小球藻的培养和保存技术

1、小球藻的培养和保存技术如何培养和保存小球藻，是繁殖小丑鱼的另一个关键。小球 藻可 以买成品的，也不贵。也可以自己培养，但比较麻烦。下面是用小球藻培育和保存的经验。一、小球藻种的获得小球藻种可以从活体小球藻种液获得。 初次可以从渔友那取 得种 液，也可从淘宝商家购买，一般一套（小球藻、小球藻、营 养液） 100 元左右。二、小球藻的有关知识小球藻属于绿藻门，绿藻纲，绿球藻目，卵囊藻科，小球藻 属， 繁殖时，每个细胞形成 2、4、8或 16 个似亲孢子，似亲孢子 经母细胞 壁破裂释放。小球藻细胞内含有丰富的叶绿素， 光合作 用非常强，是 其他植物的几十倍。其含有丰富的蛋白质、维生素、 矿物质、食物

2、纤 维、核酸及叶绿素等，特别是含有令人注目的生 物活性物质糖蛋白、多 糖体以及高达 13%的核酸等物质。小球藻的直径只有 3? 8 微米，必须用 600 倍以上的显微镜才 能 看见，且形状呈圆球形，所以被称为小球藻（绿藻）。小球藻 可以生息 在淡海水中，它借助阳光、水和二氧化碳，以每隔 20 小时分裂出 4 个 细胞的旺盛繁殖能力，不停地将太阳能量转化生 成蕴涵多种营养成分的 藻体，并在增值中释放出大量的氧气。它 的光合能力高于其他植物 10 倍以上，繁殖能力比陆地上的高等植 物强 100 倍以上。小球藻生于热带、 温带淡水和海水中， 以细胞分裂进行无性 繁 殖，并可产生配子进行有性繁殖。适宜

3、温度为 20-23 C , 温度过低会影响小球藻的繁殖。 海水小球藻适宜盐度 20- 30%o 。适宜光照 5000-10000LX ，太弱会抑制光合作用，影响生长 和繁 殖。适宜水质为 pH=8 氮磷钾、二氧化碳含量高的海水。含量 太低会 抑制生长和繁殖。三、轮虫繁殖用活体小球藻的培育条件 温度与繁殖缸相近即可，我用室温 8-26 C。 盐度与繁殖缸一样， 我用 30%。，比重 1.02 。 合适的光线，我用自然光，必要时加照 明。合适的营养液，可购买或自己配制（方法后面介绍）四、准备一容器做培养缸， 可以是玻璃或透明塑料的， 容积 可 根据要繁殖的轮虫的数量确定，我是用食用油瓶改制培养缸，

4、 我繁殖轮 虫只用 5 升的就够了。准备加热棒、照明、气泵，根据 需要使用。收 到活体小球藻后，测出比重（一般较低， 1.01 左 右），然后据此比重 调整培养缸的海水比重， 加入合适的营养液， 初次培养用新配的海水 和小球藻种液。 然后将种液倒入， 放光亮 处繁殖。每天搅拌几次，也 可用气泵加气，不要加沙头，就像孵 化丰年虾一样。当培养缸海水颜色 从淡变深绿时 （一般 7 天左右， 生长太快的小球藻营养低） 就可以 使用了。 倒出一部分做藻种长 期保存（方法后面介绍） ，剩下的添加 海水继续培养 3 天左右（变 深绿色）五、循环培养。正常培养缸在室温 8-26 C 时可不加温，不 加 气，用

5、自然光， 节约能源。 培养完成后部分把小球藻连水抽出 喂养轮 虫， 每天不断添加海水 （可以用滤完轮虫的海水，我是用 高质量的沙 头过滤轮虫） ，一周后 只剩很少的小球藻了 （水变成 淡绿色），喂 养周期结束，然后调整好比重（一般加淡水），添 加营养液， 重新进 入培养循环。 一般 5-6 个循环小球藻就会遭到 其他浮游生物的污染， 就必须纯化藻种了（方法后面介绍），有 些人藻液被蓝藻（有毒）污 染，会造成轮虫和小丑鱼的死亡。六、时间节奏的调整。小球藻培养要掌握节奏 , 最好轮虫重 新培 养时达到最深颜色（培养一周左右） 。小球藻太多时可连水 抽出放低 温处 （冰箱冷藏室） 保存几十天没有问题

