别级别工作口平均进风速m/s循环风比例（%）排风比例（%）连接方式I级0.360100密闭连接II级A10.380.517030可排到房间或设置局部排风罩A20.517030可排到房间或设置局部排风罩B10.513070密闭连接B20.510100密闭连接III级/0

7、100密闭连接实验室生物安全n洁净实验室与生物安全实验室n100级洁净实验室是必需的n洁净实验室不能代替生物安全实验室n生物安全实验室不允许正压n洁净实验室仅提供了对样品的保护n生物安全实验室有洁净度的要求，但要求不高洁净度的等级分类n洁净度的等级划分:尘埃颗粒大小 尘埃颗粒数目n美国联邦标准 “洁净室与洁净工作台的环境标准”，以每28.32L空气中含有0.5m的尘埃粒子数102 颗、104 颗、105 颗作为等级的名称，即100级、10000 级（7级）、100000 级（8级）n该等级换算成国际单位的每升粒子数则为3.5 颗、350 颗、3500 颗国际上常用的洁净等级表对于浓度很小的测定

8、值，除非有足够的大量取样提供确凿的数据，否则可靠性差管理方法与国际接轨n相关标准参照国际标准n病原微生物分类管理n生物安全实验室分级管理我国生物安全相关标准nGB19489-2004，实验室 生物安全通用要求 2004年4月5日发布，2004年10月1日正式实施n标准的编制主要参考了ISO 15190：2003（E）医学实验室安全要求nWHO实验室生物安全手册nWS-233，微生物和生物医学实验室生物安全通用准则 2002年12月3日发布，2003年8月1日实施 n该标准参考美国CDC/NIH微生物和生物医学实验室生物安全手册1999年第四版制定 我国生物安全相关标准nISO 15190：20

9、03（E）医学实验室安全要求（国标转化中）nISO15189 医学实验室质量和能力的具体要求(认可准则CNAL AC232004 )微生物危害等级分类n中国医学微生物菌种保藏管理办法（1985年，卫生部批准实施）n实验室生物安全通用要求n病原微生物实验室生物安全管理条例 n与国外危害等级排序相反微生物危害等级(GB 19489)nGB 19489-2004GB 19489-2004实验室实验室 生物安全通用要求生物安全通用要求 （20042004年年1010月月1 1日实施）日实施）n分级依据n微生物的致病性；传播方式和宿主范围；具有的有效预防措施；具有的有效治疗措施n分级n3.1 3.1 危

10、害等级I （低个体危害，低群体危害）n3.2 3.2 危害等级 (中等个体危害，有限群体危害)n3.3 3.3 危害等级 III （高个体危害，低群体危害）n3.4 危害等级 (高个体危害，高群体危害)微生物危害等级(国务院条例)n病原微生物实验室生物安全管理条例病原微生物实验室生物安全管理条例 n分级依据n病原微生物的传染性、感染后对个体或者群体的危害程度n将病原微生物分为四类n一类是指能够引起人类或者动物非常严重疾病的微生物，以及我国尚未发现或者已经宣布消灭的微生物n二类是指能够引起人类或者动物严重疾病，比较容易直接或者间接在人与人、动物与人、动物与动物间传播的微生物 微生物危害等级(国务

11、院条例)n三类是指能够引起人类或者动物疾病，但一般情况下对人、动物或者环境不构成严重危害，传播风险有限，实验室感染后很少引起严重疾病，并且具备有效治疗和预防措施的微生物n四类是指在通常情况下不会引起人类或者动物疾病的微生物n第一类、第二类病原微生物统称为高致病性病原微生物 n各种病原微生物的危害等级分类参见卫生部人间传染的病原微生物名录（2006.01）微生物危害等级病原生物的危险等级分布种类危害等级危害等级 危害等级危害等级病毒185114219细菌311901真菌635寄生虫1232临床检验相关生物危险等级分布实验室生物安全水平分级n根据所操作的生物因子的危害程度和采取的防护措施，将实验室

12、生物安全防护水平（biosafety level，BSL）分为4级，I级防护水平最低，IV级防护水平最高n以BSL-1、BSL-2、BSL-3、BSL-4表示实验室的相应生物安全防护水平n以ABSL-1、ABSL-2、ABSL-3、ABSL-4表示动物实验室的相应生物安全防护水平 生物安全实验室的分级实验室分级实验室分级处理对象处理对象危险等级危险等级BSL-1BSL-1对人体和环境危害较低，不会引发健康成人疾病 级四类BSL-2BSL-2对人体和环境有中等危害或具有潜在危险的致病因子级三类BSL-3BSL-3主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致命疾病的致病因子。通常有预防治疗措施 级二类

