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文档简介
1、核酸的化学一、是非题1嘌呤碱分子中含有嘧啶碱结构。2核苷由碱基和核糖以 型的 cn 糖苷键相连。3核苷酸是由核苷与磷酸脱水缩合而成,所以说核苷酸是核苷的磷酸酯。4核苷酸的碱基和糖相连的糖苷键是co 型。5核糖与脱氧核糖的差别是糖环的2位有无羟基。6 核苷酸的等电点的大小取决于核糖上的羟基与磷酸基的解离。7在 dna 双链之间,碱基配对a-t 形成两对氢键, c-g 形成三对氢键,若胸腺嘧啶c2 位的羰基上的氧原于质子化形成oh, at 之间也可形成三对氢键。8任何一条 dna 片段中,碱基的含量都是a=t,c=g。9dna 碱基摩尔比规律仅适令于双链而不适合于单链。10用二苯胺法测定 dna
2、含量必须用同源的dna 作标准样品。11dna 变性后就由双螺旋结构变成线团结构。12tin 值低的 dna 分子中 (at)高。13tin 值高的 dna 分子中( c-g)高。14由于 rna 不是双链,因此所有的rna 分子中都没有双螺旋结构。15起始浓度高、含重复序列多的dna 片段复性速度快。16dna 的复制和转录部必须根据碱基配对的原则。17某氨基酸 trna 反密码子为 guc,在 mrna 上相对应的密码子应该是 cag。18细胞内 dna 的核苷酸顺序都不是随机的而是由遗传性决定的。19 rna 链的 5 核苷酸的 3羟基与相邻核昔酸的5羟基以磷酸二酯键相连。20 假如某
3、dna 样品当温度升高到一定程度时, od260提高 30,说明它是一条双链dna 。21核酸外切酶能够降解所有的病毒dna。二、填空题1核苷酸是由、和磷酸基连接而成。2在各种 rna 中含稀有碱基最多。3tm值高的 dna 分子中的含量高。tm值低的 dna分子中含量高。4真核生物的dna 存在于,其生物学作用是。5 细胞内所有的 rna 的核苷酸顺序都是由它们的决定的。6 将双链 dna 放置在 ph2 以下或 ph12 以上,其 od260,在同样条件下单链dna 的 od260。7b 型结构的 dna 双螺旋,两条链是平行, 其螺距为每个螺旋的碱基数为。8dna 抗碱的原因是。9将 a
4、、u、c 和 g 四种核苷酸溶解在ph3.5 的缓冲液中,从负极向正极进行电泳,跑得最快,跑得最慢。10从 ecoli 中分离的 dna 样品内含有 20的腺嘌呤( a) ,那么 t, gc。11某 dna 片段的碱基顺序为gctactaagc,它的互补链顺序应为。12具有高度重复序列的dna 片段,如,具有中度重复序列的 dna 片段,如和的基因,真核细胞的结构基因是序列。13当温度逐渐升到一定高度时,dna 双链称为变性。当温度逐渐降低时,dna 的两条链,称为。11 dna 的复性速度与、 以及 dna片段的大小有关。15天然 dna 的负超螺旋是由于dna 双螺旋中两条链引起的,为手超
5、 螺旋。正超螺旋是由于dna 双螺旋中两条链引起的,为手超螺旋。16trna 的二级结构呈形,三级结构的形状像。三、选择题dna 的 tm与介质的离子强度有关, 所以 dna 制品应保存在:a、高浓度的缓冲液中b、低浓度的缓冲液中c、纯水中d、有机试剂中2在以下的修饰碱基中哪种在氢键的形成方面不同于和它相关的碱基:a、2-甲基腺嘌呤b、5-甲基胞嘧啶c、5-羟甲基胞噙陵d、1-甲基鸟瞟吟3热变性后的 dna :a、紫外吸收增加b、磷酸二酯键断裂c、形成三股螺旋d、(g-c)含量增加4dna 分子中的共价键有:a、碱基与脱氧核糖1 位碳(c-1)之间的糖苷键。b、磷酸与脱氧核糖2 位碳上的羟基(
6、 2-oh)之间的酯键。c、碱基与脱氧核糖2 位碳( c-2)之间的糖音键。d、磷酸与脱氧核糖1 位碳上的羟基( 2-oh)之间的酯键。5发生热变性后的dna 复性速度与:a、dna 的原始浓度有关。b、催化复性的酶活性有关。c、与 dn a 的长短无关。d、与 dna 分子中的重复序列无关。6下面关于核酸的叙述除哪个外都是正确的:a、在嘌呤和嘧啶碱之间存在着碱基配对。b、当胸腺嘧啶与腺嘌呤配对时,甲基不影响氢键形成。c、碱溶液只能水解rna,不能水解 dna。d、在 dna 分子中由氢键连接的碱基平面与螺旋轴平行。7下列过程与 dna 的人工克隆无关的是:a、 用专一性的限制性内切酶在特定的
7、互补位点切割质粒dna 和供体b、通过连接酶催化质粒dna 与供体 dna 接合。c、将重组后的 dna 通过结合反应引入寄主细胞。d、常常根据载体所具有的抗药性来筛选含有重组dna 的细菌。8核酸分子中的共价键包括:a、嘌呤碱基第 9 位 n 与核糖第 1 位 c 之间连接的 -糖苷键b、磷酸与磷酸之间的磷酸酯键c、磷酸与核糖第 1 位 c 之间连接的磷酸酯键d、核糖与核糖之间连接的糖苷键9下列哪种物质不是由核酸与蛋白质结合而成的复合物:a、病毒b、核糖体c、ecoli 的蛋白质生物合成70s起始物d、线粒体内膜10下列关于核糖体的叙述正确的是:a、大小亚基紧密结合任何时候都不分开。b、细胞
