高考化学一轮复习 第一部分 必考部分 第1章 化学计量在实验中的应用 第1节 物质的量 气体摩尔体积课件 新人教版 (6)

1、选修3现代生物科技专题第第1讲基因工程讲基因工程基础夯实课堂归纳课时作业考点精研直击高考一、基因工程的概念一、基因工程的概念【知识梳理】【知识梳理】 基因工程的别名基因工程的别名基因拼接技术或基因拼接技术或_技术技术操作环境操作环境_操作对象操作对象基因基因操作水平操作水平_水平水平基本过程基本过程剪切剪切_表达表达结果结果人类需要的人类需要的_或生物类型或生物类型优点优点可可_生物的遗传性状生物的遗传性状可克服远缘杂交不亲和性可克服远缘杂交不亲和性DNA重组重组生物体外生物体外DNA分子分子拼接拼接导入导入基因产物基因产物定向改造定向改造 二、二、DNA重组技术的基本工具重组技术的基本工具1

2、限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶(简称：限制酶简称：限制酶)(1)来源：主要是从来源：主要是从_生物中分离纯化出来的。生物中分离纯化出来的。(2)作用：识别双链作用：识别双链DNA分子的某种特定分子的某种特定_并使每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键并使每条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。断开。(3)结果：产生结果：产生_或平末端。或平末端。原核原核核苷酸序列核苷酸序列黏性末端黏性末端 2DNA连接酶连接酶常用类型常用类型Ecoli DNA连接酶连接酶T4 DNA连接酶连接酶来源来源_T4噬菌体噬菌体功能功能连接黏性末端连接黏性末端连接连接_结果结果恢复被限制酶切开的两个

3、核苷酸之间的磷酸恢复被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键二酯键大肠杆菌大肠杆菌黏性末端和平末端黏性末端和平末端 质粒质粒限制酶切割位点限制酶切割位点标记基因标记基因 三、基因工程的操作程序三、基因工程的操作程序PCR技术技术启动子启动子标记基因标记基因 农杆菌转化法农杆菌转化法显微注射显微注射DNA分子杂交分子杂交 分子杂交技术分子杂交技术抗原抗原抗体杂交抗体杂交四、基因工程的应用四、基因工程的应用技术名称技术名称应用应用植物基植物基因工程因工程培育抗虫转基因植物、抗病转基因植物和培育抗虫转基因植物、抗病转基因植物和_转基因植物，利用转基因技术改良植物的品质转基因植物，利用转基因技术改良植

4、物的品质动物基动物基因工程因工程提高动物生长速度，改善畜产品的品质，用转基提高动物生长速度，改善畜产品的品质，用转基因动物生产药物，用转基因动物作因动物生产药物，用转基因动物作_的供体的供体基因基因治疗治疗把正常基因导入病人体内，使其表达产物发挥功把正常基因导入病人体内，使其表达产物发挥功能，从而治疗疾病，分为体内基因治疗和体外基能，从而治疗疾病，分为体内基因治疗和体外基因治疗因治疗抗逆抗逆器官移植器官移植 五、蛋白质工程五、蛋白质工程1蛋白质工程的概念蛋白质工程的概念(1)基础：蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关基础：蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系。系。(2)操作：操作：_或基

5、因合成。或基因合成。(3)结果：改造了现有蛋白质或制造出结果：改造了现有蛋白质或制造出_。(4)目的：根据人们对蛋白质功能的特定需求，对目的：根据人们对蛋白质功能的特定需求，对_进行分子设计。进行分子设计。基因修饰基因修饰新的蛋白质新的蛋白质蛋白质结构蛋白质结构功能功能蛋白蛋白质结构质结构氨氨基酸序列基酸序列脱氧核脱氧核苷酸序列苷酸序列 1以下关于基因工程的操作工具的说法正确的是以下关于基因工程的操作工具的说法正确的是()A所有的限制性核酸内切酶只能识别一种特定的核苷所有的限制性核酸内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列酸序列B质粒是基因工程中唯一的载体质粒是基因工程中唯一的载体C载体必须具备的条

