实验七、八酵母菌形态与大小测定

1、实验七实验七 酵母菌的形态观察及酵母菌的形态观察及 死活细胞的鉴别、细胞活力测定死活细胞的鉴别、细胞活力测定实验目的实验目的 观察酵母菌的形态及出芽生殖方式观察酵母菌的形态及出芽生殖方式 学习区分酵母菌死活细胞的实验方法学习区分酵母菌死活细胞的实验方法 掌握酵母菌的一般形态及其与细菌的区别掌握酵母菌的一般形态及其与细菌的区别实验原理 酵母菌：是单细胞真核微生物，大小通常比常见酵母菌：是单细胞真核微生物，大小通常比常见细菌大几倍甚至几十倍细菌大几倍甚至几十倍 繁殖方式：芽殖、裂殖、无性孢子繁殖、有性孢繁殖方式：芽殖、裂殖、无性孢子繁殖、有性孢子繁殖子繁殖 美蓝氧化型呈蓝色，还原型为无色。美蓝氧化

2、型呈蓝色，还原型为无色。 活的酵母菌细胞具有新陈代谢作用，细胞内具有活的酵母菌细胞具有新陈代谢作用，细胞内具有较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为较强的还原能力，能使美蓝由蓝色的氧化型变为无色的还原型。无色的还原型。实验材料实验材料 菌种：酿酒酵母菌种：酿酒酵母 溶液或试剂：溶液或试剂：0.05%和和0.1%美蓝美蓝 仪器及其他用具：显微镜、载玻片、盖玻片等仪器及其他用具：显微镜、载玻片、盖玻片等实验步骤实验步骤 滴加滴加1美蓝染液，按无菌操作挑取少量酵母菌美蓝染液，按无菌操作挑取少量酵母菌苔放在染液中，混合均匀苔放在染液中，混合均匀 盖好盖玻片盖好盖玻片 3min后镜检，由低倍镜到高倍

3、镜，并根据颜色后镜检，由低倍镜到高倍镜，并根据颜色区别死活细胞区别死活细胞 30min后再次观察后再次观察 0.05%美蓝染液重复上述操作美蓝染液重复上述操作实验结果实验结果 设计一个表格，内容：不同浓度、不同时间下酵设计一个表格，内容：不同浓度、不同时间下酵母菌的活细胞数和死亡细胞数。母菌的活细胞数和死亡细胞数。 绘制一张图，该图可明确区分出活细胞和死细胞，绘制一张图，该图可明确区分出活细胞和死细胞，标明美兰的浓度、作用时间、放大倍数，标明美兰的浓度、作用时间、放大倍数，分析讨论分析讨论 相同浓度不同时间进行活细胞和死细胞计数有无相同浓度不同时间进行活细胞和死细胞计数有无差别，可能原因是什么

4、？差别，可能原因是什么？ 不同浓度相同时间进行活细胞和死细胞计数有无不同浓度相同时间进行活细胞和死细胞计数有无差别，可能原因是什么？差别，可能原因是什么？实验八实验八 微生物大小的测定微生物大小的测定一、目的要求一、目的要求 1、学习并掌握用测微尺测定微生物 大小的方法。 2、了解目镜测微尺和镜台测微尺的原理 3、增强对微生物细胞大小的感性认识。二、实验器材及用品二、实验器材及用品 1、菌种 酵母菌 2、仪器或其它用具 目镜测微尺，镜台测微尺，显微镜。三、基本原理三、基本原理 微生物细胞大小，是微生物的形态特征之一，也是分类鉴定的依据之一。由于菌体很小，只能在显微镜下测量。用来测量微生物细胞大

5、小的工具有目镜测微尺和镜台测微尺。 镜台测微尺 镜台测微尺是中央部分刻有精确等分镜台测微尺是中央部分刻有精确等分线的载玻片。线的载玻片。 一般将一般将1cm1cm等分为等分为100100格，每格长度等格，每格长度等于于0 001cm01cm（即（即100m100m）。是专用于校）。是专用于校正目镜测微尺每格长度的。正目镜测微尺每格长度的。目镜测微尺目镜测微尺 目镜测微尺是一块可放在接目镜内的隔板上的目镜测微尺是一块可放在接目镜内的隔板上的圆形小玻片，其中央刻有精确的刻度，有等分圆形小玻片，其中央刻有精确的刻度，有等分5050小格或小格或100100小格两种，每小格两种，每5 5小格间有一长线相