6、，还可以用下 面方法调整。 减慢小球藻增殖的方法：减少照明，降低温度。加 快小球藻增殖的方 法：增加供气，增加营养液，增加照明，提高 温度。 一般调整得好， 可以和公子小丑鱼产卵和孵化同步， 我的 公子小丑隔 15 天产卵一 次，小球藻培养 8 天喂 7 天，也是 15 天循环一次。七、小球藻种的保存 1。液体保存。用第一次培养好后倒出的一部分藻液 （深绿色） 做藻种， 用 水 族呼吸袋包装好后再用橡筋扎紧密封， 然后放入透气的塑料盒 中，再 放入冰箱的冷藏室保存即可。 使用时取出摇匀 （会有沉淀） 让温度慢 慢升到室温就可以当藻种用了。我最长保存过近一年， 还可以正常繁 殖。更长的时间就没有

7、试过了八、小球藻种的保存 2.干法保存。在加过营养液的海水中加入琼脂， 加热融化后冷却成果冻 状， 切成小块， 然后放入第一次培养好后倒出的一部分藻液（深 绿色） 中，几天后果冻表面会长有一层小球藻，呈绿色，取出后 放入透气的塑 料盒中， 再放入冰箱的冷藏室保存即可。 使用时取 出，让温度慢慢升 到室温就可以当藻种用了。 我最长保存过近一 年，还可以正常繁殖。 更长的时间就没有试过了。 每次从冰箱取 出一部分即可，使用和保存 比液体更方便。九、小球藻种的浓缩。1、小球藻在光照和营养盐缺乏的情况下会产生沉淀。在培养时，当营养盐较低的时候（生长条件正常，但小球藻不增殖， 即浓度不变 化），把小球藻

8、装入瓶内，放入冰箱冷藏室， 1-3 天 后就会沉淀， 倒 出上层清液， 即可取得浓缩小球藻液体。用前面 介绍的呼吸袋效果更 好， 小球藻的活力更高。 营养盐还可以用离 子交换树脂吸附来降低。2、用电泳或阳离子絮凝剂如明矾、聚合氯化铝、聚合硅酸硫酸铝等可以让小球藻沉淀，此方法会引入其他盐类。3、用蛋白分离器打出浓缩小球藻，此方法容易破坏小球藻活性，还会富集其他蛋白质。九、 营养液的配制。配方一 ( 适合保存藻种和精细培养 )A 液：NaNO3150g/LK2HPO44g/LMgSO47.5 g/LCaCl 3.6 g/LNa2CO3100g/LB 液：Citric acid0.6 g/500mL

9、Ferric ammonium citrate 0.6g/500mLEDTANa2 0.1g/500mLC 液：H3BO3MnCI2 ? 4H2OZnSO4- 7H2ONa2MoO4.2H2OCuSO4. 5 H2O0.286g/100mL0.186g/100mL0.022g/100mL0.039g/100mL0.008g/100mL0.005g/100mLCo(NO3)2.6 H2O使用时，每 1000 mL 海水添加 A 液 10 mL , B 液 5mL, C 液1mL 即可，即用即配，配后海水不能长期保存，否则营养会失效方二（适合一般使用）A: 三氯化铁 5 0毫克、氯化锰 1.8毫克

10、、硼酸 168毫克、乙二胺四乙酸四钠 2 2 5 毫克、 磷酸二氢钾 10 0 毫克、 和 硼酸钠 500毫克B : 氯化锌 0.5克、氯化钴 0.5克、钼酸铵 0.25克、 和硫酸铜 0.5 克将 AB 倒入 1000 毫升的海水中，再加入适量维生素 E1 和 E 12 即 可配成营养液。此营养液要即用即配，不能长期保存。配方三（适合临时添加使用）营养液母液配方 : 硝酸钠 50克、磷酸二氢钾 5 克、柠檬酸铁铵 0.5克。将以上营养盐加入 1000 毫升海水中即可。使用时每 1000 毫升海水加 母液 10 毫升。此配方容易使小球藻产生沉淀和 白化。配方四（适合有经验的使用）蛋分打出污水经加热冷却后使用或经过 1 微米的物理过滤 后使用。一般每 1000 毫升海水添加 10 毫升蛋分水（可根据蛋分 水的 浓度不同作适当的调整）。 此配方经济环保， 就是打气容易 产生气泡 和容易引入有害污染。十、小球藻生长慢、沉淀、发白和突然死亡 小球藻在温度过低或过高、 盐度过高、光照过低、 太高或太 低、营养盐太低、 二氧化碳太低时 生长和繁殖很慢甚至死亡。 只 要 保持合适的条件就能保证小球藻的正常生长。小球藻小部分沉淀是正常的， 而大量沉淀一般是密度太高或 温度 过低，还有就是不小心混入促沉淀的化合