常见蛋白酶抑制剂之欧阳主创编

1、欧阳主创编2021.02.17欧阳主创编2021.02.17当前位置：生物帮 > 实验技 巧 >生物化学技术 > 正文创作：欧阳主时间：2021.02. 17蛋白酶及蛋白酶抑制剂大全日期：2012-06-15 来源：互联网标签：相关专题：解析蛋白酶活性测定聚焦蛋白酶研究新进展摘要$破碎细胞提取蛋白质的同时可释放岀蛋白酶，这些蛋 白酶需要迅速的被抑制以保持蛋白质不被降解。在蛋白质提 取过程中，需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。以下列 举了 5种常用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点，因为 各种蛋白酶对不同蛋白质的敏感性各不相同，因此需要调整 各种蛋白酶的浓度恩必美生物新一轮2

2、-5折生物试剂大促销！ Ibidi细胞灌流培 养系统模拟血管血液流动状态下的细胞培养系统广州赛诚 生物基因表达调控专题蛋口酶抑制剂破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶，这些蛋白 酶需要迅速的被抑制以保持蛋白质不被降解。在蛋白质提取 过程中，需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。以下列举 了 5种常用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点，因为各 种蛋白酶对不同蛋白质的敏感性各不相同，因此需要调整各 种蛋白酶的浓度。由于蛋白酶抑制剂在液体中的溶解度极 低，尤其应注意在缓冲液中加人蛋白酶抑制剂时应充分混匀 以减少蛋白酶抑制剂的沉淀。在宝灵曼公司的目录上可查到 更完整的蛋白酶和蛋白酶抑制剂表。常用抑制剂

3、pmsr|）抑制丝氨酸蛋白酶（如胰凝乳蛋白酶，胰蛋白酶，凝血 酶）和铳基蛋白酶（如木瓜蛋白酶）：2）IOmg/ml溶于异丙醇中：$）在室温下可保存一年：匍工作浓度 817*174u9/ml（0.1 *1 .Ommol/l）:5）在水液体溶液中不稳定，必须在每一分离和纯化步骤中 加入新鲜的pmffoEDTRI）抑制金属蛋白水解酶：2)0.5mol/l 水溶液,pH8*9:$)溶液在C稳定六个月以上：匍工作浓度:0.5wl.5mmol/L (0.2w0.5mg/ffll):5)加入nctOII调节溶液的pll值，否则IDTfl不溶解。胃蛋白酶抑制剂(pep/tcintin)1) 抑制酸性蛋白酶如胃

4、蛋白酶，血管紧张肽原酶，组织蛋 白酶D和凝乳酶：2) lmg/ml溶于甲醇中：$储存液在C一周内稳定，攻0°C稳定&个月：4) 1 作浓度:0.7ug/ml(lumol/l)5) 在水中不溶解。亮抑蛋白酶肽(leupepkin)1) 抑制丝氨酸和毓基蛋白酶，如木瓜蛋白酶，血浆酶和组 织蛋白酶B:2) IOmg/ml 溶于水：$)储存液C稳定一周，攻0°C稳定&个月：匍工作浓度0>5m9/fnlo胰蛋白酶抑制剂(Qprotinin)1) 抑制丝氨酸蛋白酶，如血浆酶，血管舒缓素，胰蛋白酶 和胰凝乳蛋白酶：2) IOmg/ml 溶于水，pll7w8$储存液c

5、稳定一周，攻0°C稳定&个月：匍工作浓度:0.06w2.0ug/ml(0.01 w0.5umol/l):5) 避免反复冻融*6) 在pH>l2.8时失活。蛋白酶抑制剂混合使用I5ug/ml PmSf丝氨酸蛋白酶抑制剂O.Smg/ml EDTf)金属蛋白酶抑制剂0.7u9/ml胃蛋白酶抑制剂(Pep/tatin)酸性蛋白酶抑制剂0.5u9/ml亮抑蛋白肽酶(leupeptin)广谱蛋白酶抑制剂常用蛋白酶抑制剂表抑制剂靶蛋白酶有效浓度储藏溶液注解An tipain木瓜酶和胰酶50|ig/mllmg/ml水溶液对胰凝蛋白酶，胃 液素，纤溶酶无影响APMSF胰蛋白酶样丝氨酸蛋白

