ok第四章-光谱分析技术与相关仪器-分光光度计

1、2021/8/141第四章第四章 光谱分析技术与相关仪器光谱分析技术与相关仪器光谱分析（光谱分析（Spectral Analysis）：指所有对物质）：指所有对物质发射辐射能的能谱分析或对辐射能与物质相互作发射辐射能的能谱分析或对辐射能与物质相互作用引起的能谱改变的分析。用引起的能谱改变的分析。光谱分析法：基于物质发射的电磁辐射及电磁辐光谱分析法：基于物质发射的电磁辐射及电磁辐射与物质的相互作用而建立起来的分析方法。射与物质的相互作用而建立起来的分析方法。2021/8/142常用光谱分析仪器常用光谱分析仪器紫外紫外- -可见分光光度计可见分光光度计原子吸收分光光度计原子吸收分光光度计红外光谱仪

2、红外光谱仪原子发射光谱仪原子发射光谱仪荧光分析仪荧光分析仪原子荧光分析仪等原子荧光分析仪等2021/8/143第一节第一节 光谱分析技术基础理论与分类光谱分析技术基础理论与分类吸收光谱（吸收光谱（absorption spectrum）即物质对不同波长光）即物质对不同波长光的吸收程度不同而产生的光谱。的吸收程度不同而产生的光谱。 每一种物质都有其特定每一种物质都有其特定的吸收光谱，可以根据物质的吸收光谱来分析物质的结的吸收光谱，可以根据物质的吸收光谱来分析物质的结构和含量，这就是吸收光谱分析的基础。构和含量，这就是吸收光谱分析的基础。发射光谱（发射光谱（emission spectra）是由物

3、质分子或原子吸收）是由物质分子或原子吸收了外来的能量后发生分子或原子间的能级跃迁而产生的了外来的能量后发生分子或原子间的能级跃迁而产生的光谱。通过测定物质的发射光谱来分析物质的结构和含光谱。通过测定物质的发射光谱来分析物质的结构和含量的方法称为发射光谱分析法。量的方法称为发射光谱分析法。2021/8/144一、光谱分析技术的基础理论一、光谱分析技术的基础理论（一）（一） 光的特征光的特征光是电磁波谱光是电磁波谱hchE表表1 电磁波谱电磁波谱2021/8/145 射射线线x射射线线紫紫外外光光红红外外光光微微波波无无线线电电波波10-2 nm 10 nm 102 nm 104 nm 0.1 c

4、m 10cm 103 cm 105 cm2021/8/146（二）物质的吸收光谱（二）物质的吸收光谱在连续光谱中某些波长的光被物质吸收后产生的光谱在连续光谱中某些波长的光被物质吸收后产生的光谱被称作吸收光谱。吸收光谱取决于物质的结构，包括被称作吸收光谱。吸收光谱取决于物质的结构，包括分子吸收光谱和原子吸收光谱。分子吸收光谱和原子吸收光谱。物质分子内部有三种运动方式，即电子相对于原子核的物质分子内部有三种运动方式，即电子相对于原子核的运动、分子内原子在其平衡位置附近的振动和分子本身运动、分子内原子在其平衡位置附近的振动和分子本身绕其中心的转动。绕其中心的转动。分子能级：电子能级分子能级：电子能级

5、Ee、振动能级、振动能级Ev和转动能级和转动能级Er。分子光谱：分子光谱：电子光谱，在紫外可见光区，电子光谱，在紫外可见光区，Ee、Ev、Er振动光谱，在红外区，振动光谱，在红外区，Ev、Er改变转动光谱，在远红外或微波区，只有转动光谱，在远红外或微波区，只有Er改变2021/8/147在一般测量中，通常采在一般测量中，通常采用液体样品，由于分子用液体样品，由于分子的相互作用及各种谱带的相互作用及各种谱带的展宽效应，实际得到的展宽效应，实际得到的是一个宽的吸收带。的是一个宽的吸收带。这是这是分子吸收光谱分子吸收光谱的特的特征。征。原子吸收光谱原子吸收光谱通常是线通常是线状光谱，只包括外层电状光

