植物组织培养设备及其使用

1、第七节第七节 园林植物的组织培养育苗园林植物的组织培养育苗 概述概述1 繁殖速度快繁殖速度快2 繁殖脱毒苗繁殖脱毒苗3 不受季节限制不受季节限制组织培养繁殖的基本原理组织培养繁殖的基本原理 细胞全能性细胞全能性 植物体中每个完整细胞核的细胞，都具有植物体中每个完整细胞核的细胞，都具有该植物的全部遗传信息和产生新的完整植该植物的全部遗传信息和产生新的完整植株的能力。株的能力。 体细胞（植株的一部分）体细胞（植株的一部分） 完整植株完整植株组培条件组培条件 组培室的建立组培室的建立准备室接种室培养室植物组织培养设备植物组织培养设备1.灭菌设备灭菌设备：高压蒸气灭菌锅用于培养基、蒸馏水和接种器械的灭

2、菌消毒。工作原理：工作原理：在密闭的蒸锅内，01MPa的压力下，锅内温度达121。在此蒸气温度下，可以很快杀死各种细菌及其高度耐热的芽孢。使用方法：使用方法：首先检查灭菌锅内是否有水，而且水刚好淹住加热器，然后放入灭菌材料，对称拧紧灭菌锅上的螺丝，关闭放气阀通电。待压力上升到005MPa时，打开放气阀，放出空气，待压力表指针归零后，再关闭放气阀。三次放气后，关阀再通电，压力表上升达01-015Mpa时，维持20min后，断电，待压力降至零时，打开入入气阀，取出灭菌材料。注意事项：注意事项：对高压灭菌后不变质的物品，如无菌水、栽培介质、接种用具，可以延长灭菌时间或提高压力。而培养基要严格遵守保压

3、时间，既要保压彻底，又要防止培养基中的成分变质或效力降低，不能随意延长时间；对于一些布制品，如实验服、口罩等也可用高压灭菌。洗净晾干后用耐高压塑料袋装好，高压灭菌20-30min；高压灭菌前后的培养基，其pH值下降0.2-0.3单位。因此，调PH值时，可适当调高0.0.3个单位。2.接种设备：接种设备：无菌超净工作台用于培养材料的消毒及接种。使用前，将超净工作台上面的排风和杀菌按钮开启，灭菌15min后，关闭杀菌按钮，打开照明按钮，即可在上面进行操作。电炉电炉推车推车灭菌器灭菌器接种器具接种器具酒精灯酒精灯培养瓶培养瓶封口膜封口膜3.培养设备培养设备带日光灯的培养架，主要用于接种后材料的培养。

4、恒温箱：又称培养箱，可用于原生质体和酶制剂的保温，也可用于组织培养材料的保存及暗培养。摇床与转床：在液体培养基中，可改善培养基中的培养材料的通气状况。如从疏松的愈伤组织中获得单个细胞。但注意要设定适合的温度及转速。4.驯化设备驯化设备温室温室 防虫网室防虫网室5、其它辅助设备、其它辅助设备培养基灌装机及洗瓶机培养基灌装机及洗瓶机 除湿机除湿机：使培养室的湿度保持在定的范围内。空调机空调机：用于接种室和培养室温度的控制。烘箱烘箱：用于干燥洗净后的玻璃器皿，还可用80的温度烘干组织培养植物材料以测定干物质。冰箱冰箱：用于在常温下易变性或失效的试剂和母液的储藏，细胞组织和试验材料的冷冻保藏，以及某些

5、材料的预处理。纯水机与蒸馏水纯水机与蒸馏水发生器：发生器：是实验室必备的仪器。天平和显微镜天平和显微镜：天平包括分析天平，电子天平，药物天平等，用于制备母液时培养基组成成分的称取。如一些需要量少的激素和微生素类物质，天平的精确度要到0.0001g，这就要求精确度更高的分析天平。显微镜包括解剖镜，生物显微镜，倒置显微镜等。如茎尖的分离则需要解借助解剖镜。酸度计酸度计：用于校正培养基和酶制剂的PH。培养基成分培养基成分 基本组成基本组成 无机元素无机元素 1 大量元素：大量元素：N P K C a Mg S 2 微量元素微量元素: Fe B Zn Cu Mo Cl 有机成分有机成分 维生素维生素

6、肌醇肌醇 氨基酸氨基酸 糖糖 蔗糖蔗糖 葡萄糖葡萄糖 果糖果糖 琼脂（琼脂（0.50.8%） 琼脂粉琼脂粉 琼脂条琼脂条 植物生长调节剂植物生长调节剂 细胞分裂素类细胞分裂素类 KT 6-BA ZT 生长素类生长素类 IAA IBA NAA 2,4-D 赤霉素类赤霉素类 GA3 天然添加物天然添加物 椰子汁椰子汁 酵母提取液酵母提取液 土豆汁土豆汁 麦芽提取物等麦芽提取物等 水水 蒸馏水蒸馏水 纯净水纯净水 自来水自来水 pH值（值（5.65.8） 1mol/L HCl 或或 NaOH 其它其它 吸附剂（活性炭）吸附剂（活性炭） 抗氧化剂（抗氧化剂（Vc 柠檬酸等）柠檬酸等）培养基种类培养基种

