葛根素对2型糖尿病大鼠的膀胱保护作用

1、葛根素对2型糖尿病大鼠的膀胱保护作用曾祥建万芙蓉冯建华邓丽萍乐有为（深圳市龙岗中心医院518116）【摘要】目的研究葛根素对糖尿病大鼠的膀胱保护作用。方法sd大鼠分为正 常对照组、糖尿病组、糖尿病大鼠葛根素干预组三组。以高糖高脂饮食及小剂量 连麻佐菌素（30mg/kg）制备2型糖尿病大鼠模型。16周后光镜下观察膀胱逼 尿肌在常规he染色和石蜡切片明胶镀银染色的改变。结果 糖尿病组大鼠与正 常对照组差异明显，治疗组较糖尿病组明显下降。结论 在2型糖尿病大鼠中， 葛根素具有保护膀胱逼尿肌功能。【关键词】糖尿病糖尿病膀胱病葛根素【中图分类号】r965【文献标识码】a【文章编号2095-1752 （

2、2012 ） 15-0027-02 糖尿病膀胱病（diabetic cystopathy, dcp）亦称为糖尿病神经原性膀胱（diabetic neurogenic bladder, dnb）是糖尿病引起的泌尿系统一种严重并发症。 dcp是糖尿病患者的常见病发症，其发病率约为25%85%lo dcp的发病率 与患者的年龄及性别没有直接关系，发病率随着糖尿病疾病的病程延长而增加, 糖尿病患者10年病程大约有25%的发牛率，超过25年的则发病率大于50%2o dcp膀胱结构的改变以及神经病变是目前公认的dcp病因，因此通过葛根素作用 于实验性糖尿病大鼠，研究经过葛根素治疗后糖尿病大鼠膀胱逼尿肌形态

3、的变化 情况，为防治糖尿病膀胱病寻求一种良好的途径。1材料与方法1.1材料1.1.1实验大鼠sprague dawley （sd）雌性大鼠40只（暨南大学医学院 动物中心提供），体重200g-250g,经12： 12h光照和黑暗循环以及充足的水和食 物适应性喂养1周后用于实验。1.1.2标准大鼠饲料、高糖高脂饲料（提供公司沈阳嘉乾程牛物科技）；链嫌佐菌素（stz）（提供公司sigma公司）。1.2方法1.2.1 t2dm大鼠模型的建立及实验分组sd雌性大鼠40只经12： 12h 光照和黑暗循环以及充足的水和食物适应性喂养1周后随机分为正常对照组（16 只）、糖尿病组（24只）。正常对照组喂养标

4、准大鼠饲料，糖尿病组喂养高糖高脂 饲料（其中含蔗糖10%,熟猪油15%,胆固醇2%,胆酸0.25%）,喂养4周后糖 尿病组空腹18-24小时腹腔注射小剂量链月尿佐菌素（stz）30mg/kg（用前以ph4.4 0.1mol/l柠檬酸柠檬酸钠缓冲液配成0.75%的浓度），正常对照组仅注射柠檬酸 柠檬酸钠缓冲液。注射stz后的第4周，选择空腹血糖大于正常大鼠空腹血糖 +3个标准差，口腆岛素敏感性降低者确定为t2dm大鼠纳入实验。对照组给普 通饲料，腹腔内注射等体积的枸椽酸缓冲液。连续4周尾静脉血葡萄糖浓度 >167mmol/l,模型成功24只。在模型成功的ii型糖尿病大鼠中随机再分为

