植物组织培养试题与答案集合版

1、1植物组织培养练习题1.植物组织培养：指要人工控制的条件下，将植物体的任何部分，或器官、或组织、或细胞， 进行离体培养，使之发育形成完整植物体。所谓人工控制的条件，即营养条件和环境条件； 植物体的任何一部分是指根、茎、叶、花、果、实以及它们的组织切片和细胞。2.愈伤组织培养：将外植体接种在人工培养基上，由于植物生长调节剂的存在，而使其细胞 脱分化形成愈伤组织，然后通过再分化形成再生植株。3.外植体：植物组织培养中的各种接种材料，包括植物体的各种器官、组织、细胞和原生质 体等。4.脱分化：一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态，并形成未分化的愈伤组织的现象。5.接种：把经过表面灭菌后的外植体切碎

2、或分离出器官、组织、细胞，转放到无菌培养基上的 全部操作过程。6、褐变：外植体在培养过程中体内的多酚氧化酶被激活，使细胞里的酚类物质氧化成棕褐色的醍类 物质，这种致死性的褐化物不但向外扩散使培养基逐渐变成褐色，而且还会抑制其他酶的活性， 严重影响外植体的脱分化和器官分化，最后变褐而死亡的现象。二填空植物组织培养根据培养方式分为固体培养和液体培养。2、植物组织培养类型分为愈伤组织培养、器官培养、胚培养、细胞和原生质体培养。3、组织培养的主要应用领域有快速繁殖、脱毒、体细胞无性系变异和新品种培育、单倍体育种、种质保存、遗传转化、次生代谢物的生产等几个方面。4、茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为快

3、速繁殖和脱毒培养两种类型。5、一般组织培养的几道工序如下：培养器皿的清洗、培养基的配制、分装和高压灭菌；无菌操作一一材料 的表面灭菌和接种，培养；试管苗的驯化、移栽与初期管理。6、在进行植物组织培养室设计时，其设计应包括洗涤室、准备室、灭菌室、无菌操作室、培养室、细胞学 实验室、摄影室等分室，另加驯化室、温室和大棚。7、 培养基的成分主要包括无机营养、氨基酸、有机附加物、维生素、糖、琼脂、激素、活性炭、PH8、植物器官培养主要是指植物的根、苹、叶、花器和幼小果实的无菌培养。9、细胞全能性是指植物的每一个细胞都携带有一完整的基因组，并具有发育成完整植株的潜在能力。10、玻璃化现象是指试管苗的一种

4、生长失调症状，当植物材料进行离体繁殖时，有些培养物的嫩茎、叶片 往往会出现半透明状和水渍状，这种现象称为玻璃化。其苗称为玻璃化苗。11、液体培养是将培养物方在液体培养基中培养，又称为液体震荡培养21、简述培养基的配制、分装、包扎和灭菌。答：（1）确定培养基的配方。（2）贮备液（或母液）的配制与保存配一些浓溶液，用时稀释，这种浓溶液 叫贮备液或母液。按药品种类和性质分别配制，单项、单独保存或几种混合保存。一般应按配方顺序依次 称量，分别溶解在少量蒸熠水中，最后再依次加到一起，并定容到规定体积。贮备液配好后贴上标签，保 存在冰箱中。（3）配制培养基先在洁净的不锈钢锅理放入约750ml蒸熠水，加入所

5、需要的琼脂和糖，最好能在水浴锅理将琼脂溶化，如直接加热应不停地搅拌，防止在锅底烧焦或沸腾溢出。按需要加入相应量的母液。按需要加入相应量的植物激素和其它物质。加蒸熠水定容，充分混合好后，用1NKOM或NaOH调整PH值到所需值。（4）分装：按容器的大小和培养要求，趁热将适量培养基分注到三角瓶或试管中， 并即刻用封口膜封住瓶口。（5）灭菌：压力108kPa,温度121度，时间15 30分钟。2、什么叫接种？简述无菌操作注意事项。答：把经过表面灭菌后的外植体切碎或分离出器官、组织、细胞，转放到无菌培养基上的全部操作 过程叫接种。无菌操作注意事项好下：（1）进无菌室之前，操作人员需着经灭菌的白色工作服

