第五章黄酮化合物

1、天然药物化学天然药物化学天然药物化学天然药物化学Chapter 5 Flavonoids第五章 黄酮类化合物 天然药物化学天然药物化学 第一节第一节 概述概述 第二节第二节 黄酮类化合物的理化性质及显色反应黄酮类化合物的理化性质及显色反应 第三节第三节 黄酮类化合物的提取与分离黄酮类化合物的提取与分离 第四节第四节 黄酮类化合物的检识与结构鉴定黄酮类化合物的检识与结构鉴定 第五节第五节 结构研究实例结构研究实例本章内容天然药物化学天然药物化学第一节 概 述 黄酮类化合物广泛存在于自然界。黄酮类化合物广泛存在于自然界。 黄酮类化合物多具颜色。黄酮类化合物多具颜色。 在自然界中，黄酮类化合物的主要

2、存在形式是在自然界中，黄酮类化合物的主要存在形式是 与糖结合成苷，也有游离体。与糖结合成苷，也有游离体。 黄酮类化合物的生理活性多种多样；截止黄酮类化合物的生理活性多种多样；截止2008 年，总数超过年，总数超过11000个。个。天然药物化学天然药物化学 黄酮类化合物黄酮类化合物（Flavonoids）主要是指基本母核为主要是指基本母核为 2-苯基色原酮类化合物。苯基色原酮类化合物。 （狭义）（狭义）OO12345678135246ACBOO12345678色原酮色原酮 (chromone)2-苯基色原酮苯基色原酮（2-phenyl-chromone)（一）（一） 定义定义一、基本结构与分类一

3、、基本结构与分类天然药物化学天然药物化学 黄酮类化合物泛指两个具有酚羟基的苯环（黄酮类化合物泛指两个具有酚羟基的苯环（A-与与B-环）通过中央的三碳原子相互连接而形成的一系列的环）通过中央的三碳原子相互连接而形成的一系列的化合物。化合物。（广义）（广义）O12345678913524610ACB8a4aC6 - C3 - C6天然药物化学天然药物化学主要黄酮类化合物结构类型：主要黄酮类化合物结构类型：（二）（二） 分类分类天然药物化学天然药物化学其他黄酮类化合物结构类型：其他黄酮类化合物结构类型：天然药物化学天然药物化学黄酮类黄酮类Flavones木樨草素，木樨草素，存在于金银花中存在于金银花

4、中有抗菌和抗病毒活性有抗菌和抗病毒活性OOOOHOOHOHOH天然药物化学天然药物化学黄酮醇类黄酮醇类Flavonols槲皮素槲皮素, 具有抗炎、止咳祛痰等作用。具有抗炎、止咳祛痰等作用。槲皮素片用于治疗支气管炎。此外还槲皮素片用于治疗支气管炎。此外还有降低血压、增强毛细血管抵抗力、有降低血压、增强毛细血管抵抗力、减少毛细血管脆性、降血脂、扩张冠减少毛细血管脆性、降血脂、扩张冠状动脉、增加冠脉血流量等作用状动脉、增加冠脉血流量等作用OOOHOOHOOHOHOHOHOOOHOHOHOH山奈素，山奈素，存在于姜科植物山奈中存在于姜科植物山奈中抗癌、抑制生育、抗炎、抗氧化抗癌、抑制生育、抗炎、抗氧化

5、剂、解痉、抗溃疡、利胆利尿剂、剂、解痉、抗溃疡、利胆利尿剂、止咳等止咳等活性活性天然药物化学天然药物化学 淫羊藿苷能增加心脑血淫羊藿苷能增加心脑血管血流量、促进造血功管血流量、促进造血功能、免疫功能及骨代谢，能、免疫功能及骨代谢，具有补肾壮阳、抗衰老、具有补肾壮阳、抗衰老、抗肿瘤等功效抗肿瘤等功效 天然药物化学天然药物化学二氢黄酮类二氢黄酮类Flavanones橙皮苷，存在于陈皮橙皮苷，存在于陈皮中可降低血管脆性中可降低血管脆性OOOOOOHOCH3OHrutinoseOOOHOHHO天然药物化学天然药物化学益肝灵片 OOHHOOOHOOOCH3CH2OHOH二氢黄酮醇类二氢黄酮醇类Flava

6、nonols水飞蓟素，存在于水飞蓟中水飞蓟素，存在于水飞蓟中水飞蓟素是二氢黄酮醇与苯丙素水飞蓟素是二氢黄酮醇与苯丙素衍生物缩合成的黄酮木脂素类成衍生物缩合成的黄酮木脂素类成分。具有保肝作用，用于治疗急、分。具有保肝作用，用于治疗急、慢性肝炎及肝硬化，代谢中毒性慢性肝炎及肝硬化，代谢中毒性肝损伤。肝损伤。OOOH天然药物化学天然药物化学查耳酮类查耳酮类Chalcones甘草查耳酮甘草查耳酮 A，抗癌活性，抗癌活性HOOOHOCH3O红花的颜色变化红花的颜色变化红花苷有活血化瘀、凉血解毒、解郁安神、红花苷有活血化瘀、凉血解毒、解郁安神、抗肿瘤、抗肾病、抑制心脏、收缩血管、降抗肿瘤、抗肾病、抑制心脏