6、件之一是：具有多个限制性核酸载体必须具备的条件之一是：具有多个限制性核酸内切酶切点，以便与外源基因连接内切酶切点，以便与外源基因连接DDNA连接酶使黏性末端的碱基之间形成氢键连接酶使黏性末端的碱基之间形成氢键【答案】【答案】C【自练自测】【自练自测】 【解析】【解析】每一种限制性核酸内切酶只能识别一种每一种限制性核酸内切酶只能识别一种(或者一或者一类类)特定的核苷酸序列，不同的限制性核酸内切酶所识别的核特定的核苷酸序列，不同的限制性核酸内切酶所识别的核苷酸序列不同；质粒是常用的载体，但不是唯一的载体；苷酸序列不同；质粒是常用的载体，但不是唯一的载体；DNA连接酶连接的是两个被同一限制性核酸内切

7、酶切割的连接酶连接的是两个被同一限制性核酸内切酶切割的DNA片段的切口，形成磷酸二酯键。片段的切口，形成磷酸二酯键。2下列关于基因工程的叙述，错误的是下列关于基因工程的叙述，错误的是()A目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物B限制性核酸内切酶和限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具连接酶是两类常用的工具酶酶C人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性物活性D载体上的抗性基因有利于筛选含重组载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和的细胞和促进目的基因的表达促进目的基因的表达【答案】【

8、答案】D【解析】【解析】基因工程中的目的基因来源于自然界中的含有基因工程中的目的基因来源于自然界中的含有目的性状的一切生物，可以是动物、植物，也可以是真菌、目的性状的一切生物，可以是动物、植物，也可以是真菌、细菌，还可以是人等；在基因工程中获取目的基因以及将目细菌，还可以是人等；在基因工程中获取目的基因以及将目的基因和载体结合构建基因表达载体必须使用同一种限制酶的基因和载体结合构建基因表达载体必须使用同一种限制酶进行切割，以获得相同的黏性末端，在进行切割，以获得相同的黏性末端，在DNA连接酶的作用连接酶的作用下，将目的基因和载体连接，构建基因表达载体；人的胰岛下，将目的基因和载体连接，构建基因

9、表达载体；人的胰岛素原基因可以在大肠杆菌体内得以表达，但是由于大肠杆菌素原基因可以在大肠杆菌体内得以表达，但是由于大肠杆菌是原核生物，没有内质网、高尔基体等细胞器的加工，合成是原核生物，没有内质网、高尔基体等细胞器的加工，合成的胰岛素原不具有胰岛素的功能，即没有生物活性；标记基的胰岛素原不具有胰岛素的功能，即没有生物活性；标记基因能检测并筛选含重组因能检测并筛选含重组DNA的细胞，但对于目的基因的表达的细胞，但对于目的基因的表达没有影响。没有影响。3下列有关限制性核酸内切酶的叙述中正确的是下列有关限制性核酸内切酶的叙述中正确的是()A用限制性核酸内切酶切割一个用限制性核酸内切酶切割一个DNA分

10、子中部，获得分子中部，获得一个目的基因时，被水解的磷酸二酯键有一个目的基因时，被水解的磷酸二酯键有2个个B限制性核酸内切酶识别序列越短，则该序列在限制性核酸内切酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的几率就越大中出现的几率就越大CCATG和和GGATCC序列被限制酶切出的序列被限制酶切出的黏性末端碱基数不同黏性末端碱基数不同D只有用相同的限制性核酸内切酶处理含目的基因的只有用相同的限制性核酸内切酶处理含目的基因的片段和质粒，才能形成重组质粒片段和质粒，才能形成重组质粒【答案】【答案】B【解析】【解析】切割一个切割一个DNA分子中部，获得一个目的基因分子中部，获得一个目的基因时 ， 被 水 解

11、的 磷 酸 二 酯 键 有时 ， 被 水 解 的 磷 酸 二 酯 键 有 4 个 ；个 ； C AT G 和和 GGATCC序列被限制酶切出的黏性末端碱基数相同，都序列被限制酶切出的黏性末端碱基数相同，都为为4个碱基；只要切割出来的黏性末端的碱基序列相同，都可个碱基；只要切割出来的黏性末端的碱基序列相同，都可以被以被DNA连接酶连接。连接酶连接。4关于蛋白质工程的说法，正确的是关于蛋白质工程的说法，正确的是()A蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作操作B蛋白质工程能生产出自然界中不曾存在过的新型蛋蛋白质工程能生产出自然界中不曾存在过的新型