6、，戴口罩。操作人员双手必顺进行灭菌。植物组织培养室的核心是无菌室（又叫接种室），怎样进行无菌室的灭菌 ？答：（1）常规灭菌法用70%酒精（或0.1%新洁尔灭）朝天花板、四周墙壁方向喷洒；待整个室喷洒完毕后依次用70%酒精将台子揩一遍；用湿拖把（70%酒精打湿），把地板拖一次；然后将无菌室的门关闭，开紫外灯，照射530分钟； 0.5-2小时后进入室内操作，待工作完毕后，将室门打开换气。以后每用一次灭菌一次。（2）无菌室发现霉斑（墙上）时的灭菌用70%酒精擦一遍（里里外外）；用新配70%酒精重复再擦一遍；甲醛蒸：方法是每立方米空间用2ml甲醛（福尔马林）加0.2克高镒酸钾的比例，蒸房间24小时（门

7、 窗密闭），然后开启房门，放走甲醛气体。常规灭菌法再灭菌一次。待用。4、什么叫污染？污染的原因有哪些？简述预防污染的措施？污染是指在组培过程中，由于真菌、细菌等微生物的浸染，在培养器内滋生大量的菌斑，使培养材料不能 正常生长和发育的现象。污染原因有以下几种：培养基及各种使用器具消毒不彻底；外植体灭菌时不彻底，在菌残存在细胞组织中；操作时人为因素带入；环境不清洁；超净工作区域污染。预防污染的措施：做好器具灭菌、外植体灭菌，做好无菌操作技术，搞好组培室环境条件，正确使用和维 护好超净工作台。5、简述培养物的玻璃化现象及其预防措施。 答：玻璃化是试管苗的一种生量失调症状，当植物材料进行离体繁殖时，有

8、些培养物的嫩茎、叶片往往会 出现半透明状和水渍状，这种现象称为玻璃化。其苗称为玻璃化苗。结果是瓶内的小苗过渡生长，但有用 的苗很少。各种不同植物，玻璃化的发生频率各不相同。大量的试验表明：玻璃幕化苗是在芽分化启动后 的生长过程中，由碳水化合物、氮代谢和水分状态等发生生理性异常所引起，它由多种因素影响和控制， 产3生玻璃化的主要原因有：激素浓度、温度、湿度、培养基的硬度、光照时间和培养成分。针对以上原因, 可以通过降低培养基的水位；减少培养基中含氮化合物的用量；增加光照强度；调整培养温度；降低培养 基中细胞分例素的用量；提高培养基的硬度等措施，来减少玻璃化现象的发生。6、简述外植体的褐变及其预防

9、措施。褐变是指在组培过程中，由培养材料向培养基中释放褐色物质，致使培养基逐渐变成褐色，培养材料也随 之慢慢变褐而死亡的现象。它的发生是由外植体中的酚类化合物与多酚氧化酶作用被氧化形成褐色的醍类 化合物，醍类化合物在酪氨酸酶的作用下，与外植体组织中的蛋白质发生聚合，进一步引起其他酶系数失 活，导致组织代谢紊乱，生长受阻，最终逐渐死亡。引起褐变的原因包括外植体本身、培养基及培养条件 等方面的影响。减轻褐化现象的途径有以下：外植体和培养材料进行20 40天的遮光培养或暗培养；选择适宜的培养基，调整激素用量；控制温度和光照，在不影响正常生长和分化的前提下，尽量降低温度，减少光照；冬春季节选择年龄适宜的

10、外植体材料进行组培，并加大接种数量；在培养基中加入抗氧化剂和其他抑制剂，如抗坏血酸、硫代硫酸钠、有机酸、半光氨酸及其盐酸盐、亚 硫酸氢钠、氨基酸等，可以有效地抑制褐化；加快继代传瓶的速度，添加活性炭等吸附剂（0.5% 2.5%）,是生产上常用的有效方法。四、请设计一个组织培养室，说明规模、面积、作用、目的、各室作用，并绘出平面图、站词解释：（每小题3 令、共 15分）1.初代培养基：2,脱分化：3.掖体培养：4.细胞金能性：5.再分化.二、填空（每皂 1分，共 40 5ML棺物组织培养过程中.最常用的培养基是.培养基的 pH因件机体的来源不同而异，常用_ 和 _调节 pH.大多戳模物的 ipH