13、BSL-4BSL-4对人体有高度危险性，通过气溶胶途径传播或传播途径不明的微生物。尚无预防治疗措施 级一类一级生物安全防护 适用于实验对象已知对健康成年人无致病作用，对实验室工作人员和环境的潜在危害很小一级生物安全防护 举例：举例：n 枯草芽孢杆菌枯草芽孢杆菌n Naegleria gruberiNaegleria gruberi（耐格里原虫）耐格里原虫）n 感染性犬肝炎病毒感染性犬肝炎病毒n 大肠杆菌大肠杆菌二级生物安全防护 适用于实验对象对人和环境具有 中等潜在危害二级生物安全防护n 麻疹病毒麻疹病毒n 沙门氏菌沙门氏菌n 弓形虫弓形虫n 乙肝病毒乙肝病毒 举例：举例：* 有有效的疫苗或抗

14、生素治疗有效二级生物安全防护 举例：举例：n 血源病原体n 人类体液，尤其是明显有血液污染的体液 * * 特别要警惕污染的针头或者锐器三级生物安全防护 适用于实验对象是通过呼吸途径使人感染导致严重的甚至是致死性疾病的感染性材料三级生物安全防护n 暴露于通过气溶胶途径传播的致病菌n 严重感染，有可能致命n 例如：n 结核杆菌结核杆菌n 圣路易脑炎病毒圣路易脑炎病毒n 伯纳特考克斯体伯纳特考克斯体四级生物安全防护 适用于实验对象是危险的和新的感染性材料，表现出通过气溶胶途径传播实验室感染和致命疾病的高度危险性。四级生物安全防护n有暴露于通过气溶胶传播或者传播途径不明确的致病菌潜在可能n感染可能致死

15、n 例如：n 埃波拉病毒埃波拉病毒n 无名病毒（无名病毒（SNVSNV）n 里夫谷热病毒里夫谷热病毒病原微生物实验室生物安全管理条例n2004年11月12日，国务院颁布，2005年5月12日实施n家立法第一次，世界上也是少有的n规定国家对病原微生物按危害严重程度分类管理 n根据不同的生物安全水平要求对实验室分级管理 n明确各部门职责n卫生部、农业部、质检总局n加大了对实验室负责人的责任n撤职、刑事责任n有关工作以国家标准为依据强制认可n国家认可委管理机关及其职责n1. 1. 国务院卫生主管部门国务院卫生主管部门 主管与人体健康有关的实验室及其实验活动的生物安全监督工作n2. 2. 国务院兽医主

16、管部门国务院兽医主管部门 主管与动物有关的实验室及其实验活动的生物安全监督工作n3. 3. 国务院其他有关部门国务院其他有关部门 在各自职责范围内负责实验室及其实验室活动的生物安全管理工作n4. 4. 县级以上地方人民政府县级以上地方人民政府 及其有关部门在各自职责范围内负责实验室及其实验室活动的生物安全管理工作n5. 5. 实验室的设立单位实验室的设立单位 及其主管部门负责实验室日常活动的管理，承担建立健全管理制度,检查、维护相关文件n病原微生物名录n高致病性病原微生物实验室（活动）管理办法n高致病性病原微生物菌毒种运输管理规定n病原微生物菌毒种保藏机构管理办法运输批准权限n 在省、自治区、

17、直辖市行政区内运输的高致病微生物或其样本n需要跨省、自治区、直辖市运输或运往国外的n出入境检验检疫部门需要运输高致病微生物或其样本n需要通过民航运输高致病微生物或其样本生物安全管理体系n相关法规、标准n组织机构 n管理体系文件 相关法规、标准n法规 n国务院病原微生物实验室生物安全管理条例n技术标准n国家标准实验室 生物安全通用要求（GB19489-2004） n生物安全实验室建筑技术规范（GB50346 -2004） n微生物和生物医学实验室生物安全通用准则（WS 233-2002） 组织机构 n我国实验室生物安全管理实行法人责任制及实验室主任和项目负责人责任制n设立生物安全实验室单位的最高

18、管理者组织成立生物安全领导小组（如果必要）和生物安全委员会负责生物安全工作n实验室设置专职或兼职安全监督员 最高管理者（法定代表人最高管理者（法定代表人）生物安全委员会生物安全委员会实验室主任实验室主任( (生物安全生物安全负责人负责人) )项目负责人项目负责人三三 级级 生生 物物 安安 全全 防防 护护 实实 验验 室室生物安全领导小组生物安全领导小组相关职能科室相关职能科室相关业务科室相关业务科室后勤保障部门后勤保障部门安全监督员安全监督员安全管理体系组织结构安全管理体系组织结构框图框图 组织机构 n最高管理者n为单位法定代表人，对实验室生物安全负总责n负责建立三级安全防护实验室管理体系

19、n组织并授权生物安全领导小组和生物安全委员会负责实验室生物安全工作n批准和发布生物安全手册。 组织机构 n生物安全委员会 n卫生部组建国家病原微生物实验室生物安全专家委员会n省级组建本地区病原微生物实验室生物安全专家委员会n国家病原微生物实验室生物 安全专家委员会章程 组织机构 n单位生物安全委员会 n审议实验室管理规章制度n对本实验室所操作生物因子的生物危险程度评估，审查和批准在实验室开展的实验项目n审查操作程序，监督和检查有关法规和操作规程的执行n审查突发事故应急预案，对实验室事故进行评估，提出处理和改进意见n对实验室人员实施医务监督n负责指定实验室技术和生物安全负责人的代理人等组织机构