7、、收缩血管、降低血压活性低血压活性天然药物化学天然药物化学 中药红花中的红花苷为查耳酮类。红花在开花中药红花中的红花苷为查耳酮类。红花在开花初期时，花中主要成分为无色的新红花苷（二氢黄初期时，花中主要成分为无色的新红花苷（二氢黄酮类）及微量红花苷，故花冠是淡黄色；开花中期酮类）及微量红花苷，故花冠是淡黄色；开花中期花中主要成分为黄色的红花苷，故花冠为深黄色；花中主要成分为黄色的红花苷，故花冠为深黄色；开花后期则变成红色的醌式红花苷，故花冠为红色。开花后期则变成红色的醌式红花苷，故花冠为红色。 OOHOHOHOOglcOHOHOHOHOOglcOOHOOHOOglc异构化氧化酶SO2天然药物化学

8、天然药物化学二氢查耳酮类二氢查耳酮类Dihydrochalcones梨根苷梨根苷O天然药物化学天然药物化学异黄酮类异黄酮类IsoflavonesOO葛根总黄酮具有扩冠、增加冠脉流葛根总黄酮具有扩冠、增加冠脉流量及降低心肌耗氧量等作用。大豆量及降低心肌耗氧量等作用。大豆素具有类似罂粟碱的解痉作用。素具有类似罂粟碱的解痉作用。大豆苷、葛根素及大豆素均能缓解大豆苷、葛根素及大豆素均能缓解高血压患者的头痛等症状。高血压患者的头痛等症状。天然药物化学天然药物化学大豆异黄酮 流行病学资料表明，长期流行病学资料表明，长期，。在日本，乳。在日本，乳腺癌的发病率是美国的腺癌的发病率是美国的1/41/4；妇女更年

9、期综合症的发病率只有美；妇女更年期综合症的发病率只有美国的国的1/31/3；这个现象已引起科学家的注意。；这个现象已引起科学家的注意。，能产生类似雌激，能产生类似雌激素的效应，而被称之为素的效应，而被称之为“植物雌激素植物雌激素”。 对身体雌激素的对身体雌激素的双向调节作用双向调节作用。当人体内雌激素水平低时，大。当人体内雌激素水平低时，大豆异黄酮占据雌激素受体，发挥弱雌激素效应，表现出提高雌豆异黄酮占据雌激素受体，发挥弱雌激素效应，表现出提高雌激素水平的作用。当人体内雌激素水平高时，大豆异黄酮以激素水平的作用。当人体内雌激素水平高时，大豆异黄酮以“竞争竞争”方式占据受体位置，同样发挥弱雌激素

10、效应，但由于方式占据受体位置，同样发挥弱雌激素效应，但由于它的活性仅为体内雌激素的它的活性仅为体内雌激素的2%2%，因而从总体上表现出降低体内，因而从总体上表现出降低体内雌激素水平的作用，这就是著名的大豆异黄酮对雌激素的双向雌激素水平的作用，这就是著名的大豆异黄酮对雌激素的双向调节作用机制。调节作用机制。OOHOOHRHOOH天然药物化学天然药物化学大豆异黄酮天然药物化学天然药物化学二氢异黄酮类二氢异黄酮类IsoflavanonesOOOOOCH3OCH3鱼藤酮鱼藤酮豆科苦楝藤属植物鱼藤豆科苦楝藤属植物鱼藤 毒鱼、杀虫毒鱼、杀虫OOOCH3OOOO紫檀素紫檀素抗癌活性抗癌活性广豆根广豆根天然药

11、物化学天然药物化学花色素类花色素类Anthocyanidins 花色素是使植物花、果、花色素是使植物花、果、叶、茎等呈现蓝、紫、叶、茎等呈现蓝、紫、红等色的色素，广泛的红等色的色素，广泛的分布于被子植物中，尤分布于被子植物中，尤以矢车菊素、飞燕草素以矢车菊素、飞燕草素和天竺素以及它们所组和天竺素以及它们所组成的苷常见成的苷常见OOH+矢车菊素：矢车菊素：R1 = OH, R2 = H广泛分布于被子植物广泛分布于被子植物飞燕草素：飞燕草素：R1 = R2 = OH天竺葵素：天竺葵素：R1 = R2 = H锦葵花素：锦葵花素：R1 = R2 = OCH3紫甘薯花色素颜色随紫甘薯花色素颜色随PH值值