11、要求调节在 范围内口2.可以通过_、_、_、_等措施预防褐变的发壬植物组织培养时，外植体可以是_、_、_、_.虬鹿用微尖嫁接技术进行脱毒培养无病心苗，.主要程序为-_-今9.茎尖微繁殖过程一般包括五个阶段,即_、10.笔尖分生组织培罪的目的主要是其茎尖一般取毫米*为了使脱毒效果更好.可 以将茎尖分生组织培养与一靖合起来.眦毒处理的试管帝，在用于生产之前.必缆谜行一。11.污梁的原因从病源黄上分析主一要有两大类、。三、判断正谡，并改错。（每小鹿 7外，共网分）1.一般将微量元素阡液均配制成如悟.在旭制培养-基时，使用 lOml/L-.细胞分裂素/生长素的比值较高时，有利 F愈陶组织的诱导。2.对

12、于金边虎尾等遗传学上的帙合体植物要-是如织培养繁殖的植株保持原有的园之价 值只能通过叶培养.3-植物生核调节物质使用不当时,材料也容.场指变.牛 K素有刺激莎酚说化磷活杵提高的 作用.4.利用茎尖分生组猊进行脱毒培养时，茎尖外植体大小与脱毒效果成正比。5.某些杭物通过愈伤组织培养可以缺,无病毒苗：6.无病毒植株不具有抗病毒的能力，而且在清除病商之后.体内营养利生理状况发生改变， 因而对其他病毒和病原体的役染更为敏感,因此在种植脱毒苗的一定要隔离种植.7.微繁不定芽的产生有两个途径是不定券不通过怠伤组织由外植体直接产生,二是外 植体诱导产生愈柯组4织,由愈伤组织上产生不定芽。后途校相对较为忧越.

13、因为遮过敏伤 组织不会山现一些美变.细胞的全能性，可以通过分裂细胞的脱分化和再分化过程得以体现：9-培养基中的铁盐，常用不易分解的占肢四匕酸铁整合物，以防在 pH较高时铁被郭化 为不溶的机氧化铁。四、简答题 M每小题 5分.共 15分）1.椅物牛氏物质如制调控外柏-体形忐发生？A为什么要对脱再苗进行多次检定？3.茎尖培弄桐据培养的目的和取材大小可分为哪凡神类型？务有何特点？55.器茁胚唇6.活性炭、豚择性*7.IDtM-SQOObtv 16h、2&2Y?1,4-DNAA、IBA. IAA无菌外植伸的建立、芽的增苗、中间繁殖体的增殖、诱导生根、试管苗脱帝.。一 1热处理、病禅橙定细菌、真

14、曹三判断显误.并改错。旬小题 2分，共小分）1.x 般将微量元素母嘏均配制成借质隹配制培养基时.便用量为 10ml/Ln2.x fill JU分裂素/生长索的比值较高时,得利于怠伤组织芽的偶导。3. x 时于金边虎尾等遗传学上的嵌合体梢物 T要是组织培养繁茹的植株保持.嫩有的园艺 价值，只能通过茎尖和倒芽培养。4. *植物生&调节物质使用不当时,材料也容场揭变，细胞分裂有刺激多疏轼化酿活性提高 的作用.5.言利用茎尖分生组织进行脱毒培养时茎尖外杭体太小与脱毒效果成反也机某些植物通过愈伽 fl 织培养可以获得无病毒此7M 无病市枇株不具有抗病就的能力,而 H在清除病市之后，体内营养利生理