20、n生物安全委员会 n生物安全委员会成员可以由单位负责人、生物安全管理人员、医学顾问通过选举或推荐担任n有学者提出在生物安全委员会的成员中,必须有40%的外单位专家组织机构 n生物安全领导小组 n生物安全领导小组成员可由最高管理者任命n负责领导安全防护实验室的建设、管理、使用、维护，协调与实验室生物安全相关科室部门的工作n如果生物安全委员会成员拥有足够的管理资源承担该职能，那么，生物安全领导小组不是必须的组织机构 n实验室主任 n一般应由具有副高级以上技术职称，熟悉实验室生物安全防护知识和有关法规、制度、规程的人员担任n负责实验室的日常管理、实验技术和生物安全工作；组织生物安全防护知识和有关法规

21、、制度、规程的宣贯n决定进入实验室的工作人员n监督有关法规和操作规程的执行，纠正出现的违规活动并有权停止实验组织机构 n实验室主任 n定期组织对实验室设备各项技术参数的检查和实验室装备的维护保养n负责实验室紧急情况及事故的处置并向生物安全委员会和生物安全领导小组报告组织机构 n项目负责人 n项目负责人是某个具体检测或研究项目的总负责人，必须熟悉实验室生物安全防护知识n负责向生物安全委员会提交所开展项目的“微生物危害评估报告”和“实验微生物操作规程”在获准后负责项目相关实验按有关法规和操作规程的执行n在实验室实行开放共享时必须实行项目负责人制度组织机构 n安全监督员 n可以专职或兼职，必须有足够

22、得权力监督实验室制度、操作规程的实施n发现不符合规定的行为或安全隐患有权要求有关人员进行纠正n对于发现的严重问题及时向实验室主任报告或直接向生物安全委员会、生物安全领导小组报告n可以参照质量管理体系中实验室质量监督员的工作模式开展工作管理体系文件 n生物安全手册 n实验室操作规程和技术规范 n生物危害评估 n高致病性微生物检测研究实验室开展新项目程序n体系运行记录 管理体系文件四个层次n体系文件包含生物安全手册、程序文件、作业指导书和质量、技术记录等四个层次n根据具体情况，生物安全手册和程序文件可以采用二合一的形式生物安全手册n介绍实验室概况、描述生物安全质量方针、目标、编制安全管理手册的目的

23、、编制依据、适用范围并对手册的发布、修订和更新做出规定n实验室安全管理要求。包括管理体系及组织结构、各级管理人员和部门职责、实验室管理制度 生物安全手册n实验室安全技术要求 包括危害评估、健康监护、安全计划审核检查、实验室事件报告、人员培训、内务管理、安全工作行为、各种应急预案、样本运送、废弃物处置等n具体检测项目的微生物生物危害评估报告，实验操作技术规程等 实验室操作规程和技术规范 n实验室的运行规范n仪器设备的使用规范n针对感染性材料的试验操作规范n个人防护用品的使用规范n实验室消毒规程n危险废弃物的处置规程n尖锐器具的安全操作规程n实验紧急情况处理规程 生物危害评估n评估目的n生物危害评

24、估是对微生物和毒素可能给人或环境带来的危害所进行的评估n目的是为确定生物安全防护等级、实验标准操作规程提供重要依据 n在危害评估的基础上，按不同级别的防护要求选择适当的个人防护装备n防止工作人员发生感染，同时避免过分防护在群众中造成恐慌 生物危害评估n评估内容n生物因子的种类（已知的、未知的、基因修饰的或未知传染性的生物材料）n来源n传染性、致病性n传播途径n在环境中的稳定性n感染剂量、浓度n动物实验数据n预防和治疗材料安全数据单(MSDS)nmaterial safety data sheet(MSDS)material safety data sheet(MSDS)n n提供详细的危险和注

25、意事项信息的技术通报 n GB19489规定应有“获得、维持和分发实验室所有使用材料之安全数据单（MSDS）的程序” 高致病性微生物检测研究实验室 开展新项目程序 n取得卫生部高致病性病原微生物实验室资格证书n开展新项目申报程序n提交生物安全评估报告和实验操作技术规程n分析可能造成污染的关键环节，有针对性的提出生物安全防护措施n提出实验采用生物安全防护等级的意见，交生物安全委员会审查n报省级以上卫生行政部门批准体系运行记录 n应有制度或程序规定保存实验室运行相关记录n实验室安全记录n工作日志n实验原始记录n设备条件监控及检测记录n消毒记录n事故（暴露）记录n人员培训记录n员工健康档案等生物安全管理制度n准入制度n设施设备监测、检测和维护制度n健康医疗监督制度