6、谱，只包括外层电子跃迁吸收的能量，位子跃迁吸收的能量，位于光谱的紫外区和可见于光谱的紫外区和可见光区。光区。2021/8/148(三三) 光的吸收定律光的吸收定律I=I0e- x稀溶液：稀溶液：I=I0e-cxI/I0=e-cx朗伯朗伯比尔比尔(Lamber-Beer)定律定律透光度透光度(透射率透射率) T (Transmissivity, Relative transmittance)吸光度吸光度A (Absorbency)： A=-lgT=kbc= e-ln10lgecx=10-kcb适用条件：适用条件：T=I/I0=10-kcb(1) 单色光入射，单色光入射，(2) 溶液中溶质分子互不

7、干扰，即稀溶液。溶液中溶质分子互不干扰，即稀溶液。朗伯朗伯(Lamber)定律定律= e-cx2021/8/149比例常数比例常数 k 称为吸光系数称为吸光系数(absorptivity)(1) 溶液以摩尔浓度溶液以摩尔浓度(mol/L)表示表示k 称为摩尔吸光系数称为摩尔吸光系数(molar absoptivity)，用用 表示表示(2) 溶液以百分浓度溶液以百分浓度(g/L)表示表示k 称为比吸光系数，用称为比吸光系数，用 a 表示表示 和和 a 与多种因素有关：与多种因素有关： 入射光波长、入射光波长、 温度、溶剂性温度、溶剂性质及吸收物质的性质等。质及吸收物质的性质等。意义：稀溶液在一

8、定波长下测得的液层厚度为意义：稀溶液在一定波长下测得的液层厚度为1cm的吸光度值外推至溶液浓度为的吸光度值外推至溶液浓度为1mol/L的吸光度值。的吸光度值。意义：溶液浓度为意义：溶液浓度为1g/L液层厚度为液层厚度为lcm时在一定波时在一定波长下测得的吸光度值。长下测得的吸光度值。2021/8/1410(四四) 物质的发射光谱物质的发射光谱发射光谱发射光谱: 物质所发射的光被光谱仪器分解而成的光谱。物质所发射的光被光谱仪器分解而成的光谱。发射光谱有三种：发射光谱有三种：(a) 线状光谱线状光谱 由原子或离子被激发而由原子或离子被激发而发射发射, (b) 带状光谱带状光谱 由分子被激发而发射由

9、分子被激发而发射, (c) 连续光谱连续光谱 由炙热的固体或液体所发射由炙热的固体或液体所发射 。 不同元素的线光谱在谱线的多少、排列位置、强度等方不同元素的线光谱在谱线的多少、排列位置、强度等方面都不相同，不存在任何有相同的线光谱的两种元素。面都不相同，不存在任何有相同的线光谱的两种元素。发射光谱分析方法就是根据每种元素特有的线光谱来识发射光谱分析方法就是根据每种元素特有的线光谱来识别或检查各种元素。别或检查各种元素。 物质发射光谱的产生机理：物质的分子或原子吸收了外物质发射光谱的产生机理：物质的分子或原子吸收了外来能量后，可从基态跃迁至激发态。处于激发态的分子来能量后，可从基态跃迁至激发态

10、。处于激发态的分子或原子是不稳定的，会很快地从激发态自发回到基态，或原子是不稳定的，会很快地从激发态自发回到基态，吸收的能量以发光的形式释放出来。此时发出的光谱即吸收的能量以发光的形式释放出来。此时发出的光谱即该物质的发射光谱。该物质的发射光谱。2021/8/1411二、光谱技术的分类二、光谱技术的分类2021/8/1412第二节第二节 紫外紫外-可见分光光度计可见分光光度计分光光度计分光光度计:能从含有各种波长的混合光中将每一单色光分离出来并测量其强度的仪器。优点：优点：分析精密度高，测量范围广，分析速度快，样品用量少。根据使用的波长范围不同分为紫外光区、可见光区、红外根据使用的波长范围不同