8、内有游离的也有与内质网结合的核糖体。c、核糖体是一个完整的转录单位。d、核糖体由两个相同的亚基组成。11 crick 的摆动假说较好的描述了:a、密码子的第三位变动不影响与反密码子的正确配对。b、新生肽链在核糖体上的延长机理。c、由链霉素引起的翻译错误。d、溶原性噬菌体经过诱导可变成烈性噬菌体。12 分离出某种病毒核酸的碱基组成为: a27, g=30%, c=22%,t=21%,该病毒应该为:a、单链 dna b、双链 dna c、单链 rna d、双链 rna 四、问答与计算:1 用 rnase t1限制降解 trna 得到一个长度为13 个核苷酸的片段,再用rnaset1完全降解得到下列
9、产物: (a)apcpapgp;(b)pgp; (c)apcpu; (d)apapupapgp 。用 rnasec i 完全降解得到下列产物:(a)apgpapapup ; (b)pgpapcp; (c)u;(d)apgpapcp ,请写出该片段的顺序。2 某 一 寡聚 十 六 核 苷 酸 , 用 rnaset1 降 解 得 到: ( a)apupupcpcpgp; (b)apcpupcpgp;(c)pupcpcpa;(d) gp各一分子。用 rnasea降解得到:(a)1apup;(b)gpgpapcp; (c)gpup;(d) 5cp; (e)2up; (f)1a。请写出该片段的顺序。3根
10、据下列性质判断某一均匀的dna 样品应有的结构:(a)可与甲醛进行反应,并且能作为dna 聚合酶的模板、热变性时 a260增加; (b)可与硝化纤维膜结合; (c)在高离子强度介质中的沉降系数比在低离于强度介质中稍高; (d)变性时在 csci中的浮力密度增加约0.011gcm3; (e) 变性后经区带离心得到a 和 b 两个片段。 a 被切开一个缺口产生c,在高离子强度介质中,c 与 a 的沉降系数相等,在低离子强度的介质中比a低,无论在哪种情况下,c 均比 b 高。4dna 样品在水浴中加热到一定温度,然后冷至室温测其od260,请问在下列情况下加热与退火前后od260的变化如何 ?(a)
11、加热的温度接近该dna 的 tm值; (b)加热的温度远远超过该dna 的 tm值。有一核酸溶液通过实验得到下列结果:(a)加热使温度升高该溶液的紫外吸收增加。迅速冷却紫外吸收没有明显的下降; (b)经 csci 梯度离心后,核酸位于1.77g/ml 溶液层。(c)核酸经热变性后迅速冷却再离心,原来的浮力密度1.77g/ml 的区带消失,新带在 1.72g/ml 出现。此带的紫外吸收只有原来的一半。将离心管里的组分重新混合,通过适当温度处理进行退火,再离心后新带消失,1.77g/ml的原带又重新出现了。其紫外吸收与变性前相同。(d)用提高 ph12 然后中和到 7 的方法代替热变性重复( c)
12、步骤,得到与(c)步骤的第一次离心后相同的结果,但经退火处理后1.72g/ml 的区带不消失。根据以上现象推断该核酸样品的结构。6如果 ecoli 染色体 dna 的 75用来编码蛋白质假定蛋白质的平均分子量为60103。请问:若 ecoli 染色体大约能编码 2000 种蛋白质。求该染色体dna 的长度是多小?该染色体 dna 的分子量大约是多少?(以三个碱基编码一个氨基酸, 氨基酸平均分子量为120u, 核苷酸平均均分子量为640计算。 )7假定每个基因有900 对核苷酸,并且有三分之一的dna 不编码蛋白质,人的一个体细胞(dna 量为 6.4109对核苷酸) , 有多少个基因?如果人体
13、有1013个细胞 那么人体 dna的总长度是多少千米?等于地球与太阳之间距离(2.2 109千米)的多少倍 ? 8根据同源蛋白质的知识,说明为什么编码同源蛋白质的基因(dna 片段)可以杂交 ? 9 有一噬菌体的突变株其dna 长度为 15m, 而野生型的 dna长度为 17m,问该突变株的 dna 中有多少个碱基缺失?10用 rnaset1降解纯 trna 样品获得一条寡核苷酸片段,用蛇毒磷酸二酯酶完全水解。可产生pa,pc,pu 和 u,其比例是 1:2:1:,根据这一信息和trna3端的特点能否推断 trna3端的核百酸顺序。11解释下列名词:(1)稀有碱基; (2)dna 超螺旋;u)