6、小格间有一长线相隔。隔。 由于所用接目镜放大倍数和接物镜放大倍数的由于所用接目镜放大倍数和接物镜放大倍数的不同，目镜测微尺每小格所代表的实际长度也不同，目镜测微尺每小格所代表的实际长度也就不同，因此，目镜测微尺不能直接用来测量就不同，因此，目镜测微尺不能直接用来测量微生物的大小，在使用前必须用镜台测微尺进微生物的大小，在使用前必须用镜台测微尺进行校正，以求得在一定放大倍数的接目镜和接行校正，以求得在一定放大倍数的接目镜和接物镜下该目镜测微尺每小格的相对值，然后才物镜下该目镜测微尺每小格的相对值，然后才可用来测量微生物的大小。可用来测量微生物的大小。 显微测微尺显微测微尺校对四、操作步骤1 1、

7、装目镜测微尺、装目镜测微尺2 2、校正目镜测微尺、校正目镜测微尺（1 1）放镜台测微尺）放镜台测微尺 将镜台测微尺刻度面朝上放在显微将镜台测微尺刻度面朝上放在显微镜载物台上。镜载物台上。（2 2）先用低倍镜观察，将镜台测微尺有刻度的部分移至）先用低倍镜观察，将镜台测微尺有刻度的部分移至视野中央，调节焦距，当清晰的看到镜台测微尺的刻度后，视野中央，调节焦距，当清晰的看到镜台测微尺的刻度后，转动目镜使目镜测微尺的刻度与镜台测微尺的刻度平行。转动目镜使目镜测微尺的刻度与镜台测微尺的刻度平行。利用移动器移动镜台测微尺，使两尺在某一区域内两线完利用移动器移动镜台测微尺，使两尺在某一区域内两线完全重合，然

8、后分别数出两重合线之间镜台测微尺和目镜测全重合，然后分别数出两重合线之间镜台测微尺和目镜测微尺所占格数。用同样的方法换成高倍镜和油镜进行校正，微尺所占格数。用同样的方法换成高倍镜和油镜进行校正，分别测出在高倍镜和油镜下，两重合线之间两尺分别所占分别测出在高倍镜和油镜下，两重合线之间两尺分别所占格数。格数。3.计下两吻合刻度间，目镜测微尺与物镜测微尺的格数。计下两吻合刻度间，目镜测微尺与物镜测微尺的格数。按下列公式算出目镜测微尺每小格所代表长度。按下列公式算出目镜测微尺每小格所代表长度。目镜测微尺每格长度（微米）目镜测微尺每格长度（微米） 两吻合刻度间物镜测微尺格数两吻合刻度间物镜测微尺格数10

9、m= 两吻和刻度间目镜测微尺格数两吻和刻度间目镜测微尺格数例如：目镜测微尺的例如：目镜测微尺的5格等于物镜测微尺的格等于物镜测微尺的2格，则目镜格，则目镜测微尺测微尺1格格=（210）/5=4微米微米 低倍镜下-倍目镜测微尺每格长度为- 高倍镜下-倍目镜测微尺每格长度为- 油镜下-倍目镜测微尺每格长度为-注：要求测量10个酵母细胞的平均值目镜测微尺标定记录10 x40 x100 x目镜格数物镜格数目镜测微尺每格长度3、菌体大小测定 先用低倍镜和高倍镜找到标本后，换油镜测定酵母菌的直径。 测定时，通过转动目镜测微尺和移动载玻片，测出细菌直径或宽和长所占目镜测微尺的格数。 最后将所测得的格数乘以目镜测微尺（用油镜时）每格所代表的长度，即为该菌的实际大小。注意事项 1、镜台测微尺的玻片很薄，在标定油镜时，要格外注意，以免压碎镜台测微尺或损坏镜头； 2、标定目镜测微尺时，一定要准确对正目镜测微尺与镜台测微尺的重合线。五、实验报告 1 1、不同放大倍数下，目镜测微尺标定的结果。不同放大倍数下，目镜测微尺标定的结果。 2 2、酵母菌实际测量的结果。、酵母菌实际测量的结果。 3 3、结论：本实验所用酵母菌