12、蛋白质分子白质分子C对蛋白质的改造是通过直接改造相应的对蛋白质的改造是通过直接改造相应的mRNA来实来实现的现的D蛋白质工程的流程和天然蛋白质合成的过程是相同蛋白质工程的流程和天然蛋白质合成的过程是相同的的【答案】【答案】B【解析】【解析】蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。由于基因决定蛋白质，因此，要对蛋的生产和生活的需求。

13、由于基因决定蛋白质，因此，要对蛋白质的结构进行设计改造，还必须从基因入手。与基因工程白质的结构进行设计改造，还必须从基因入手。与基因工程不同，蛋白质工程能生产出自然界中不曾存在过的新型蛋白不同，蛋白质工程能生产出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子。质分子。5如图表示利用农杆菌转化法获得某种转基因植物的部如图表示利用农杆菌转化法获得某种转基因植物的部分操作步骤。以下说法错误的是分操作步骤。以下说法错误的是()A利用含有四环素的培养基可将含利用含有四环素的培养基可将含的细菌筛选出来的细菌筛选出来B是农杆菌，通过步骤是农杆菌，通过步骤将目的基因导入植株将目的基因导入植株C可与多个核糖体结合，同时翻译

14、出多种蛋白质可与多个核糖体结合，同时翻译出多种蛋白质D过程的完成需要限制酶和过程的完成需要限制酶和DNA连接酶参与连接酶参与【答案】【答案】C【解析】【解析】标记基因是四环素抗性基因，如果细菌能在含标记基因是四环素抗性基因，如果细菌能在含有四环素的培养基中生长，说明此细菌含有重组质粒；有四环素的培养基中生长，说明此细菌含有重组质粒；是是一条一条mRNA分子，可与多个核糖体结合形成多聚核糖体，但分子，可与多个核糖体结合形成多聚核糖体，但由于翻译的模板是同一个由于翻译的模板是同一个mRNA分子，密码子序列相同，故分子，密码子序列相同，故不同的核糖体翻译出的是多个同一种蛋白质。不同的核糖体翻译出的是

15、多个同一种蛋白质。基因工程的操作工具基因工程的操作工具(2)切割后产生末端的种类切割后产生末端的种类黏性末端和平末端。黏性末端和平末端。黏性末端：是限制酶在它识别序列的中轴线两侧将黏性末端：是限制酶在它识别序列的中轴线两侧将DNA的两条链分别切开时形成的的两条链分别切开时形成的(错位切错位切)，如下图所示：，如下图所示：平末端：是限制酶在识别序列的中轴线切开时形成的平末端：是限制酶在识别序列的中轴线切开时形成的(平切平切)，如下图所示：，如下图所示：2与与DNA分子相关的酶分子相关的酶(1)几种酶的比较：几种酶的比较：种类种类项目项目 限制酶限制酶DNA连连接酶接酶DNA聚聚合酶合酶解旋酶解旋

16、酶作用作用底物底物DNA分子分子DNA分子片段分子片段脱氧核脱氧核苷酸苷酸DNA分子分子作用作用部位部位磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二磷酸二酯键酯键磷酸二磷酸二酯键酯键碱基对碱基对之间的之间的氢键氢键 种种类类项目项目 限制酶限制酶DNA连连接酶接酶DNA聚聚合酶合酶解旋酶解旋酶作用作用特点特点切割目的基因及切割目的基因及载体，能专一性载体，能专一性识别双链识别双链DNA分子的某种特定分子的某种特定的核苷酸序列，的核苷酸序列，并且使每一条链并且使每一条链中特定部位的两中特定部位的两个核苷酸之间的个核苷酸之间的磷酸二酯键断开磷酸二酯键断开将双链将双链DNA片片段段“缝合缝合”起起来，恢复被限来，恢复

17、被限制酶切开了的制酶切开了的两个核苷酸之两个核苷酸之间的磷酸二酯间的磷酸二酯键键只能将单只能将单个脱氧核个脱氧核苷酸添加苷酸添加到脱氧核到脱氧核苷酸链上苷酸链上将将DNA两条链两条链之间的之间的氢键打氢键打开开作用作用结果结果形成黏性末端或形成黏性末端或平末端平末端形成重组形成重组DNA分子分子形成新的形成新的DNA分子分子形成单形成单链链DNA分子分子(3)根据质粒的特点选择限制酶。根据质粒的特点选择限制酶。所选限制酶要与切割目的基因的限制酶一致，以确保所选限制酶要与切割目的基因的限制酶一致，以确保产生相同的黏性末端。产生相同的黏性末端。质粒作为载体必须具备标记基因等，所以所选择的限质粒作为