11、分为紫外光区、可见光区、红外光区以及万用（全波段）分光光度计等。光区以及万用（全波段）分光光度计等。紫外紫外-可见分光光度计属于分子吸收光谱仪：工作波段在可见分光光度计属于分子吸收光谱仪：工作波段在200nm800nm的分光光度计。的分光光度计。其中：其中：200nm400nm为紫外光区，为紫外光区， 400nm800nm为可见光区。为可见光区。2021/8/1413721 可见分光光度计可见分光光度计2021/8/1414722系列系列 可见分光光度计可见分光光度计2021/8/1415751分光光度计分光光度计2021/8/1416SP-756P紫外可见分光光度计紫外可见分光光度计2021

12、/8/1417T6 新世纪（国家新世纪（国家“十五十五”科技攻关成果科技攻关成果 ）北京普析通用仪器有限责任公司北京普析通用仪器有限责任公司 2021/8/1418一、紫外一、紫外-可见分光光度计的基本结构和工作原理可见分光光度计的基本结构和工作原理基本结构：光源基本结构：光源, 单色器单色器, 吸收池吸收池, 检测器检测器, 放大显示系统放大显示系统0.2082021/8/14191. 钨灯钨灯: 波长范围为波长范围为3202500nm2. 卤钨灯卤钨灯: 提高寿命和发光效率提高寿命和发光效率3. 氢灯和氘灯氢灯和氘灯: 波长范围为波长范围为185375nm4. 汞灯汞灯: 在在254734

13、nm范围产生一系列光谱线，用其特范围产生一系列光谱线，用其特征谱线来校正分光光度计单色器的波长刻度。征谱线来校正分光光度计单色器的波长刻度。1998年，首次采用闪光氙灯作为光源。年，首次采用闪光氙灯作为光源。2021/8/1420(二二)单色器单色器单色器单色器(monochromator) 是一种把来自光源的复合光分是一种把来自光源的复合光分解为单色光，并分离出所需波长光束的装置。解为单色光，并分离出所需波长光束的装置。组成：入射狭缝、准直镜、色散元件、出射狭缝组成：入射狭缝、准直镜、色散元件、出射狭缝入射狭缝：限制杂散光进入入射狭缝：限制杂散光进入色散元件：将复合光分解为单色光，有棱镜和光

14、栅两种色散元件：将复合光分解为单色光，有棱镜和光栅两种准直镜：将来自色散元件的平行光束聚集在出射狭缝上准直镜：将来自色散元件的平行光束聚集在出射狭缝上出射狭缝：将固定波长范围的光射出单色器，可以限出射狭缝：将固定波长范围的光射出单色器，可以限制通带宽度。制通带宽度。单色器的性能直接影响射出光的纯度，从而影响测定单色器的性能直接影响射出光的纯度，从而影响测定的灵敏度、选择性及校正曲线的线性范围。单色器质的灵敏度、选择性及校正曲线的线性范围。单色器质量好坏，主要取决于色散元件的质量。量好坏，主要取决于色散元件的质量。2021/8/1421棱镜单色仪棱镜单色仪光光栅栅单单色色仪仪2021/8/142

15、2(三三)吸收池吸收池吸收池吸收池 (absorption cell) 又称为比色皿或液槽，一般由玻又称为比色皿或液槽，一般由玻璃、石英或熔凝石英等材料制成，是用来盛放被测溶液璃、石英或熔凝石英等材料制成，是用来盛放被测溶液和决定透光液层厚度的器件。和决定透光液层厚度的器件。常用吸收池光程为常用吸收池光程为0.1l0cm，1cm光程吸收池最常用光程吸收池最常用光程光程 / 体积比对测量的影响，体积比对测量的影响，(1) 微型吸收池微型吸收池(2) 多光路吸收池多光路吸收池Akbc， 提高光程提高光程 / 体积比体积比0.2cm/ml2.0cm/ml2021/8/1423(四四)检测器检测器在测

