儿茶酚胺的分离检测方法概述

1、儿茶酚胺的分离检测方法概述佳木斯大学药学院药学专业班级:一班姓名：姜亭亭学号：0911074124儿茶酚胺类物质分离分析方法概述（姜亭亭 佳木斯大学药学院药学一班）摘要儿茶酚胺类物质是一种内源性物质，当其的含量发生显著变化时，就代表人 体出现了一些病变，如巴金森氏病、高血压等，着要对这些疾病进行诊断和治疗，儿茶酚 胺类物质的检出和定量是不可缺少的手段，本文通过引用一些文献对儿茶酚胺类物质的一 些分离分析方法进行了概述。关键词儿茶酚胺；分离；检测儿茶酚胺类物质作为交感肾上腺素能神经元和肾上腺髓质合成与释放的单胺类神经递 质，是生物体内具有较强生理学效应的内源性活性物质，它包括去甲肾上腺素（NE）

2、、5- 羟色胺（5-HT）、肾上腺素（E）和多巴胺（DA）,这一类物质的化学结构特点是都含有一 个双羟基苯核和一个带氨基的侧链。此类物质在脑和神经信号传导中起着重要的作用并且 与多种生理、病理现象密切相关，参与心率呼吸和睡眠等植物神经功能调控，是一类重 要的神经递质，与人们的健康有密切关系。在医学方面其含量测定不仅可作为神经母细胞 瘤、嗜铭细胞瘤和原发性高血压的诊断依据，而且可应用于其他儿茶酚胺相关的疾病研究, 如传统儿茶酚胺类物质活动症、忧郁症及神经系统变性病变如帕金森氏综合症，还与心血 管疾病等的出现有关。因此儿茶酚胺的分析在生物学和医学方面有着重要意义，此类物质 的分离分析就更为关键，然

3、而使用正确的方法是得到正确的结论前提5。早在20世纪40年代人们已经开始对儿茶酚胺类物质的检测分析4,早期的测定方法主要是三羟基口引喋法和乙二胺缩合法.随着分析科学的蓬勃发展人们对儿茶酚胺研究己经更加深入，目前主要的分离检测方法主要有高 效液相色谱法(HPLC)、毛细管电泳法(CE)、化学修饰电极法、气相色谱法(GC)、离 子交换色谱(IEC)、能催化动力学光度法以及与质谱、电化学检测法、荧光检测法、化 学发光检测法之间的联用等1-5, 7, 8, 1076, 18, 21-22。1化学修饰电极法儿茶酚胺在固体电极上的电子传递速率非常缓慢，旦其本身或反应产物易在电极表面 吸附，导致电极表面钝化

4、。利用具有特定功能的化学修饰电极可避免电极表面的污染，提 供三维空间反应场，从而进行电催化测定。莫金垣等24人研究了血红素修饰电极上儿茶 酚胺的电催化测定，DA和E的线性范围达L0*10-7l*10-4mol/L和8*10-8 4*10-5 mol/Lo饿配位聚合物因其独特的电子转移特性，己被广泛地应用于化学修饰电极的制备。 倪静安等25人用碳及石墨作基底,讨论了 0s(bpy)2(PVP)10Cl Cl (OsP)修饰碳基电的 制备及电化学性质，研究了三种神经递质在OsP电极上的电催化行为，测得DA、E和NE 的线性范围分别为(TO. Immol/L、600. Immol/L和00. 13m

5、mol/La实验证明化学修饰电极 法十一中高选择性的，可连续测定的方法3。2高效液相色谱法(HPLC)高效液相色谱法是在经典液相色谱发的基础上，引入了气相色谱法的理论和实验技术, 以高压输送流动相，采用高灵敏度检测器，发展而成的现代液相色谱分析方法。其中高效 液相色谱与电化学检测法、荧光检测法、化学发光检测法、紫外检测的联用应用比较广泛。 2.1高效液相色谱-紫外检测(HPLC- UV)法梁秋云等2在高效液相色谱-紫外检测(HPLC- UV)法测定自发性高血压大鼠(SHR)血 浆中去甲肾上腺素(NA)的含量实验中，他们以C18为色谱柱，以甲醇- 0. 15 mol* L-1磷 酸二氢钾缓冲液(

6、1： 9, V/V, PH6.0)为流动相，检测波长为280nm,柱温为室温，流速为 1.0 mL *min-lo结果显示NA检测浓度线性范围为0. 540微克每升(厂0. 999 9),最 低检测浓度为0.05微克每升。平均回收率为97. 49%, RSD小于3.81%。本方法线性、 精密度、回收率良好，灵敏度高，操作简便，可用于NA的药动学及相关研窕。2. 2高效 液相色谱-荧光检测(HPLC-FD )法此方法为高效液相色谱与荧光检测法的联用。邓向军6在高效液相-荧光检测法测定 尿液中儿茶酚胺类化合物的含量中就是运用了此方法，他采用真空浓缩和真空干燥法对样 品进行预处理，H PLC-FD测

7、定结果线性关系良好，回收率较高，得出此方法准确性好、 离效率高、操作简单、易于控制操作条件、CA s具有高灵敏度和高对选择性等众多优点。方兰云等13在测定血浆中的儿茶酚胺及其代谢产物中乂加入了 固相萃取，他们采取采用固相萃取方法对血浆样品进行预处理,利用高效液相色谱分离待测物，最后使用荧光检测器检测儿茶酚胺及其代谢产物。C18小柱处理加标血浆样品，在优 化的最佳洗脱条件下，加标回收率在85. 6% 106. 3%范围内。方法的相对标准差(RSD ) 为2 3 % 6 7 %。各被测物质线性关系良好，方法准确和精密，但荧光粉光光度法前 处理复杂，不能把集中成分完全分开8。2. 3高效液相色谱-串

8、联质谱(HPLC-MS)法此方法是高效液相色谱与质谱的联用，王贤亲等21液相色谱-串联质谱法测定人血 浆中儿茶酚胺的含量中就是运用的此方法进行定量分析。肾上腺素、去甲肾上腺素和多巴 胺的最小检测限(L0D)在4. 3, 2.4和6. 6ng/mL之间，浓度在0 500 ng/ mL范围内 线性良好(r=0. 9921),平均回收率在85. 8% 93. 4%之间，日内、日间精密度 RSD为9与 ( n=5) 结果表明该方法专属性强、灵敏及准确，具有二次分离作用、专属 性强的优势，分析时间短的优势，适用r-人血浆中儿茶酚胺快速分析的需要，可以适用于 人血浆儿茶酚胺的快速分析。还可以有HPLC- F