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文档简介
1、多聚A特异性核糖核酸酶(PARN)ELISA试剂盒说明书本试剂仅供研究使用标本:体液多聚A特异性核糖核酸酶(PARK)ELISA试剂盒说明书试验原理:BFGF试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知BFGF浓度的标准品、未 知浓度的样品加入微孔前标板内进行检测。先将BFGF和生物素标记的抗体同时温育。人 碱性成纤维细胞生长因子ELISA检测试剂盒洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温 育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。 颜色的深浅和样品中BFGF的浓度呈比例关系。多聚A特异性核糖核酸能(PARN)ELISA试剂盒说明书自备材料1
2、 .蒸一水e2 .加样器:5ul、10ul. 50ul, lOOul. 200、500ul> lOOOulo 3.振荡器及磁力搅 拌器等。安全性1.避免直接接触终止液和底物A、Bo 一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。 2.实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。3.不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。多聚A特异性核糖核酸能(PARX)ELISA试剂盒说明书操作注意事项1.试剂应按标签储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。 2.实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。3 .不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。4 .使用一次性的吸头以
3、免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属 部分的加样器。5.使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成 份及样品。6.洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。7 .底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。 避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取0D值。8 .加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。9.按照中标明 的时间、加液的量及顺序进行温育操作。1、血清操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血 液后,lOOOXg离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2、血浆EDT
4、A、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。lOOOXg离心30分钟去除颗粒。3、细胞上清液-lOOOXg离心10分钟去除颗粒和聚合物。4、保存如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在 37或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备标准品:标准品的系列稀释应在实验时准备,不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。2.洗涤缓冲液(50X)的稀释:蒸镭水50倍稀释。多聚A特异性核糖核酸酶(PARK)ELISA试剂盒说明书操作步骤1 .使用前,将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫
5、,以免加样时加入大 量的气泡,产生加样上的误差。2 .根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建 议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。3 .加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加 入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,轻轻振荡混匀,37温育1小时。4 .甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复 此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。5 .每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP,轻轻振荡混匀,37温育30分钟。6 .甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗
6、涤液,用吸水纸拍干。重复 此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。7 .每孔加入底物A、B各50ul,轻轻振荡混匀,37温育10分钟。避免光照。8 .取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。9.在430nm波 长处测定各孔的0D值。局限6号标准品以上的结果为非线性的,根据此标准曲线无法得到精确的结果。多聚A特异性核糖核酸能(PARK)ELISA试剂盒说明书性能1 .灵敏度:最小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期 浓度相关系数R值为0. 990o2 .特异性:不与其它细胞因子反应。3 .重复性:板内、板间变异系数均小于10虬多聚A特异性核糖
7、核酸酶(PARX)ELISA试剂盒说明书结果判断与分析1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的0D值2、以吸光度0D值为纵坐标(Y),相应的BFGF标准品浓度为横坐标(X),做得相 应的曲线,样品的BFGF含量可根据其0D值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围:0800pg/ml 4、敏感度:1.0 pg/mlDPD兔子脱氧毗咤酚/脱氧毗咤咻规格:48T/96T DHEA-S兔子脱氢表雄酮硫酸酯规格:48T/96T规格:48T/96THA兔子透明质酸MBP兔子髓磷脂碱性蛋白规格:48T/96T RBP-4兔子视黄醇结合蛋白4规格: 48T/96TGHRP兔子生长激素释放多肽规格:
8、48T/96T ADM兔子肾上腺髓质索规格: 48T/96T NT-4兔子神经营养因子4 NT-3兔子神经营养因子3规格:48T/96T 规格:48T/96TNSE兔子神经特异性烯醇化酶规格:48T/96T NGF兔子神经生长因子规格: 48T/96TGFAP兔子神经胶质纤维酸性蛋白规格:48T/96T PGE2兔子前列腺素E2规格: 48T/96T PGE1兔子前列腺素E1规格:48T/96T GIP兔子葡萄糖依赖性胰岛素释放 多肽规格:C0RT兔子皮质酮/肾上腺酮规格:48V96T Cortisol兔子皮质醵 规格:48T/96TFII兔子凝血因子II规格:48T/96T TR兔子凝血能受
9、体规格:48T/96TBNP兔子脑钠素/脑钠尿肽规格:48T/96T ES兔子内皮抑素规格:48T/96TeNOS-3兔子内皮型一氧化氮合成酶3规格:ET-1兔子内皮素1规格:48T/96T ET-1兔子内皮素1规格: 48T/96T IgM兔子免疫球蛋白M规格:48T/96T IgG兔子免疫球蛋白G规格: 48T/96T IgE兔子免疫球蛋白E规格:48T/96T48T/96T48T/96TIgA兔子免疫球蛋白A规格:48T/96T Sam兔子可溶性粘附分子规格: 48T/96TsVCAM-1兔子可溶性血管细胞粘附分子1规格:48T/96T sEPCR兔子可溶性血管内皮细胞蛋白C受体 规格:
10、48T/96T规格:48T/96TsICAM-1兔子可溶性细胞间粘附分子1SCD40L兔子可溶性白细胞分化抗原40配体 规格:48T/96TsP-selectin兔子可溶性P选择素 规格:48T/96T sE-selectin兔子可溶性E 选择素规格:48V96T ANGA兔子抗中性粒细胞颗粒抗体规格:48T/96T MIP-5 兔子巨噬细胞炎性蛋白5规格:48T/96TMIP-1 a /CCL3兔子巨噬细胞炎性蛋白la 规格:48T/96T Collagenase II兔 子胶原酶II规格:48T/96T Collagenase I兔子胶原酶I规格:48T/96T bFGF 兔子碱性成纤维细胞生长因子 T4兔子甲状腺素规格:48T/96T规格:48T/96TTIMP-1 MMP-9 MMP-5 MMP_4
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