15、状况发生改变， 因而对 JE 他病律和病原体的侵染史为敏感.因此在种植脱市苗的一走要隔高种植。微繁不定芽的产生有两个途楚，一是不定芽不谒过愈伤泉织由外植体直接产生，二是外 枇体谢导产生愈伤组飘，由敏伤组飘上产生不定芽。前一您径相对较为忧越因为 JIM 愈俳 组甄会出现一些突变u 细胞的全能性，W以讪过成熟细胞的脱分化和再分化过程得以体现，,摧 = U 密归 此口m w培养基中俩铁盐，常用不麻分解的&虺 TI乙酸铢螯合物，以防在 pH 较高时铁被/ 化为不港的瓠氧化四、简答底（每小题 5分共 15分）1. 答案要点：在植物组狭培养过程中.常用的前物激素肖牛此素堑利细胞分裂素类，在高 生长

16、素（如使用做&D）时能促进外植体的臆分化耕长素/细胞分素比值莪高此促进不定机的发生，比值蛟低时的谜不定芽的发牛。2. 笞案要点：衅尖分生组期养娴的试管血经第一次扩制要对试管茁进行病就 测.以确定材料的脱浦情况 B因为剥取茎尖的大小直接关系到脱毒效果，一船剥取的茎尖愈 小成苗率敏低，但脱宙率高，而培罪的茎尖愈大，成菌率愈高.但脱毒率低。脱毒苗中病毒有可能再次出现，病毒的诉现 M 能有三方面的慎因，一是脱毒不彻底，脱森后 鼠管曲血清检刈没有病声艮映，是因为植株体内病祚含量非常少，以致检测不到，试管菌多 次堪代后，病毒逐渐枳骚从而再次出现病而修染；二是一些弱系病毒或一些利时没有条件 椅测到的

17、病毒，在强系病毒脱抻后快戒麝地造成您航三是由于操作及其它 些原因造成的 摘毒印烟知1 答案要品茎尖培并根据培葬目的和取材大小可分为茎尖分生组织培养利普通茎尖培器 两种类型:茎尖分牛组织培养屯要是指对茎尖长度不塑过 DJ mm.最小只有几十微米的茎 尖进行培养， 这种培卷可获得无病毒梢株.但这样小的斐点分离实际上是很困难的，而且成 茁时间也粮长需要，年乃至更长的时间，因此在茎尖分1-：组织培养中往往采用 M 1-2 个叶原基的生 K榷法行培养，曹通茎尖培葬是指对儿琨米乃至儿卜毫米瓦的茎尖、芽尖及刨 芽帼第这类茎尖的培养技术简学，邮脸，茎尖容易.端成苗所彝灿饷瘟能 加快,S3渡.五、阿（匡小规 1

18、。分，共 1。分）B.9.10.11.6五、总述题（每小题分，共10分） 答题要点：r保持试钾茁的水分平衡2-要选择合适的基质3.要防化杂曲滋生：4.暖注意光、温的管理斜褐变现象褐金现戮是由于型立外裱体无系时.切口Nt近 鸵坦I施堡愣含，ii稣了场类化合物判多酚氧化碗的分 隔状恣， 1吏辑类化合初和肇做氧化酶相jRAtt类化合 物氧化形庶崖类物成并3步与Si白质蜩合，从而引 起坦坎ftflH活动*善L导致组炽生长停薄.最些 亶老死 亡彩响裾娈的因末校务-这些固*包括品神基因型、 外坦怵年髓、部位以及大小和取柄时司、外值t本消盅方 式-培美墨配方-光照强崖睦柯姐漓迎程中相变的推 瑜有：透破幼龄*

19、植体抗萄剂.吸明剂等一、名词解释每圈4分.共知分，1、植物加织培芥：栖物的离体器官，徊凯或:细咆在人了制括的蜡并栖上退n无幽培养，冲在.七工空制的昭 嶙釜件I。使状发肯成完啖销株的回学授术”险称粗理私2 .脱分化：拍失去分裂能方的细咆回H到洛1.性状志井迎疗分裂，昭成无分化的细血即微&组琪的视姓”3,甲梏体柏样，只含有配（休弗色体徊数的植悚-4 .指示植物：对病毒反应歌感,掘状明盘，可用检洌脱毒苗是否带毒的一泱植物”3,拓状体：印细胞在一定条件卜所透寸形成的胚密为体细胞年E.即加肱体.71 .卜,列不 W于牛一 K 素类的植物激案,是MlOA Kt； B lAA： CXAA*D ZT2