16、量中须把光信号变化转换成电信号的变化才能定量在测量中须把光信号变化转换成电信号的变化才能定量测量，这种把光信号转换成电信号的装置称为光电转换测量，这种把光信号转换成电信号的装置称为光电转换器器 检测器。检测器。对检测器的要求主要有：对检测器的要求主要有： 产生的电信号必须与照射到它上面的光束的强度产生的电信号必须与照射到它上面的光束的强度有恒定函数关系；有恒定函数关系； 必须能对一个很大的波长范围的光具有响应，否必须能对一个很大的波长范围的光具有响应，否则应用局限性大；则应用局限性大； 灵敏度要高，响应速度要快，产生的电信号要易灵敏度要高，响应速度要快，产生的电信号要易于检测或放大且噪声要低。

17、于检测或放大且噪声要低。常用检测器：光电管、光电倍增管、光电二极管阵列、常用检测器：光电管、光电倍增管、光电二极管阵列、 光电池、电荷耦合器件。光电池、电荷耦合器件。2021/8/14241. 光电管光电管光电管光电管 (phototube) 是由封装在真空封套里的一个半圆柱是由封装在真空封套里的一个半圆柱面形阴极和一个丝状阳极组成。阴极的凹面上有一层对面形阴极和一个丝状阳极组成。阴极的凹面上有一层对光敏感的碱金属或其氧化物，受光照射可发射光电子。光敏感的碱金属或其氧化物，受光照射可发射光电子。当在两极间加上电压时，当在两极间加上电压时，即会产生光电流，流经即会产生光电流，流经负载电阻负载电阻

18、 ( 一般一般106109 ) 时会产生时会产生一定电压降。经放大一定电压降。经放大后将信号输给指示仪后将信号输给指示仪表或记录仪。表或记录仪。紫敏光电管阴极表面涂有锑和铯，适用紫敏光电管阴极表面涂有锑和铯，适用200625nm红敏光电管阴极表面涂有银或氧化铯，适用红敏光电管阴极表面涂有银或氧化铯，适用6251000nm2021/8/14252. 光电倍增管光电倍增管光电倍增管光电倍增管(photomultiplier)是由一个光阴极和多个二次是由一个光阴极和多个二次发射电极发射电极 (打拿极打拿极)和阳极所组成，其灵敏度比光电管要和阳极所组成，其灵敏度比光电管要高得多。高得多。912个打拿级

19、个打拿级1个光电子可个光电子可产生产生106108个电子个电子可检可检10-810-9s短脉冲信号短脉冲信号2021/8/14263. 光电二极管阵列光电二极管阵列光电二极管阵列光电二极管阵列 (photodiode array) 检测器为多道光检测检测器为多道光检测器，可同时检测多个波长的光强度。器，可同时检测多个波长的光强度。优点优点: 不怕强光、耐振动、耐冲击、小型、重量轻、耗不怕强光、耐振动、耐冲击、小型、重量轻、耗电少、寿命长、可靠性高及读出速度快等优点，不存在电少、寿命长、可靠性高及读出速度快等优点，不存在时间滞后现象，可应用于化学反应动力学研究。时间滞后现象，可应用于化学反应动力

20、学研究。2021/8/1427某些半导体材料受光照射时，背光面和受光面之间会产某些半导体材料受光照射时，背光面和受光面之间会产生电位差。在两面之间可检测到电流。这种光电转换元生电位差。在两面之间可检测到电流。这种光电转换元件即为件即为光电池光电池。4. 光电池光电池常用的有硒光电池、硅光电池等。光电池所产生的光电常用的有硒光电池、硅光电池等。光电池所产生的光电流与入射光强成正比。光电池的优点是结实、便宜、使流与入射光强成正比。光电池的优点是结实、便宜、使用方便。不用外接电源，只要受光照射，便能产生电流，用方便。不用外接电源，只要受光照射，便能产生电流，应用起来很方便。缺点是容易受潮而使其产生的