6、酶10-40pg/ml 或10-20pMlOOmmol/L水溶液毒性比PMSF低，不 能抑制胰凝蛋白酶 或乙酰胆碱酯酶抑肽酶丝氨酸蛋白酶0.06-2pg/mllOmg/mlPBS 溶液避免反复动冻融抑氨肽酶B氨基肽酶40jig/ml溶于甲醇不能抑制竣肽酶Calpain抑制剂I、nCalpain (钙依赖性 半胱氨酸蛋白酶)1:17|ig/mln：7pg/ml溶于乙醇可渗透薄膜抑糜阮酶素胰凝乳蛋白酶6-60ng/ml溶于DMSOB.M.综合酶片线氨酸，半胱氨酸 和金属蛋白酶每10-50ml细胞提 取液内加一片不含EDTAEDTA金属蛋白酶0.2-0.5mg/ml 或0.5-1.3pmol/L50

7、0mmol/L水溶液 pH=8.0抑蛋白酶醛肽线氨酸蛋白酶，疣 基蛋白酶0.5-2ng/ml10mg/ml水溶液a2-巨球蛋白广谱lU/ml100 U/ml PBS 溶液避免接触还原剂Pefabloc SC(boe- hringer Mannheim)线氨酸蛋白酶0.1-1.0mg/ml 或0.4-4mmol/L100mM水溶液无毒，在中性pH下 较PMSF稳泄胃蛋白酶抑制剂酸性蛋白酶0.7ng/mllmg/ml甲醇溶液PMSF丝氨酸蛋白酶17-170pg/ml10mg/ml异丙醇溶液每一操作步骤时新 鲜加入TLCK胰蛋白酶37-50pg/mllmg/ml溶于 50mMmol/L醋酸盐 溶液，

8、pH=5.0对胰凝蛋白酶无影响TPCK胰凝乳蛋白酶70-100pg/ml3mg/ml乙醇溶液对胰蛋白酶无影响作者：青岚点击：次 来源于生物秀知道 首页实验实验中心常用蛋白酶抑制剂(protea/e inhibitor)和磷酸酶抑制剂的贮存与工作液浓度常用蛋白酶抑制剂(protea/e inhibitor)和磷酸酶抑制剂的贮存与工作液浓度10140609 UtO ItOt来源：浏览次数：12网友评论0条常用蛋白酶抑制剂(protea/e inhibitor)和磷酸酶抑制剂的贮存与工作液浓度在与蛋白相关的检测中，首先最关键的一 步便是蛋白质的提取。蛋白质的提取过程中，我们要经常加 和蛋白酶抑制剂(

9、proteo/c inhibitor)以防止蛋白质的降解。另外在磷酸化蛋白的研究过程中，磷酸酶抑制剂也是必不可 少的，本文总结了常用的蛋白酶抑制剂 (protea/e inhibitof)Pmsr9 leupeptin 亮肽素，flprotinin 抑 肽酶，Pep/tQtin胃蛋白酶抑制剂(proteci/蛋白酶抑制剂分 子量溶解性磷酸酶抑制剂工作浓度贮存液胰蛋白酶丝氨 酸】在与蛋白相关的检测中，首先最关键的一步便是蛋白质的提 取。蛋白质的提取过程中，我们要经常加和蛋白酶抑制剂(p rotea/e inhibitor)以防止蛋白质的降解。另外在磷酸化蛋白 的研究过程中，磷酸酶抑制剂也是必不可

