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1、分光光度计的基本工作原理是基于物质对光(对光的波长) 的吸收具有选择性, 不同的物质都有各自的吸收光带, 所以, 当光色散后的光谱通过某一溶液时, 其中某些波长的光线就会被溶液吸收。 在一定的波长下, 溶液中物质的浓度与光能量减弱的程度有一定的比例关系, 即符合比尔定律。T = I/Io lg(Io/I)= cb式中,T为透过率,Io为入射光强度,I为透射光强度,A为消光值(吸光度),e为吸收系数,b 为溶液的光径长度, c 为溶液的浓度。从以上公式可以看出,当入射光、吸收系数和溶液厚度一定时,透光率是根据溶液的浓度而变化的。721 型分光光度计的构造721型分光光度计允许的测定波长范围在36
2、0800nm ,其构造比较简单,测定的灵敏度和精密度较高。因此,应用比较广泛。721 型分光光度计的仪器构造见下图。从光源灯发出的连续辐射光线,射到聚光透镜上,会聚后,再经过平面镜转角 90° ,反射至入射狭缝。 由此入射到单色器内, 狭缝正好位于球面准直物镜的焦面上, 当入射光线经过准直物镜反射后, 就以一束平行光射向棱镜。 光线进入棱镜后, 进行色散。 色散后回来的光线,再经过准直镜反射, 就会聚在出光狭缝上, 再通过聚光镜后进入比色皿, 光线一部分被吸收,透过的光进入光电管,产生相应的光电流,经放大后在微安表上读出。721 型分光光度计的使用方法首先接通电源,打开电源开关1,指
3、示灯亮,打开比色皿暗箱盖8,预热20分钟。波长选择旋钮6 ,选择所需的单色光波长,用灵敏度旋钮2 选择所需的灵敏档。放入比色皿,旋转零位旋钮 5调零,将比色皿暗箱盖合上,推进比色皿拉杆3,使参比比色皿处于空白校正位置,使光电管见光,旋转透光率调节旋钮4 ,使微安表9 指针准确处于100%。按上述方法连续几次调整零位和100%位,即可进行测定工作(仪器面板见 图5-6)。721型分光光度计使用和维护中应注意事项:连续使用仪器的时间不应超过2小时,最好是间歇 0.5小时后,再继续使用。比色皿每次使用完毕后,要用去离子水洗净并倒置晾干后,存放在比色皿盒内。 在日常使用中应注意保护比色皿的透光面,使其不受损坏或产生划痕,以免影响透光率。仪器不能受潮。在日常使用中,应经常注意单色器上的防潮硅胶 (在仪器白底部)是否变色, 如硅胶的颜色已变红,应立即取出烘干或更换。在托运或移动仪器时,应注意小心轻放。721型分光光度计灵敏度档;2-波长调节器;3-调“口”电位器; 4-光量调节器:5-比色皿座架拉杆;3电源开
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