浅谈疟原虫镜检及鉴定方法

1、浅谈疟原虫镜检及鉴定方法韩秀丽(河南省新乡市传染病医院453000)【摘要】疟疾是我国五大寄牛虫病之一，也是世界六大热带病之一，主要分 布在热带、亚热带各国。我国经过积极开展疟疾防治工作，现基木己无当地病例， 但近年来四种疟疾均有输入病例。2013年3月、2014年7月在我院发热门诊分 别检出一例输入性恶性疟原虫。通过镜检能够及时发现疟原虫。木文简要讲述了 薄血膜和厚血膜的制作方法，并陈述了疟原虫类型及疟原虫临床分期，最后疟原 虫镜检及鉴定需要注意的事项，旨在提高疟原虫镜检及鉴定水平。【关键词】疟原虫 镜检 鉴定方法【中图分类号】r446【文献标识码】a【文章编号】2095-1752 (201

2、4) 21-0258-02我国积极开展疟疾防治工作，虽然取得了很好的成果，但是由于我国的流动 人口较多，随着出国务工人员的增多，使得许多地方仍存在疟疾病例。诊断疟疾 和早期治疗疟疾的意义重大，现结合工作经验简述疟原虫镜检检测及鉴定的方法。 详细内容如下：一、血片的制作方法将载玻片从右向左分成6等分，在第1格和第2格贴上编号和标签，在第3 格的正中央涂圆形厚血膜，第4格前缘至第6格的中部涂舌状薄血膜。血片如果 作为标木，则需要将薄血膜和厚血膜涂在同张玻片上。发热病人和门诊的血片每 片一个人，涂一个薄血膜和两个厚血膜，避免血膜脱落对检查结果造成影响2。1、厚血膜的制作方法用推片的一角刮取约4-5&

3、amp;mu;l的血量，确保载玻片和血滴充分接触，由里 到外一个方法旋转多圈，最后回到中心，涂成直径0.8-lcm的圆形厚血膜。厚血 厚血膜不能出现划痕，而且薄厚均匀。因为，厚血膜太厚极易脱落，厚血膜太薄 则不能达到检查要求3。2、薄血膜的制作方法用推片的一端边缘的中点刮取约1-1.5μl的血量，确保载玻片和血滴充分 接触，形成25-30°的夹角，待血液向两侧扩展到2厘米左右吋，均匀而迅速 地轻轻向左推出舌状的薄血膜，需要注意的是，推制的速度不能太快，也不能太 慢，要均匀适中。3、注意的爭项血片制作吋，一定要用清洁的载玻片，手持载玻片的两侧，避免沾上油污, 否则将

4、会影响镜检的结果。固定薄血膜时不要将甲醇触碰到厚血膜。干燥厚血膜 时坚决不能加热，否则原虫会变形，在很大程度上影响镜检结果。冲洗染液时，用盆接满水后漂洗，切勿水龙头下冲洗，以免冲走厚血膜，不要将 染液倒掉后再漂洗，以免染料渣沉着在血膜上。4、制作血片的质量要求吉氏染色后，薄血膜要平整，无皱折和空泡，没有划痕，厚血膜不能有脱落， 呈现的颜色是紫兰色。二、正确的采血时间，提高镜检鉴定质量在人体内寄生的疟原虫总共有四种，恶性疟和间日疟可以混合感染，卵形疟 和三日疟比较少见。恶性疟和间日疟可以分为间歇期、出汗期、发热期、发冷期。 疟原虫在发热期和发冷期比较容易检出。发热期的疟原虫主要是小滋养体，这个

5、时期的原虫刚刚分裂不久，有很多虫体，引起极易检出。发冷期的疟原虫基本都 是环状体，极易检出。在间歇期进行血检有利于鉴定和分类疟原虫，这个期间的虫子数量虽然少, 但是虫子的体积较大，极易识别，因此有利于虫子种类的鉴别。临床认为恶性疟在间歇期不宜进行血检，主要原因是在这个时期，很多原虫 进到内脏毛细血管，而外周血虫体比较少，这个吋候尚未出现配子体，因此血检 的结果可能是阴性。三、镜检分析疟原虫镜检的顺序是先厚血膜后薄血膜厚血膜的红细胞重叠，血量较多，而且干燥比较慢，导致疟原虫皱缩，虫体 变形，相对薄血膜来说，虫体和虫种的鉴别难度较大，但是由于原虫相对集中, 因此极易发现。鉴别薄血膜的要素是疟色素，

6、疟色素能够区分其他生物和疟原虫 的不同。薄血膜的原虫形态较清晰,而口结构完整，能够辨别原虫的形态特征和种类, 但是虫数较少，极易出现漏检现象，因此需要注意的问题有很多。首先要查看寄 生的红细胞的具体变化。恶性疟在发育期红细胞中寄存，红细胞的体积不会变大, 但是滋养体期开始岀现红色的、粗人的茂氏小点。间日疟人多在网织红细胞中寄 存，导致红细胞的体积变大，滋养体期开始出现红色的、细微的薛氏小点。其次 要查看环状体的数目和大小。恶性疟环状体比较小，有一个或两者或两个以上的 核，体积大概是红细胞直径的五分之一，虫体一般在红细胞的边缘寄存，呈现一 种鸟飞状。间日疟的环状体比较大，有一个或者两个核，体积大

7、概是红细胞直径 的三分之一。接着要查看配子体的形态和疟色素的着色情况和分布情况。恶性疟 配子体呈现的是腊肠形，疟色素在核周围分布，或疏松或密布，呈现棕褐色或者 是黑褐色。间日疟配子体体积较大，呈现的是圆形，疟色素的分布较均匀，呈现 的黄绿色或者黄褐色。最后要查看相同血片上各期虫体的具体分布。恶性疟在的 配子体和环状体岀现在外周血片，不容易看到裂殖体和滋养体。间日疟各期形态 出现在外周血片。假如看见裂殖体和滋养体出现在外周血片，则可以判定为间日 疟。四、讨论病原学诊断和传统的镜检都是诊断疟疾的重要方法，优点的价格低廉，并且 对设备没有很高的要求，便于在基层展开。及吋、准确的诊断有利于治疗和预防 疟疾，降低疟疾的发病率，提高国民的身体素质。参考文献1 王伟明，金小林，曹俊，杨国静，周华云,李菊林，顾亚萍,梁幼生，高琪江苏省疟疾流行地理信息系统数据库的建立j中国热带医学” 2014,1(30):214-215.2 刘英杰，李莹，潘艳艳,朱晓彤，刘军，单风平,曹雅明.不同毒力疟原虫感染早 期根治性治疗对免疫记忆形成影响的研究j 微生物学杂志,2013,&10):321321.3 张小萍.ict恶性疟/间日疟免疫层析分离测试法对卵形疟的检测j