21、电流大应用起来很方便。缺点是容易受潮而使其产生的电流大小不稳定。平时保存要防潮、防光，最好用深色纸包起小不稳定。平时保存要防潮、防光，最好用深色纸包起来放人干燥器皿中。来放人干燥器皿中。与硒光电池相比硅光电池最大的优点是使用寿命长与硒光电池相比硅光电池最大的优点是使用寿命长(可可用用10年以上年以上)，几乎无疲劳现象，是很受欢迎的一种新，几乎无疲劳现象，是很受欢迎的一种新型光电池。型光电池。2021/8/1428电荷耦合器件电荷耦合器件(charge-coupled devices，CCD)，是一，是一种新型固体多道光学检测器件，它是在大规模硅集成种新型固体多道光学检测器件，它是在大规模硅集成

22、电路工艺基础上研制而成的模拟集成电路芯片。它可电路工艺基础上研制而成的模拟集成电路芯片。它可以借助必要的光学和电路系统，将光谱信息进行光电以借助必要的光学和电路系统，将光谱信息进行光电转换、储存和传输，在其输出端产生波长转换、储存和传输，在其输出端产生波长强度二维强度二维信号，信号经放大和计算机处理后在末端显示器上同信号，信号经放大和计算机处理后在末端显示器上同步显示出人眼可见的图谱，无须感光板那样的冲洗和步显示出人眼可见的图谱，无须感光板那样的冲洗和测量黑度的过程。目前这类检测器已经在光谱分析的测量黑度的过程。目前这类检测器已经在光谱分析的许多领域获得了应用。许多领域获得了应用。5. 电荷耦

23、合器件电荷耦合器件2021/8/1429(五五) 信号显示系统信号显示系统信号显示系统是把放大的信号以适当方式显示或同时信号显示系统是把放大的信号以适当方式显示或同时记录下来。常用的信号显示装置有记录下来。常用的信号显示装置有直读检流计直读检流计，电位电位调节指零装置调节指零装置以及以及自动记录和数字显示装置自动记录和数字显示装置等。目前等。目前很多型号的分光光度计装配有很多型号的分光光度计装配有计算机系统计算机系统，一方面可，一方面可对分光光度计进行操作控制，另一方面可将数据直接对分光光度计进行操作控制，另一方面可将数据直接显示在显示在CRT或液晶显示器上。并对数据进行处理、记或液晶显示器上

24、。并对数据进行处理、记录、打印，也可将数据上传到网络。录、打印，也可将数据上传到网络。2021/8/1430二、影响分光光度法准确性的因素二、影响分光光度法准确性的因素（一）单色性不纯的影响（一）单色性不纯的影响（二）杂散光的影响（二）杂散光的影响引起杂散光的原因引起杂散光的原因1. 仪器中光学、机械零件的反射和散射等原因使所仪器中光学、机械零件的反射和散射等原因使所采用的测定波长的光偏离正常光路，在不通过样采用的测定波长的光偏离正常光路，在不通过样品的情况下直接照射到单色器。这种杂散光波长品的情况下直接照射到单色器。这种杂散光波长与测定波长相同；与测定波长相同；2. 由仪器的光学系统设计制作

25、缺陷引起。如不必要由仪器的光学系统设计制作缺陷引起。如不必要的反射面、光束孔径不匹配、光学元件表面的擦的反射面、光束孔径不匹配、光学元件表面的擦痕、光学系统的像差、不均匀色散以及由于机械痕、光学系统的像差、不均匀色散以及由于机械零部件加工不良、位置错移、仪器内壁防眩黑漆零部件加工不良、位置错移、仪器内壁防眩黑漆脱落等。脱落等。2021/8/1431（三）吸收池的影响（三）吸收池的影响由于吸收池的质量不好或使用保管不善，吸收池不由于吸收池的质量不好或使用保管不善，吸收池不配套，透光面被污染上油污、指纹、沉淀，吸收池配套，透光面被污染上油污、指纹、沉淀，吸收池与光路不垂直等原因都可影响捡测结果的准