18、载体必须具备标记基因等，所以所选择的限制酶尽量不要破坏这些结构；如果所选酶的切割位点不是一制酶尽量不要破坏这些结构；如果所选酶的切割位点不是一个，则切割重组后可能丢失某些片段，若丢失的片段含复制个，则切割重组后可能丢失某些片段，若丢失的片段含复制起点区，则切割重组后的片段进入受体细胞后不能自主复起点区，则切割重组后的片段进入受体细胞后不能自主复制。制。3作为载体的条件及作用：作为载体的条件及作用：条件条件作用作用稳定并能复制稳定并能复制目的基因稳定存在且数量可扩大目的基因稳定存在且数量可扩大有一个至多个限制酶有一个至多个限制酶切割位点切割位点可携带多个或多种外源基因可携带多个或多种外源基因具有

19、特殊的标记基因具有特殊的标记基因便于重组便于重组DNA的鉴定和选择的鉴定和选择考查基因工程的操作工具考查基因工程的操作工具1(2015年江苏南通第二次调研测试年江苏南通第二次调研测试)下列有关基因工程下列有关基因工程的叙述，错误的是的叙述，错误的是()A基因工程可以克服不同物种之间的生殖隔离，实现基因工程可以克服不同物种之间的生殖隔离，实现生物的定向变异生物的定向变异B在同一在同一DNA分子中，限制酶的识别序列越长，酶切分子中，限制酶的识别序列越长，酶切点出现的概率越大点出现的概率越大C基因载体上有一个或多个限制酶的切割位点，供外基因载体上有一个或多个限制酶的切割位点，供外源源DNA插入插入D

20、以大肠杆菌为受体细胞时，先要用以大肠杆菌为受体细胞时，先要用Ca2处理细胞以处理细胞以使其处于感受态使其处于感受态【答案】【答案】B【解析】【解析】基因工程可实现不同物种的基因工程可实现不同物种的DNA分子间的拼分子间的拼接，克服了远缘杂交不亲和的障碍，可定向改造生物的性接，克服了远缘杂交不亲和的障碍，可定向改造生物的性状；在同一状；在同一DNA分子中，限制酶的识别序列越长，酶切点出分子中，限制酶的识别序列越长，酶切点出现的概率越小；基因载体上应具备一个或多个限制酶切点，现的概率越小；基因载体上应具备一个或多个限制酶切点，可以连接一个或多个目的基因。可以连接一个或多个目的基因。2根据基因工程的

21、有关知识，回答下列问题：根据基因工程的有关知识，回答下列问题：(1)限制性核酸内切酶切割限制性核酸内切酶切割DNA分子后产生的片段，其末分子后产生的片段，其末端类型有端类型有_和和_。(2)质粒运载体用质粒运载体用EcoR切割后产生的片段如下：切割后产生的片段如下：为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的为使运载体与目的基因相连，含有目的基因的DNA除可除可用用EcoR切割外，还可用另一种限制性核酸内切酶切割，该切割外，还可用另一种限制性核酸内切酶切割，该酶必须具有的特点是酶必须具有的特点是_。(3)按其来源不同，基因工程中所使用的按其来源不同，基因工程中所使用的DNA连接酶有两连接酶有两类，

22、即类，即_DNA连接酶和连接酶和_DNA连接酶。连接酶。( 4 ) 反 转 录 作 用 的 模 板 是反 转 录 作 用 的 模 板 是 _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ ， 产 物 是， 产 物 是_。若要在体外获得大量反转录产物，常采用。若要在体外获得大量反转录产物，常采用_技术。技术。(5)基因工程中除质粒外，基因工程中除质粒外，_和和_也可作为运载体。也可作为运载体。(6)若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接若用重组质粒转化大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是_。【答案】【答案】(1)平末端黏性末端平