20、影响用养基瓶固程度因盎占 ABCD “A晾脂的质好娇；B 高床灭菌的时间；C高氏犬蔺的温度；D 培券甚的 PH3.第一所旋出植物细胞且有全能性的现论概念的科学家是.史A Mnrel； E 4aberlEitid： C Schleideh； I） Wlite1 ,卜列不网于久云元布的盐是C*A AO,： B KNO,； C ZnSO：. 7H.0： D MgSO . 7H.05、F列实验中可能独徊申倍件植株的是皿_ oA小麦的茎尖培我 H否茄花我培昨 t C k股肚乳培系!）JJK花粉培养三、填空题每史 1 分，共 2。分）1、植物组很培养按蝎养向蒙分为殖椎培养.凿宫堵并-组炽或原伪组纠咯非、坦

21、驰蛭_等儿种犬2、 1902学京 HaberIwdt 第一次提以植物细逢橱 1 一的押论概惫：施 43午时 H 项提出植物如恤“待褴”学乩 并出版丁 W 糟物沮织培养于卅麟，从而使植物组织唇养成为，门新兴的学稗-3、缅胞全能性是卅饥物的曰个细咆都 U J原枇物的部遗佳信息璀发肖成亢些个抹的都在的能力.4、G-BA/ NAA 的高惬决定了外粗体的发:肯方向，比俏低时促通 .的牛长，/时 脱分化_占一上导地位；比值高促避 萤 的牛代，这时也也占卞导地位”5、 企旭泓吉菲中，不耐热的物质用 过滤火菌法无蔺，向培护基富用混热灭菌法灭 iih6、 组织培春中有二人木易料决的问题.它们分别曜 污染 . 幅

22、化 、岐腐化.T、花药悄芥是丁官培 4 往粉培拎届于细胞 培-况伯杵的培养目的一样，都是要涛却花粉细胞 度作成单偌休细胞，琅后发忏.成平俏体植遂*PR判断幽【对的画“ J ” ；惜地画 *舟题 1 分，共 S 分）1.2,4D可 fflO. liuol/L的 HC】助溶，再加蒸锵水定容“（X）2.他屹细胞和绛职比成年细胞和绍织诱导愈伤组德容协33.在皓的培养基成分中.职泣,孙_。属了微拍元素*（X4.一般来说，光照强度校强，幼苗容易徒长.而光照强度轮弱幼苗牛 K的粗壮.（X）5.由性细胞役育而成的wn状体，而由体细胞旺育而成的旌叫做今（0五、简答映（每族 5 分，共 15分）】，培养基般包括唧

23、些基木成出？答，培养基的成册有；匚、L、无机营我包括：柯。）、做 6 知耻即 NL 即K）、州外镁叫小硫、和 g大量元氟 铁（M.铜 LCu）、捽 WnL 能Mn）,钳（Me）.潮（R）, W ）,钻（Co）、氟（CI）,钠（心等很玷元 素2、有机昔养：虱基酸、犬然提啾物、推牛慎、心3、 位物生长调节物踞 植物包括牛长奈炎和细胞分裂紊那4、 其他：包括水、活性熨、琼脂等.?、为什么幼弥比成熟胚培养娈求的培养基成分重杂？答：因为幼胚是异养卵，处于这一时期的幼小腥完全依赖利吸收周隔组祝的有肌营养物质.而成熟膝则为口养虱这-时期胚能吸收培养基中的无机盐和/,经过 n 口代谢作用合成.听必质的物质.所以在避行坯培养时,8幼胚比成熟职培养安求的墙养基成分夏杂*3、培养卷、培养器间和植物材料通常备样灭附？答：培养基 加采用制热火课 I.如采培芥基中的有业成分温昌分解，则可一来用过德火蔺.培芥 HU nJ 采 用迎热火隔或 F 热火菌“植物材料- -般宗用药剂没泡夫调，H体歇村西 F：1、 外植体的预处理，利栖物组鼻 U!H