10、少的，本文总结了 常用的蛋白酶抑制剂(proteo/e inhibitor)Pmfr, leupepti n亮肽素,Aprotinin抑肽酶，PepAatin胃蛋白酶抑制剂(pc oteci/e inhibitor), EDTfl-flal等以及磷酸酶抑制剂11"氟化 钠，naSVOI 原矶酸钠，BETfl-glyceropho/phciU 甘油磷酸 钠，no2P2O4焦磷酸钠等。对这些蛋白酶抑制剂(proteo/e inhibitor)的溶解配制，贮存液与工作液浓度，保存都做了详 细的说明。蛋白酶抑制剂(proteo/e inhibitor) pmsr： 特性：丝氨酸蛋白酶抑制剂(

11、proteci/e inhibitor),如胰凝乳 蛋白酶，胰蛋白酶和凝血酶，也抑制半胱氨酸蛋白酶如木瓜 蛋白酶(可逆的地面处理)。溶解性：溶于异丙醇，乙醇，甲醇和丙二醇果IOmg/mlo在 水溶液中不稳定。在100%异丙醇，+25°C时稳定至少9个 月分子量：17州.2使用：贮存浓度：200mm,工作浓度：Immleupepkin亮肽素特性：抑制丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶如胰蛋白酶，木瓜蛋白 酶，纤溶酶，和组织蛋白酶B溶解性：高度溶于水(lmg/ml)oC一周稳定分成小份冷 冻在%0°C至少&个月分子量：C20HI8n6O4 K 1/2 H2fO4:475.6C20H

12、58n6O4 K 1/2 II2SO4 k 1120:495.6使用：贮存浓度：Img/mL工作浓度0.5 ug/ml (1mm) nprotinin抑肽酶特性：丝氨酸蛋白酶抑制剂(proteci/e inhibitor),抑制纤维 蛋白溶酶，激肽释放酶，胰蛋白酶，糜蛋白酶的高活性。不 抑制凝血酶或因子X。溶解性：易溶于水（lOmg/ml）或缓冲液（例如，tri/, 0.1 III, pl!8.0）o pH约78的溶液在JC可保存I周，分装保存 在攻0°C可至少保存&个月。避免反复冻融.pll»2.8的碱性 环境可使其灭活。分子量：6«512使用：贮存浓度

13、tlmg/ml.工作浓度：0.06-2.0 ug/ml（O.OI-o.j um）Pep/tatin 胃蛋白酶抑制剂（proteo/e inhibitor）特性：抑制天冬氨酸（酸）蛋白酶如胃蛋白酶，肾素，组织 蛋白酶D,凝乳酶，许多微生物酸性蛋白酶溶解性：溶于甲醇约Img/ml；可溶于乙醇，过夜溶解可达 到I mg/ml；在&当量乙酸中溶解度为SOOug/mL臣C稳定 一周，分装储存于攻0°C时可保存I个月分子量：685«9使用：贮存浓度：Img/mL使用浓度：0.7卩g/ml（l卩HI）EDTR-nal特性：金属蛋白酶抑制剂（protea/e inhibitor）溶

14、解性：溶于水至0.5HI,在pH8-9的条件下，TC稳定至少 &个月分子量* 172.21使用：工作浓度：0.2-0.5 mg/ml(0.5-kI mHI),不需现用现配，在溶液pH值调至8T时再加入。磷酸酶抑制剂n«r氟化钠溶解性：溶于水分子量：41.99使用：贮存液：5m工作浓度：10-20mmnaJVOfl原矶酸钠分子量：溶解性：溶于水，我们购买过来的是原矶酸钠原矶酸钠需要 经过处理以后才能成为激活的矶酸钠激活的矶酸钠才具有 抑制去磷酸化的作用原矶酸钠变成激活的矶酸钠的过程是* 100mm原矶酸钠激活储存液配制(1) 取0.181克的原矶酸钠溶解于10ml的双蒸水中加酸调节PH至10(颜色变黄)(2) 煮至无色($)室温冷却(匍重调PH至10(5)重复(1 ) ( 2 ) ( 3 ) ( 4 )直至溶液保持无色，并且P H稳定于10分装lOOul/管每10ml裂解液