4血液组成和理化特性(精)

1、池国家高等职业教育畜牧兽医专业教学资源库实训 4血液组成和理化特性血液组成及理化特性实验目的1.了解血液的组成，区别血浆、血清和纤维蛋白。2.了解红细胞比容、血红蛋白测定原理和方法。3.掌握红细胞渗透脆性的测定方法。实验原理1.血液由血浆和血细胞组成。抗凝血液经静置或离心，可分离为血浆和血细 胞两部分。血液自然凝固后，血块紧缩析出血清。血液在凝固过程中进行搅动，则可分离出其中的纤维蛋白。将抗凝血注入有刻度的特制玻璃管中，经离心沉淀, 红细胞下沉互相压紧而不改变其正常的形态。根据玻璃管刻度读数，即可得红细 胞在全血中所占的容积百分比.2.测定血红蛋白有多种方法，但常用沙利氏比 色法。其原理是将红

2、细胞溶解而游离出血红蛋白， 与稀盐酸作用形成不易变色的棕色高铁血红蛋白。 用蒸馏水稀释后与标准比色板比色，间接测出血红 蛋白含量。其含量通常以每100ml血液中所含血红 蛋白的克数表示。3.红细胞在等渗的血浆中，能保持形态不变。若置于高渗溶液中，则红细胞逐渐失去水分而皱缩；反之，若置于低渗镕液中，则水分逐渐进入红细胞， 使其膨大变形，最后破裂溶解而形成溶血。红细胞脆性试验就是测定其对低于0.9%NaCl溶液的耐受能力。耐受力高的 红细胞不易破裂，即脆性低，耐受力低的红细胞易破裂，即脆性高。能使部分红 细胞开始溶解的NaCl溶液浓度，称为红细胞的最图 1 红细胞容积示意图小抵抗，其标志是上层溶液

3、开始呈淡红色， 而大部分红细胞下沉。能使全部红细胞开始完全溶解的NaCl溶液浓度，称为红细胞的全血4?血針池国家高等职业教育畜牧兽医专业教学资源库最大抵抗，其标志是溶液呈均匀红色，管底无红细胞沉淀。实验器材抗凝血液，离心管，离心机，试管架，试管，天平，血红蛋白计，0.1N盐酸，1%氯化钠，蒸馏水。方法步骤一、血液的组成及红细胞比容测定1.取抗凝血5ml置于刻度离心管中，用离心机以3000转/min的速度离心2030mi n。取出观察，管内自上而下分为三层：血浆、白细胞和血小板、红细 胞。记录红细胞容积，再离心5mi n,至两次读数相同为止。计算此时红细胞容 积所占全血容积的百分比即为此份血样的

4、红细胞比容（图1）。2.取新鲜血液3050ml放在小烧杯中，用带有开叉橡皮管的玻璃棒搅动几 分钟后，可见橡皮管的开叉上缠绕很多的丝状物，即纤维蛋白。用水冲洗后，观 察其颜色和韧性。除去纤维蛋白的血液即去纤维蛋白血液，观察其是否发生凝固3.在离心管中加入去纤维蛋白血液5ml， 依1法离心后，上层为血清，下层为血细胞。4.取一试管，采新鲜血液5ml，静止后逐渐凝 固，血块紧缩挤出的液体为血清。注意比较以上各 管中血浆和血清的颜色及透明度。二、血红蛋白含量测定1测定前先检查血红蛋白计的吸血管和测定管 是否清洁，如不清洁要洗涤干净后方可使用。2.将0.1mol/L盐酸加入测定管中至刻度2或10%处。3

5、.血样摇匀后，用血红蛋白吸管在中间处吸血至刻度20卩l处。用干棉球擦净吸管尖端四周血液，立即将血液轻轻吹入测定管 盐酸中，并反复吸吹上清液几次，使吸管内血液全部洗入测定管中。吸吹时注意 避免起泡，使血液与盐酸混合后静置l0min。池国家高等职业教育畜牧兽医专业教学资源库4向测定管中逐滴加入蒸馏水，每次加水后都要摇匀，并插入比色箱中进 行比色。直至测定管中颜色变淡到与标准比色板相图 2 血红蛋白计f t1.比色箱 2.吸血管 3.测定管同为止。5取出测定管，读出其液体凹面的刻度。该管两边刻度，一边表示克数， 如刻度15表示100ml血液中含15g血红蛋白，另一边表示百分率，其与克数之 间的关系随

6、血红蛋白计的型号而异。国产沙利氏型血红蛋白计100%相当于14.5g(图2)。三、红细胞脆性测定1.取小试管10支，按110编号后依表加入1%NaCI和蒸馏水，配制成不 同浓度的NaCI溶液。表1不同浓度NaCI溶液的配制试管号123456789101%NaCI(mI)1.401.301.201.101.000.900.800.700.600.50蒸馏水(mI)0.600.700.800.901.001.101.201.301.401.50NaCI溶液(%0.700.650.600.550.500.450.400.350.300.252.向每支试管内注入大小相等的一滴血液，然后用拇指堵住管口，

7、慢慢倒 置12次，使血液与NaCI溶液混合均匀。3.在室温下静置1h后，依上述说明判定开始部分溶血和开始完全溶血的NaCI溶液浓度。此即红细胞的最小抵抗和最大抵抗。注意事项1.离心前先称重平衡，开机时要逐渐加速，关机时应逐渐减速，以免损坏 试管和离心机。池国家高等职业教育畜牧兽医专业教学资源库2.离心后，红细胞表面为一斜面，读数取斜面的平均值，或静止片刻待表 面平坦后读数3.为防止溶血和水分蒸发，测定应在采血后2h内完成。4.血样与盐酸作用的时间不得少于10min,否则血红蛋白不能完全转变成 咼铁血红蛋白，使结果偏低。5.加蒸馏水时，开始可以多加几滴，以后不可过快，以防稀释过度。6.比色最好在自然光下（避免直射阳光），而不宜在黄