发酵工艺流程

1、.发酵工艺标准操作流程(SOP)一生产前准备每次生产前按品种配方将所需原料称重准备齐全,并确认生产原料库存量,保证原料库存量足够下次生产所需.二生产前检查1检查蒸汽、压缩空气、冷却水进出的管路是否畅通,所有阀门是否良好,并关闭所有阀门 .2检查电路、控制柜、开关的状态,确保控制柜运行正常 .3检查空压机油表油表及轴承、三角带、气缸等是否正常,确保空压机运行正常 .4检查发酵罐搅拌减速机的油量及密封轴降温水是否正常.三总过滤器灭菌当蒸汽总管路上的压力为0.2-0.25MPa 时 ,打开总过滤器进气阀输入蒸汽,同时打开出气阀的跑分阀、排气阀、排污阀,当三个阀均排出蒸汽时,调整进气阀、排污阀,稳定总

2、过滤器压力0.15-0.2MPa, 此时打开压力表下跑分,计时灭菌2-2.5 小时 .灭菌结束后启动空压机,当空气输入管道压力大于总过滤器压力时 ,关闭蒸汽阀 ,打开空气阀 ,将空气出入总过滤器 ,然后调整进气阀与排污阀 ,稳定总过滤器压力在 0.15-0.2MPa, 保持通气在 15-20 小时 ,当出气阀跑分和排污阀放出的空气为干燥空气时 ,完成灭菌 .四分过滤器灭菌1 当蒸汽管路压力为 0.2-0.25MPa 时,打开蒸汽过滤器的进气阀和排污阀 ,当蒸汽管路中无蒸汽凝结液后 ,再将蒸汽输入空气管路 ,然后打开分过滤器的进气阀、排污阀及出气阀上的跑分 ,当所有阀门均有蒸汽排出后,调整进气与

3、排污阀,是压力稳定在0.11-0.15MPa, 计时灭菌30-35 分钟 .灭菌结束后 ,关闭蒸汽过滤器进出气阀、排污阀,并立即将空气输入预过滤器,使空气通过预过滤器进入到分过滤器,再调整分过滤器排污阀使压力稳定在0.11-0.15MPa, 备用 .五发酵罐空消( 可与分过滤器灭菌同时进行)空消前先将发酵罐去垢洗净 ,添加少量清水 ,然后密封进料口 ,将排气阀打开少许 ,同事将蒸汽引入盘管 (或夹套 )进行预热 ,待罐温升到 80时 (种子罐 40即可 ),关闭盘管 (或夹套 )进气阀,再从出料口、 进气口、 取样口三路输入蒸汽 ,(蒸汽管路压力不低于 0.2-0.25MPa), 当罐内温度达

4、到125-130 时 ,通过三路蒸气浴出气阀调整罐内压力,使其稳定在0.11-0.15MPa, 计时灭菌 30-35 分钟 .空消结束后 ,关闭所有进气阀并将排气阀开大 ,当罐内压力下降至 0MPa 后,打开进料口和排污阀 ,再将发酵罐进行一次冲洗 .六发酵罐实消打开进水阀 ,按照生产要求放入所需水量,再根据生产品种按配方依次投入培养基原料,并同时打开搅拌 ,搅拌 5-10 分钟后取样 ,用氢氧化钠和浓盐酸调PH 值 7.2-7.5 之间 ,然后密封进料口将排气阀打开少许 ,同时打开盘管 (或夹套 )的进出气阀门输入蒸汽进行预热,等到罐内温度到达 80以上后 ,关闭盘管 (或夹套 )进气阀门

5、,并将排气阀关小 ,然后将蒸汽从进气口、出料口、取样口三路直接通入罐内,当罐内温度上升到121-125 后 ,打开发酵罐体上与空气进气阀上的所有跑分 ,再通过调整三路进气与排气阀将罐内压力稳定在0.11-0.15MPa, 此时开始计时灭菌 30-35 分钟 ,灭菌期间将搅拌停止.灭菌结束后 ,关闭所有进蒸汽阀门 ,将排气阀开大 ,同时开启搅拌 ,并立即打开进气阀,输入无菌空气 ,保证罐压不低于0.05-0.06MPa( 当发酵罐通入无菌空气后 ,一定注意分过滤器与空气总管路压力一定要大于发酵罐内压力),打开盘管 (或夹套) 冷却水进出阀门 (确定蒸汽出阀门关闭 ),开始降温 ,按照不同菌种接种

6、温度要求控制降温结束时间 (一般在 34左右 ),降温结束后即可接种 .七接种1 种子罐接种先将进气阀逐渐关闭,同时将排气阀开大,当罐体压力表与空气流量计降到0 刻度时 ,关闭排气阀 ,用酒精棉围在接种口四周并点燃,然后打开接种口,将制备好的菌种孢子悬浮液在火焰中直接从接种口倒入罐内,马上关闭接种口,同时迅速打开进气阀使罐内压力上升到0.05MPa以上 ,打开排气阀 ,调整进气与排气阀使罐内压力稳定在0.05-0.06MPa2 培养罐接种接种前应先将蒸汽输入接种管道,再把接种管道两端的跑分打开,当跑分都有蒸汽排出时,计时灭菌 15-30 分钟 ,灭菌结束后关闭跑分和进蒸汽阀,将种子罐排气阀关小

7、,当种子罐内压力大于培养罐压力后,先将接种管道进口阀门打开,再打开培养罐端出口阀开始接种,接种量按不同菌种生产需求控制 .接种完毕后 ,先将培养罐端出口阀关闭 ,再将接种管道进口阀关闭 ,完成接种 ,最后把种子罐所有进出气阀门关闭 ,停止搅拌 .八发酵罐培养控制接种后调整进气阀与排气阀 ,将罐内压力稳定在 0.05-0.06MPa, 同时按照不同菌种的需求调整好罐内的温度和通气量当罐内温度超出或者低于标准温度时,打开盘管或夹套进出阀门,出入冷却水或者蒸汽,等温度达到标准温度后关闭进出阀门 ,停止冷却水或者蒸汽的输入 ,这就完成了一次温度的控制调整 .通气量的控制,按照不同菌种的要求,在确保管内压力稳定的前提下,根据空气流量计的显示,通过进气阀和排气阀的调整进行通气量的调整.冬季结冰期到来以后,每次生产停止后,应把蒸汽和空气管路及发酵罐盘管或者夹套的冷凝水和冷却水排尽,排不尽的可用空气把水吹出来,以防止冻裂管路和设备,给生产造成不便.九取样与放罐取样检测时间,按照生产菌种的种类来制定12-16 小时不等 ,开始取样检测后,前期每 2 小时一次 ,后期取样时间缩短为0.5-1 小时 ,每次取样前后都要对取样口进行10-15 分钟灭菌处理,.当取样检测 , 发现符合芽孢大量形成 ,芽孢含量 70%,杂菌量 3%, 含菌量 30*108CFU/ml