7、类 MS培养基培养基 Miler培养基培养基 Nitsch培养基培养基 H培养基培养基 White培养基培养基 N6培养基培养基培养条件培养条件 温度：温度：25左右左右 光照：光照：3000lx10000lx 时间：时间：1216h操作技术操作技术组培苗工厂化生产的组培苗工厂化生产的经营与管理经营与管理 一、经营思想一、经营思想 经营思想是从事经营活动、解决经营问题经营思想是从事经营活动、解决经营问题的指导思想，它是随着生产力发展而发展的指导思想，它是随着生产力发展而发展的。在经营思想指导下形成经营管理理论，的。在经营思想指导下形成经营管理理论，经营管理理论用于指导生产经营实践，不经营管理理

8、论用于指导生产经营实践，不断促进生产力发展。断促进生产力发展。二、市场营销二、市场营销 （一）、经营策略（一）、经营策略 （二）、市场预测（二）、市场预测 （三）、产品的营销（三）、产品的营销 1 1市场需求的预测市场需求的预测 2 2市场占有率的预测市场占有率的预测 生产规模与生产计划生产规模与生产计划1 1、试管苗增殖率的估算、试管苗增殖率的估算增殖率：是指植物快速繁殖中间繁殖体的繁殖率。增殖率：是指植物快速繁殖中间繁殖体的繁殖率。估算试管苗的繁殖量，是以苗、芽或未生根嫩茎为估算试管苗的繁殖量，是以苗、芽或未生根嫩茎为单位，一般以苗或瓶为计算单位。单位，一般以苗或瓶为计算单位。年生产量（年

9、生产量（Y Y）决定于每瓶苗数（决定于每瓶苗数（mm）、）、每周期增殖每周期增殖倍数（倍数（X X）和年增殖周期数（和年增殖周期数（n n），），其公式为：其公式为：Y=Y=mXmXn n2 2、生产计划的制定、生产计划的制定制定的要点：制定的要点：1 1）对各种植物的增殖率应做出切合实际的估算；）对各种植物的增殖率应做出切合实际的估算；2 2）要有植物组织培养信不过各的技术储备；）要有植物组织培养信不过各的技术储备；3 3）熟悉各种组培苗的定植时间和生长环节；）熟悉各种组培苗的定植时间和生长环节；4 4）要掌握组培苗可能产生的后期效应。）要掌握组培苗可能产生的后期效应。全年生产量全年生产量=

10、全年出瓶苗数全年出瓶苗数炼苗成活率炼苗成活率根据植物组织培养的技术路线根据植物组织培养的技术路线，拟定工艺拟定工艺流程流程：如：茎尖如：茎尖表面消毒表面消毒接种诱导接种诱导培养基培养基茎尖生长茎尖生长病毒检测鉴定病毒检测鉴定培培养无根小植株养无根小植株培养生根培养生根完整小植株完整小植株炼苗炼苗20-2520-25天天移栽成活。移栽成活。 3 3、工厂化生产的工艺流程、工厂化生产的工艺流程成本核算与效益分析成本核算与效益分析一、成本核算的方法一、成本核算的方法二、效益分析二、效益分析1成本核算成本核算2产销对路产销对路3规模生产，提高利润规模生产，提高利润 降低成本提高效益的措施降低成本提高效

11、益的措施1.1.掌握熟练的技术技能，制定有效的工艺流程，提高生产效率掌握熟练的技术技能，制定有效的工艺流程，提高生产效率2.2.减少设备投资，延长使用寿命减少设备投资，延长使用寿命3.3.降低器皿消耗，使用廉价的代用品降低器皿消耗，使用廉价的代用品4.4.节约水电开支节约水电开支5.5.降低污染率，提高成品率降低污染率，提高成品率6.6.提高繁殖系数和移栽成活率提高繁殖系数和移栽成活率7.7.发展多种经营，开展横向联合发展多种经营，开展横向联合8.8.商品化生产的经营管理商品化生产的经营管理 1 1、商业化经营管理思想、商业化经营管理思想 2 2、市场营销经营策略、市场营销经营策略 3 3、市场预测：、市场预测：(1)(1)市场需求预测；市场需求预测；(2)(2)市场占有率预市场占有率预测。测。 4 4、试管苗增殖率、试管苗增殖率 年生产量（年生产量（Y Y）决定于每瓶苗数（决定于每瓶苗数（m m）、）、每周期增殖倍数每周期增殖倍数（X X）和年增殖周期数（和年增殖周期数（n n），），其公式为：其公式为：Y=Y