14、dna的增色和减色效应;(4)mrna 的帽子结构;(5)反密码子。答案一、是非题1 对。2 对。3 对。4 错。s对。6 错。7 错错。 9 对。10 错。11对。12 对。13 对。14 错。15 对。16 对。17 错。18 对。19 对。20 对。21 错。二、填空题l碱基核糖2trna 3 (gc)(at)4核内携带遗传信息5基因6高不变7反向平行54urn 10 8脱氧核糖的第2 位碳原子上没有羟基,不利于碱(-oh)作用使磷酸二酯键断裂。9ua 1020 60 11gcttagtagc 12卫星 dnatrna rrna单拷贝(不重复)13解开重新结合复性14起始浓度重复序列多少
15、15松弛(少绕)右扭紧(多绕)左16三叶草倒 l 形三、选择题1a 2d 3a 4a 5a 6d 7b 8a 9d 10d 11a 12a 四、问答与计算1根据 rnase t1降解 rna 生成 gp 或以 gp 为 3-末端寡核苷酸片段的特性,pgp 为该片段的5-末端, apcp为3-末端。根据 rnase i 降解 rna 生成 cp, up 或以 cp,up 为 3-末端寡核苷酸片段的特性,gpapcp 为 5-末端,u 为 3-末端。将两种酶降解的片段叠加,可得该片段的全部顺序为:pgpapcpapgpapapupapgpapcpu 2 根据 rnase t1特异性地降解 g 与相
16、邻核苷酸之间的磷酸二酯键生成 gp 或以 gp 为 3-末端寡核苷酸片段的特性,以及根据rnase a 特异性地降解 c 和 u 与相邻核苷酸之间的磷酸二酯键生成cp、up,或以 cp、up 为 3-末端寡核苷酸片段的特性,将两种酶降解的片段叠加,可得该片段的全部顺序为:apupupcpcpgpgpapcpupcpgpupcpcpa 3根据 dna 结构鉴定的一般标准,可判断dna 样品是一个由一条环状单链a 和一条线状单链b 组成的环状 dna 分子,b 链的长度短于 a,所以该环状 dna 分子具有部分单链。实验数据也表明该dna 分子具有单链性质( a,b,d,e,f) 。由 e 可知
17、a 为环状单链,只有这样,在被切开一个切口时,才能产生与其沉降系数接近的线状单链c。由于 c的沉降系数 b, a 的长度 b, 所以 a 与 b 形成环状分子,除 a 与 b 互补双链外,还有a 剩余部分的单链。(a) 加热的温度接近该dna 的 tm值,开始退火复性后的a260与变性前应完全相同,因为在接近tm值的温度时, dna的两条链并未完全分开,所以复性可以达到与变性前相同的程度。(b) 加热的温度远远超过该dna 的 tm值, 退火复性后的 a260比变性前高, 因为在远远超过 tm值的温度时, dna 的两条链完全分开复性不容易达到与变性前相同的程度。5 (a)紫外吸收随温度升高而
18、增大,迅速冷却后,紫外吸收并不降低说明此样品分子为含氢键丰富的双键结构。(b) 经 cscl 密度梯度离心后, 值较高,表明此样品中除 dna 片段外,还有rna 片段。(c)热变性后迅速离心,重新离心出现新带,这说明两条链的值不同,一条 - 1.720 是 dna 的特征带,另一条值1.80, 由于密度太大,离心时不能形成区带, 但此链仍然完整存在, 退火后重新出现就是证据。(d) 双链中 值大的一条链被碱降解说明此链是rna。综上所述,此核酸样品是由一条dna 片段和一条 rna 片段形成的杂交分子。6设 ecoli 染色体应有的碱基为x,编码蛋白质的基因片段中应有的碱基对数为:32000
19、60000120=3106=0.75x x=3106/0.75=4106(碱基对)染色体的长度 =0.34nm4106 =1.36106nm。染色体 dna 的分子量 64041062.56109 u 7每个体细胞中有:(6.41096.41091/3)/900=4.72106(个基因 ) 每个体细胞中dna 的长度: 6.41090.34nm=2.2109nm=2.2km 人体内 dna 的总长度: 2.21013千米等于地球与太阳之间距离的:(2.21013) (2.2109)=104倍8同源蛋白质是指来源不同的同一种蛋白质,它们具有基本相同的氨基酸序列,所以它们的基因具有相同的核着酸序列。当将带有同源蛋白质基因的n 八片段,进行杂交时形成杂交分子的机会就比较多。9显然,突变株的dna 比正常株的 dna 短 2m 2m2104?,2104/3.4=5.88103 所以大约有 5.88103个碱基对缺失。10trna 的功能是在蛋白质生物合成的过程中,转运氨基酸到核糖体参与肽链的形成。其3-端有一共同的序列是cca,根据蛇毒磷酸二酯酶的水解产物可以推断该trna 经 rnase t1降解的寡核苷酸片段顺序为upupcpcpa 16解释名词:(l)稀有碱基又称修饰碱基,这些碱基在核酸分子中含量比较少,但它们是天然存在不是人工合成的,是核酸合成后,进一
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