26、确性。与光路不垂直等原因都可影响捡测结果的准确性。（四）电压、检测器负高压波动的影响（四）电压、检测器负高压波动的影响如果仪器电源电压波动过大，超过了仪器的稳压范如果仪器电源电压波动过大，超过了仪器的稳压范围或稳压器质量不好，都可引起光源电压、检测器围或稳压器质量不好，都可引起光源电压、检测器负高压波动，造成光源光强波动和检测器噪声增大，负高压波动，造成光源光强波动和检测器噪声增大，使捡测结果准确度降低。使捡测结果准确度降低。（五）其它因素的影响（五）其它因素的影响吸光度读数刻度误差、仪器安装环境（如振动、温吸光度读数刻度误差、仪器安装环境（如振动、温度变化）、化学因素（如荧光、溶剂效应等）等

27、也度变化）、化学因素（如荧光、溶剂效应等）等也可影响捡测结果的准确度。可影响捡测结果的准确度。2021/8/1432三、紫外三、紫外可见分光光度计的类型可见分光光度计的类型（一）单波长单光束分光光度计（一）单波长单光束分光光度计按其光学系统分类按其光学系统分类单波长分光光度计单波长分光光度计单光束单波长分光光度计单光束单波长分光光度计双光束单波长分光光度计双光束单波长分光光度计双波长分光光度计双波长分光光度计 单光束光路，从光源到试样至接收器只有一个单光束光路，从光源到试样至接收器只有一个光通道；光通道；检测准确性不够稳定，不能用于精密分析。检测准确性不够稳定，不能用于精密分析。 仪器只有一个

28、色散元件，工作波长范围较窄，仪器只有一个色散元件，工作波长范围较窄， 通常采用直接接收放大显示的简单电子系统，通常采用直接接收放大显示的简单电子系统，用电表或数字显示，用电表或数字显示， 结构简单、附件少、功能范围小，不能做特殊结构简单、附件少、功能范围小，不能做特殊试样如浑浊样品、不透明样品等的测定。试样如浑浊样品、不透明样品等的测定。 2021/8/14331. 可见分光光度计可见分光光度计钨灯钨灯721型可见分光光度计型可见分光光度计: 自准式棱镜色散系统自准式棱镜色散系统, 适用波长适用波长360800nm, 钨灯作为光源，指针显示。钨灯作为光源，指针显示。 改进型号：改进型号：722

29、， 7230等。等。2021/8/14342. 紫外紫外-可见分光光度计可见分光光度计751型可见分光光度计型可见分光光度计: 自准式棱镜色散系统自准式棱镜色散系统, 适用波长适用波长200-1000nm, 可用于紫外、可见和近红外光谱测定。可用于紫外、可见和近红外光谱测定。 光光 源源: 钨灯钨灯3201000nm，氢灯，氢灯200320nm。改进：改进： 棱镜棱镜-光栅光栅 指针指针-数码数码 打印打印 浓度换算浓度换算 波长自动扫描波长自动扫描 色散元件色散元件: 石英棱镜石英棱镜, 两个滤光片两个滤光片(365nm、580nm)，可，可在必要时清除杂光的影响；在必要时清除杂光的影响；吸

30、吸 收收 池池: 配有石英和玻璃两种；配有石英和玻璃两种；光电转换器光电转换器: 紫敏和红敏紫敏和红敏两种。两种。2021/8/1435（二）单波长双光束分光光度计（二）单波长双光束分光光度计(1) 同时测量参比池和样品池，同时测量参比池和样品池，(2) 双单色器，提高分辨率降低杂散光双单色器，提高分辨率降低杂散光(3) 自动测量自动测量(4) 附件扩展功能附件扩展功能常用型号：北京普析通用公司常用型号：北京普析通用公司TU-1221型型/T6，岛津，岛津UV-2501型，型，PE的的Lambda系列及系列及HP的的8453型等。型等。特点：特点：2021/8/1436(三三) 双波长分光光度

31、计双波长分光光度计为克服由于非特征吸收信号为克服由于非特征吸收信号 ( 如试液混浊引起的散射，如试液混浊引起的散射，比色皿与空气界面和比色皿与溶液界面的折射差别等比色皿与空气界面和比色皿与溶液界面的折射差别等)影响而带来测定误差，而设计双波长分光光度计。影响而带来测定误差，而设计双波长分光光度计。测定高浓度试样和混浊试样以及多组分混合物的定量测定高浓度试样和混浊试样以及多组分混合物的定量分析具有很大优越性，提高了测量灵敏度和准确度。分析具有很大优越性，提高了测量灵敏度和准确度。2021/8/1437四、紫外四、紫外可见分光光度计的性能指标及评价可见分光光度计的性能指标及评价 （一）波长准确度和