23、末端黏性末端(2)切割产生的切割产生的DNA片段片段末端与末端与EcoR切割产生的末端相同切割产生的末端相同(3)T4Ecoli(4)mRNA(或或RNA)cDNA(或或DNA)PCR(聚合酶链式反应聚合酶链式反应)(5)动植物病毒噬菌体动植物病毒噬菌体(6)未处理的大肠杆菌吸收质粒未处理的大肠杆菌吸收质粒(外源外源DNA)的能力极弱的能力极弱【解析】【解析】此题考查基因工程应用的相关知识。此题考查基因工程应用的相关知识。(1)DNA分分子经限制酶切割产生的子经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有黏性末端和平末片段末端通常有黏性末端和平末端两种类型。端两种类型。(2)为使运载体与目的基因相连，

24、应使二者被切为使运载体与目的基因相连，应使二者被切割后产生的末端相同，故用另一种限制酶切割产生的末端必割后产生的末端相同，故用另一种限制酶切割产生的末端必须与须与EcoR切割产生的末端相同。切割产生的末端相同。(3)根据酶的来源不同，根据酶的来源不同，DNA连接酶分为连接酶分为Ecoli DNA连接酶和连接酶和T4 DNA连接酶。连接酶。(4)以以RNA为模板，合成为模板，合成DNA的过程称为逆转录，若要体外获得大的过程称为逆转录，若要体外获得大量量DNA分子，可以使用分子，可以使用PCR技术。技术。(5)在基因工程中，通常利在基因工程中，通常利用质粒作为载体，另外噬菌体和动植物病毒也可作为载

25、体。用质粒作为载体，另外噬菌体和动植物病毒也可作为载体。(6)大肠杆菌作为受体细胞时，常用大肠杆菌作为受体细胞时，常用Ca2处理，使之成为能吸处理，使之成为能吸收周围环境中收周围环境中DNA分子的感受态细胞。分子的感受态细胞。基因工程的操作过程及蛋白质工程及其与基基因工程的操作过程及蛋白质工程及其与基因工程的关系因工程的关系2基因表达载体的构建基因表达载体的构建(1)基因表达载体的组成基因表达载体的组成(2)构建过程构建过程3将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞细胞细胞类型类型常用方法常用方法受体细胞受体细胞转化过程转化过程植物植物细胞细胞农杆菌农杆菌转化法转化法体细胞体细胞将目的基因

26、插入将目的基因插入Ti质粒的质粒的TDNA上上转入农杆菌转入农杆菌导入植物导入植物细胞细胞整合到受体细胞的整合到受体细胞的DNA上上动物动物细胞细胞显微注显微注射技术射技术受精卵受精卵将含有目的基因的表达载体提纯将含有目的基因的表达载体提纯取卵取卵获得受精卵获得受精卵显微注射显微注射早期胚胎培养早期胚胎培养胚胎移植胚胎移植发发育成为具有新性状的动物育成为具有新性状的动物微生微生物细物细胞胞Ca2处理处理增大细胞增大细胞壁通透性壁通透性原核细胞原核细胞或酵母菌或酵母菌用用Ca2处理细胞处理细胞感受态细胞感受态细胞重组表达载体重组表达载体DNA分子与感受态分子与感受态细胞混合细胞混合感受态细胞吸收

27、感受态细胞吸收DNA分子分子4目的基因的检测与鉴定目的基因的检测与鉴定5蛋白质工程与基因工程的关系蛋白质工程与基因工程的关系项目项目蛋白质工程蛋白质工程基因工程基因工程区区别别过过程程预期蛋白质功能预期蛋白质功能设计预设计预期的蛋白质结构期的蛋白质结构推测应推测应有的氨基酸序列有的氨基酸序列找到对找到对应的脱氧核苷酸序列应的脱氧核苷酸序列获取目的基因获取目的基因构建基因构建基因表达载体表达载体将目的基因导将目的基因导入受体细胞入受体细胞目的基因的目的基因的检测与鉴定检测与鉴定实实质质定向改造或生产人类所需定向改造或生产人类所需蛋白质蛋白质定向改造生物的遗传特定向改造生物的遗传特性，以获得人类所

28、需的新性，以获得人类所需的新的生物类型或生物产品的生物类型或生物产品结结果果生产自然界没有的蛋白质生产自然界没有的蛋白质一般是生产自然界已有的一般是生产自然界已有的蛋白质蛋白质联系联系蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程；对现有蛋白质的改造或制造新的蛋二代基因工程；对现有蛋白质的改造或制造新的蛋白质，必须通过基因修饰或基因合成实现白质，必须通过基因修饰或基因合成实现考查基因工程的操作过程考查基因工程的操作过程(2016年山东文登三模年山东文登三模)在培育转基因植物的研究中，卡那在培育转基因植物的研究中，卡那霉素抗性基因霉素抗性基因

