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文档简介
1、24食品添加剂番茄红素(合成)1 生产工艺由用于食品的其他类胡萝卜素生产中常用的合成中间体,经过维蒂希聚合反应制备而成的合成 番茄红素。商业上用于食品的配方型番茄红素制剂,是将其配制成悬浮于食用油中的乳液或水溶型 的粉末。2性状番茄红素晶体为红色,几乎不溶于水,溶于氯仿等有机溶剂,对热、光、空气和湿度均敏感, 容易氧化。3技术要求项目指标检验方法番茄红素含量,%总番茄红素>96附录A中A 1全一反式番茄红素>70干燥失重,%<0、5GB5009 3减压干燥法铅Pb,mg/kg<1GB5009 12阿朴-12'-番茄红素醛,%<0、15附录A中A 2三苯基氧
2、膦TPPO , %<0、01附录A中A 3检验方法A.1 总番茄红素含量和全一反式一番茄红素的含量的测定A.1.1方法原理用高效液相色谱法在以下条件下测定总番茄红素含量和全-反式-番茄红素的含量A.1.2 试剂和材料注意:所有溶剂均应为色谱级A、1、2、1正己烷。A、1、2、2用0、025%寺丁基对苯二酚BHT稳定的四氢呋喃。A、1、2、3n-乙基一二异丙胺。A、1、2、4番茄红素标准品纯度95%。A.1.3 仪器和设备A、1、3、1紫外/可见分光光度计,配备1cm吸收池。A、1、3、2高效液相色谱系统,配备合适的泵、进样器、色谱柱恒温箱和积分仪。A、1、3、3色谱柱:2根相连的不锈钢柱
3、250x4、0mm。A、1、3、4固定相:Nucleosil300-5 , 5mA、1、3、5HPL(条件流速:0、8mL/min进样量:20小柱温:20 C检测波长:470nm流动相:0、15% n-乙基二异丙胺的正己烷溶液V/VA、1、3、6HPL(测定用标准溶液:精密称取番茄红素标准品5、5-6、5mg置100m量瓶中,加入特丁基对苯二酚BHT稳定的四氢呋喃5ml使溶解,用正己烷稀释至刻度。作为HPL(测定用标准品溶液。A、1、3、7分光光度测定用标准溶液:精密量取上述HPLC测定用标准溶液5、0mL置100mLt瓶中,用正己烷稀释至刻度。作为分光光 度测定用标准溶液。A、1、3、8样品
4、溶液精密称取本品4、5-5、5mg,置100mL量瓶中,加入特丁基对苯二酚BHT稳定的四氢呋喃5mL使溶解,用正己烷稀释至刻度。A.1.4 分析步骤与结果计算A、1、4、1分光光度法测定番茄红素:A、1、4、1、1分析步骤用1cm吸收池,以正己烷为空白,在最大吸收波长处大约470nm测定上述分光光度测定用标准溶液的吸收值。A、1、4、1、2结果计算:Cst(mg/1) =AxIOOOO3450A、1式中:Cst 分光光度测定用标准溶液中番茄红素的浓度mg/L;A最大吸收波长处的吸收度;3450 全一反式一番茄红素在正己烷中的吸收系数A1%m ;10000 稀释系数。A、1、4、2HPL(分析测
5、定:A、1、4、2、1分析步骤重复进样20UHPL(测定用标准溶液,记录测定出的番茄红素异构体的总峰面积除去溶剂峰 从重复进样中计算峰面积平均值,并按下式计算番茄红素响应因子RF:A、2式中:RF番茄红素的响应因子 AUxL/mg;Ast 番茄红素总峰面积的平均值AU;Cst 分光光度测定用标准溶液中番茄红素的浓度mg/L;20由分光光度测定用标准溶液制备HPLC测定用标准溶液的稀释系数;取样品溶液进样,并记录所有番茄红素异构体的峰面积。A、1、4、2、2结果计算保留时间:番茄红素异构体相对保留时间*绝对保留时间约13-顺式-番茄红素0、614min9-顺式-番茄红素0、819min全-反式-