5、 糖尿病无干预组（12只），葛根素干预组（12只），葛根索按80mg/kg每日腹腔 注射1次。对照组正常饲料喂养。16周后制备逼尿肌标本进行光镜观测。1.3标本的收集与处理大鼠分别于糖尿病组大鼠的实验终体重和空腹 血糖值。处死后测量膀胱湿垂，并用膀胱湿重与相应人鼠体重的比值作为膀胱相 对重量。1.4标本的制备及观察方法常规苏木素伊红（he）染色、常规石蜡切片 明胶镀银染色，在低倍镜和高倍镜下观察苏木素伊红（he）染色下膀胱粘膜、固有 层及膀胱肌层异同。常规观察，实验组与对照组对照观察。石蜡切片明胶镀银染 色中观察神经纤维的改变情况。1.5统计学处理结果应用spss13.0统计软件包进行数据分析

6、，以均值 ±标准差（x-±s）表示，组间比较应用方差分析。2结果2.1.1苏木素伊红（he）染色正常组：低倍镜下对照组可见膀胱粘膜皱襲明显，上皮移行细胞排列均 匀，核圆形位于细胞中央，一般分为23层，固有层血管神经多见，肌层增厚, 可见纵形肌，环形肌，平滑肌横断以及纵行切断的肌束排列整齐。肌束之间结构 紧密，间隙可见大量结缔组织。少许紊乱，肌束体积增加外形饱满。肌束间隙明 显增宽，间隙间可见少量胶原纤维。糖尿病组以上所述形态改变较治疗组明显变 重，膀胱粘膜皱嬖较前明显减少，上皮细胞厚度减小，固有层血管减少、胶原增 加，逼尿肌基底层明显变薄，逼尿肌肌束

7、排列较紊乱，肌束外形明显体积。肌束 之间间隙加大，间隙间血管神经减少，肌束间胶原纤维增多。2.1.2石蜡切片明胶镀银染色在石蜡切片明胶镀银染色中神经末梢为黑色，神经胶质纤维为蓝黑色。 对照组大鼠粘膜下、肌间中染成黑色和蓝黑色的神经纤维多见。治疗组人鼠膀胱 标本显示肌肉间神经纤维也减少。糖尿病组逼尿肌肌束间隙间神经纤维较对照组 及治疗组明显减少，细小的神经纤维少见。2.2对照组与糖尿病大鼠组不同吋段的体重、膀胱湿重和血糖值相应 时间糖尿病大鼠比正常组及膀胱膀胱重量增加明显(p<0.01),而且膀胱相对重量 增加更显著(p<0.01)o见表表对照组与糖尿病大鼠组不同时段的体重、膀胱湿重

8、和血糖值*同一时间对照组与糖尿病大鼠组有显著性差异p<0.013讨论糖尿病神经原性膀胱是糖尿病常见的并发症之一。被认为是代谢紊乱, 神经缺血等多种因素综合作用的所致。糖尿病神经系统并发症的原因与胰岛素缺 乏和血糖代谢紊乱有关，营养神经的小血管改变及神经本身改变可引起本病。糖 尿病周围神经病变中，微血管受损及血流动力学异常造成的神经组织缺血、缺氧 所致神经组织损害是主要原因之一 3。葛根素是从豆科多年生落叶藤木植物的 干燥根中提取的中成药，能逆转胰岛素抵抗、抗血小板聚集、扩张血管、疏通微 循环，改善周围神经及环境的缺血缺氧症状，提高神经传导速度。葛根素还可用 于糖尿病的降糖治疗，许多治疗糖

9、尿病的中成药组方中均含有葛根素成分，并取 得了好的疗效4。本试验中给予葛根素治疗后，治疗组逼尿肌肌束间隙间神经 纤维较对照组及明显增加，与对照组接近。而糖尿病组中神经纤维少见，且膀胱 逼尿肌形态较治疗组及对照组也存明显差异。随着葛根素生物学作用的机制的继 续深入研究，将为葛根素防治糖尿病膀胱病及其它相关疾病提供可靠的科学依据。参考文献李维仁，丁国富,王勤章糖尿病膀胱病变的研究进展国际泌尿系统杂志,2007,27(6):517-520.2 frimodt-moller c. diabetic cystopathy epidemiology and related disorders. ann inte