29、(kan)常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基常作为标记基因，只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。如图为获得抗虫棉因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。如图为获得抗虫棉技术流程。请据图回答：技术流程。请据图回答：(1)基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：目的基基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：目的基因的获取、因的获取、_、将目的基因导入、将目的基因导入受体细胞、受体细胞、_。(2)A过程需要的酶有过程需要的酶有_和和_。( 3 ) 要 把 重 组 质 粒 导 入 土 壤 农 杆 菌 ， 首 先 必 须 用要 把 重 组 质 粒 导 入 土 壤 农 杆 菌 ， 首 先

30、 必 须 用_处理土壤农杆菌，使土壤农杆菌转变为处理土壤农杆菌，使土壤农杆菌转变为_态；然后将态；然后将_在缓在缓冲液中混合培养完成转化过程。冲液中混合培养完成转化过程。(4)含有重组质粒的土壤农杆菌侵染离体棉花叶片组织含有重组质粒的土壤农杆菌侵染离体棉花叶片组织后 ， 将 离 体 棉 花 叶 片 组 织 培 养 成 再 生 植 株 要 经 过后 ， 将 离 体 棉 花 叶 片 组 织 培 养 成 再 生 植 株 要 经 过C_和和E_。如要确保再生植株中含有抗。如要确保再生植株中含有抗虫基因，可在虫基因，可在C过程的培养基中加入过程的培养基中加入_ _。【答案】【答案】(1)基因表达载体的构

31、建目的基因的检测与鉴基因表达载体的构建目的基因的检测与鉴定定(2)限制酶限制酶DNA连接酶连接酶(3)Ca2感受感受重组质粒和感受态细胞重组质粒和感受态细胞(4)脱分化再分化卡那霉素脱分化再分化卡那霉素【解析】【解析】(1)基因工程的基本操作程序主要包括四个步基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导骤：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。(2)基因表达载体构建基因表达载体构建过程中，需要用同种限制酶切割目的基因和载体，使它们产过程中，需要用同种限制酶切割目的基因和载体

32、，使它们产生相同的黏性末端，再用生相同的黏性末端，再用DNA连接酶把这两个连接酶把这两个DNA片片2段连段连接起来。接起来。(3)农杆菌转化法导入目的基因时，首先必须用农杆菌转化法导入目的基因时，首先必须用Ca2处理土壤农杆菌，使土壤农杆菌转变为感受态；然后将重组处理土壤农杆菌，使土壤农杆菌转变为感受态；然后将重组质粒和感受态细胞在缓冲液中混合培养完成转化过程。质粒和感受态细胞在缓冲液中混合培养完成转化过程。(4)植物组织培养过程的关键步骤是脱分化和再分化。含植物组织培养过程的关键步骤是脱分化和再分化。含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长，故卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培

33、养基上生长，故若要确保再生植株中含有抗虫基因，可在若要确保再生植株中含有抗虫基因，可在C过程的培养基中过程的培养基中加入卡那霉素。加入卡那霉素。考查蛋白质工程的应用考查蛋白质工程的应用现代生物技术并不是各自独立的，而是相互联系、相互现代生物技术并不是各自独立的，而是相互联系、相互渗透的。如图表示利用乳腺生物反应器生产某种动物蛋白的渗透的。如图表示利用乳腺生物反应器生产某种动物蛋白的流程示意图，请分析回答下列问题：流程示意图，请分析回答下列问题：(1)该生产流程中应用到的现代生物技术有该生产流程中应用到的现代生物技术有_ _(写出其中两种写出其中两种)。(2)图中图中A、B分别表示分别表示_、_。(3)为提高培育成功率，进行为提高培育成功率，进行过程之前，对早期胚胎的过程之前，对早期胚胎的处理是取其部分细胞用目的基因探针进行处理是取其部分细胞用目的基因探针进行_ _检测，对受体动物的处理是用检测，对受体动物的处理是用_进行同期发情处理。进行同期发情处理。(4)蛋白质工程中，要对蛋白质结构进行设计改造，必须蛋白质工程中，要对蛋白质结构进行设计改造，必须通过基因修饰或基因合成来完成，而不直接改造蛋白质，原通过基因修饰或基因合成来完成，而不直接改造蛋白质，原