6、番茄红素1、022min5-顺式-番茄红素1、124min*相对于全-反式-番茄红素 按下式计算总番茄红素的含量:总番茄红素 % = Atrans+A5cis+A9cis+A13cis+Axcis x 0、1X 100A 3RFX Ws式中:Atra ns 全-反式-番茄红素峰面积AU;A5cis,A9cis,和A13cis 5顺式,9顺式和13顺式番茄红素的峰面积 AU ;Axcis 如检测到其它顺式异构体的峰面积AU0、1 样品溶解的体积LRF番茄红素的响应因子 AUxl/mg丨;Ws-样品取样量mg。 按下式计算全-反式-番茄红素的含量:全-反式-番茄红素= Atrans x 0、1 x
7、 100RFX WsA.2 阿朴-12 '-番茄红素醛的测定A.2.1方法原理高效液相色谱法A.2.2 试剂注意:所有溶剂均应为色谱级A、2、2、1正己烷。A、2、2、2三乙胺TEA。A、2、2、3四氢呋喃THF。A、2、2、4用特丁基对苯二酚 BHT稳定的甲苯0、5g特丁基对苯二酚BHT溶于1000mL甲苯中 A、2、2、5阿朴-12'-番茄红素醛也叫番茄红素C25-醛标准品。A.2.3 仪器和设备A、2、3、1高效液相色谱系统,配备合适的泵、进样器和积分仪A、2、3、2色谱柱:不锈钢柱200x4、0mnA、2、3、3 固定相:硅胶 NucleosilSi1003 心A、2、
8、3、4检测器:紫外/可见分光光度计,或可见分光光度计A、2、3、5HPL(条件: 流速:2、0mL/min 进样量:5、0L 检测波长:435nm 流动相:A正己烷B正己烷:三乙胺99、9:0、1 V/VC正己烷:四氢呋喃80:20 V/V梯度:时间,分钟A%B%C%080200166020202240204024、580200A、2、3、6标准品溶液精密称取阿朴-12'-番茄红素醛对照品14、5-15、5mg,置50mL量瓶中,用特丁基对苯二酚BHT 稳定的甲苯溶解并稀释至刻度。精密量取 2mL置100mLS瓶中,用特丁基对苯二酚BHT稳定的甲 苯稀释至刻度。A、2、3、7样品溶液精
9、密称取本品29、0-31、0mg置10mL量瓶中,用特丁基对苯二酚 BHT稳定的甲苯溶解并稀释至刻度,将该溶液超声处理10min。A.2.4 结果阿朴-12'-番茄红素醛的保留时间约为14min ,其相对于全一反式一番茄红素的相对保留时间为1、6。A.2.5 计算:阿朴-12'-番茄红素醛= AsX Wstx 10X 100A 4Ast X WSX 2500式中:As样品峰面积;Ast 标准品峰面积;Wst标准品取样量mg;Ws样品取样量mg ;10 样品溶解的体积ml;2500 对照品溶解体积50mL乘以稀释倍数50。A.3 三苯基氧膦TPPO的测定A.3.1方法原理在以下条
10、件下用 HPLC方法检测。A.3.2 试剂A、3、2、1正己烷。A、3、2、2异丙醇。A、3、2、3四氢呋喃THF。A、3、2、4三苯基氧膦TPPO纯度99%注意:所有试剂均应是色谱级。A.3.3仪器和设备A、3、3、1高效液相色谱系统,配备合适的泵、进样器和积分仪。A、3、3、2色谱柱:不锈钢柱150X 4、 6mm。A、3、3、3固定相:硅胶基柱 SupelcosilLc-Si,5卩m或类似的柱。A、3、3、4检测器:紫外检测器。A、3、3、5HPLC条件:柱温:20C。流动相:异丙醇:正己烷1:24V/V。流速:1、5mL/min。进样量:50卩L。检测波长:210 nm。TPPC的保留时间大约为 8、1min。A.3.4分析步骤标准溶液:精密称取 10mg的TPPC标准品,用THF四氢呋喃溶解,定量移入1000mL容量瓶中,用四氢呋喃稀释至刻度。样品溶液:精密称取 1000mg的样品,用四氢呋喃溶解,定量移入10
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