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文档简介

1、細菌細胞觀察劉佩珊口腔中微生物菌叢之觀察在口腔中唾液含有水分、胺基酸、蛋白質、脂質、醣類及一些無機物，因此適合菌體生長。牙齒表面亦會有大量菌體存在形成牙菌斑。主要菌群為厭氣性螺旋體與弧菌、葡萄球菌、乳酸桿菌及鏈球菌乳酸桿菌及鏈球菌附著於齒面上，可醱酵醣類產生乳酸，造成牙齒脫鈣作用，進而形成細微穿孔導致齵齒。本實驗以牙籤採集口腔及牙齒面檢體，並藉由簡單的染色來觀察口腔中的細菌。蓋玻片一端滴加一滴methylene blue染劑（圖d） 以吸水紙由另一端將水吸出（圖e） 口腔中微生物菌叢之觀察鼻腔中金黃葡萄球菌（staphylococcus aureus）之鑑定天然存在人體的微生物稱為正常菌群 在

2、鼻腔中主要菌群為金黃葡萄球菌及表皮葡萄球菌 msa含高濃度鹽類，可抑制葡萄球菌屬以外之微生物生長msa含甘露醇（mannitol），經醱酵產酸後，可經由酚紅（phenol red）顯示ph值之改變金黃葡萄球菌能醱酵甘露醇，使菌落周圍呈黃色，表皮葡萄球菌不醱酵甘露醇，顏色不改變。 以無菌棉棒伸進鼻孔約2.5公分，輕輕旋轉棉棒使之與鼻孔黏膜接觸。 壓舌板壓住舌頭，以無菌棉棒於咽喉表面充分旋轉，採集檢體。勿觸及舌頭。 將採樣的棉棒直接以鋸齒狀劃線接種於msa plate上。表皮葡萄球菌大腸桿菌鏈球菌金黃葡萄球菌細菌簡單染色染劑（ stains ）鹼性染劑鹼性染劑正電荷染色原甲烯藍、結晶紫、石炭酸複紅 酸性染劑酸性染劑負電荷染色原伊紅、苯胺黑簡單染色（ simple stains ）使用單一染劑使用鹼性染劑（正電荷）觀察細菌形狀（球狀、桿狀、螺旋狀）、大小、排列情形（成鏈、成簇、成對、四聯）甲烯藍（1-2分鐘）、結晶紫（20-60秒）、石炭酸複紅（15-30秒）製備染色抹片準備乾淨之載玻片自肉湯培養或固體培養製備抹片熱固定 過火數次或浸泡於甲醇中一分鐘簡單染色步驟將菌製備成抹片，各抹片於染色前需先經過熱固定。將玻片置於染色盤上，覆以染色液，並注意適宜之染色時間。以蒸餾水尖嘴瓶小心沖去過剩染色液，此時玻片應與水流成平行，如此可減少微生物自抹片中流失。以吸水

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