32、波长重复性（一）波长准确度和波长重复性 (1) 波长准确度波长准确度 (波长精度波长精度) ，是指仪器波长指示器上的波，是指仪器波长指示器上的波长值与仪器此时输出的实际波长值之间的符合程度。长值与仪器此时输出的实际波长值之间的符合程度。可用二者之差可用二者之差(波长误差波长误差)来衡量其准确性。来衡量其准确性。波长误差来源：色散元件传动机构运动误差，波长刻度波长误差来源：色散元件传动机构运动误差，波长刻度盘刻划误差盘刻划误差 (显示误差显示误差)，狭缝中心偏移和装调误差等。，狭缝中心偏移和装调误差等。测定方法，最常用低压汞灯发射谱线法，测定方法，最常用低压汞灯发射谱线法，常用谱线：常用谱线：

33、579.0nm、 576.9nm、 546.1nm、 435.8nm、404.5nm、 364.9nm、 253.7nm校正指标：光栅光度计，全波段的波长误差不超过校正指标：光栅光度计，全波段的波长误差不超过1nm 棱镜光度计，低于棱镜光度计，低于400nm时，不大于时，不大于1nm 高于高于400nm时，不大于时，不大于2nm2021/8/1438(2) 波长重复性波长重复性 波长重复性是指在对同一个吸收带或发射线进行多次测波长重复性是指在对同一个吸收带或发射线进行多次测量时，峰值波长测量结果的一致程度。通常取测量结果量时，峰值波长测量结果的一致程度。通常取测量结果的最大值与最小值之差来衡量

34、。的最大值与最小值之差来衡量。2021/8/1439(二二) 光度准确度光度准确度光度准确度光度准确度(photometric accuracy)又称测光精度，是指又称测光精度，是指仪器上测得的透光度或吸光度与真实值之间的偏差，该仪器上测得的透光度或吸光度与真实值之间的偏差，该偏差越小，准确度越高。偏差越小，准确度越高。测定方法：测定方法：酸性重铬酸钾酸性重铬酸钾(K2Cr2O7 )法法用用AR (Analytic Reagent) 级重铬酸钾级重铬酸钾110干燥干燥1h，制成两种溶液制成两种溶液 溶液溶液： 50mg0.5mg/L，吸光度范围，吸光度范围0.20.7溶液溶液：100mg1.0

35、mg/L，吸光度范围，吸光度范围0.41.4用用0.005mol/L硫酸制成参比液硫酸制成参比液2021/8/1440(三三) 光度线性范围光度线性范围仪器的光度线性范围，也就是仪器的最佳工作范围。在仪器的光度线性范围，也就是仪器的最佳工作范围。在此线性范围内测得的物质的吸光系数才是一个常数。此线性范围内测得的物质的吸光系数才是一个常数。检查方法：将吸光物质配成一系列不同浓度溶液，测定检查方法：将吸光物质配成一系列不同浓度溶液，测定吸光度，计算吸光系数，绘制吸光系数吸光度，计算吸光系数，绘制吸光系数吸光度曲吸光度曲线，曲线的平坦区域即为仪器的线性范围。线，曲线的平坦区域即为仪器的线性范围。(四四) 分辨率分辨率分辨率是指仪器对于紧密相邻的峰可分辨的最小波长间隔，分辨率是指仪器对于紧密相邻的峰可分辨的最小波长间隔，是衡量分光光度计性能的重要指标之一。是衡量分光光度计性能的重要指标之一。因素：单色器输出的单色光的光谱纯度、强度，以及检因素：单色器输出的单色光的光谱纯度、强度，以及检测器的光谱灵敏度测器的光谱灵敏度测试方法：苯蒸气吸收光谱法测试方法：苯蒸气吸收光谱法=260.0