12、变化而变化变化而变化矢车菊素、芍药素等矢车菊素、芍药素等天然药物化学天然药物化学黄烷黄烷-3-醇类醇类Flavan-3-ols儿茶素，存在于中药儿茶叶中儿茶素，存在于中药儿茶叶中保肝作用，抗癌活性保肝作用，抗癌活性OOH天然药物化学天然药物化学黄烷黄烷-3,4-二醇类二醇类Flavan-3,4-diols原菲瑟定原菲瑟定OOHOHOHOOHOHOHOHOOHOHOHOHOHOHOH无色飞燕草素无色飞燕草素天然药物化学天然药物化学双苯吡酮类双苯吡酮类口口山酮类山酮类XanthonesOOHOOHglcOHOH芒果苷，胰岛素增敏芒果苷，胰岛素增敏剂剂OOOOHOHOOHOHglcR2R1OOOOO

13、HOHprenylR31、R1=COOH, R2=Me, R3=H2、R1= Me, R2= COOH, R3=genryl中药藤黄中药藤黄(Garcinia hanburyi)中成分中成分抗肿瘤活性抗肿瘤活性天然药物化学天然药物化学橙酮类橙酮类AuronesOCHOHOOHOH硫磺菊素硫磺菊素OOCH天然药物化学天然药物化学高异黄酮类高异黄酮类HomoisoflavonesOOHOOHOOH3C麦冬黄酮甲麦冬黄酮甲OO天然药物化学天然药物化学OOHOOHOCH3OOHOOHOCH3双黄酮双黄酮Biflavonoids异银杏素异银杏素OOHOOHOHOHOOHHOO柏黄酮柏黄酮天然药物化学天然

14、药物化学 羟基羟基 甲氧基甲氧基 亚甲二氧基亚甲二氧基 -OCH2O- 异戊烯基异戊烯基 常和糖形成苷常和糖形成苷（三）黄酮类化合物中常见的取代基（三）黄酮类化合物中常见的取代基天然药物化学天然药物化学黄酮苷：黄酮苷： 糖的种类：糖的种类：v 单糖苷单糖苷v 双糖苷双糖苷v 叁糖苷叁糖苷v 酰化糖苷酰化糖苷 糖的连接方式：糖的连接方式：v O-糖苷糖苷v C-键苷键苷葛根素（葛根素（puerarin）豆科植物葛和野葛的根中含有的葛根素豆科植物葛和野葛的根中含有的葛根素有明显的扩张冠状动脉，增加冠脉流量，有明显的扩张冠状动脉，增加冠脉流量，降低血压的作用。降低血压的作用。化合物即为异黄酮的碳苷，

15、化合物即为异黄酮的碳苷，8-位直接与位直接与葡萄糖相结合。葡萄糖相结合。OOOHHOOHOHOHOOH天然药物化学天然药物化学中文名中文名英文名英文名缩写缩写D-葡萄糖葡萄糖D-glucoseD-GlcD-半乳糖半乳糖D-galactoseD-GalD-甘露糖甘露糖D-mannoseD-ManD-葡萄糖醛酸葡萄糖醛酸D-glucuronic acidD-GluAD-半乳糖醛酸半乳糖醛酸D-galacturonic acidD-GalAL-鼠李糖鼠李糖L-rhamnoseL-RhaL-阿拉伯糖阿拉伯糖L-arabinoseL-AraD-木糖木糖D-xyloseD-Xyl黄酮苷中常见的单糖黄酮苷中

16、常见的单糖天然药物化学天然药物化学中文名中文名英文名英文名芸香糖芸香糖rutinose -L-Rha-(16)-D-Glc新橙皮糖新橙皮糖neohesperidose -L-Rha-(12)-D-Glc槐糖槐糖sophorose -D-Glc-(12)-D-Glc龙胆双糖龙胆双糖gentiobiose -D-Glc-(16)-D-Glc黄酮苷中常见的双糖黄酮苷中常见的双糖天然药物化学天然药物化学（四）黄酮类化合物命名（四）黄酮类化合物命名母核加上取代基母核加上取代基OO12345678123456OHOHHO7, 3 , 4 -三羟基黄酮三羟基黄酮7, 3 , 4 -trihydroxyfla

17、vone5, 7, 3 -三羟基三羟基-4 -甲氧基二甲氧基二氢黄酮氢黄酮5, 7, 3 -trihydroxy- 4 -methoxy-flavanoneOOOHHOOHOCH3天然药物化学天然药物化学OOOOHglc4 -羟基黄酮羟基黄酮-7-O- -D-葡萄糖苷葡萄糖苷4 -hydroxy-flavone-7-O- -D-glucosideOOOOHOOOCH34 -羟基黄酮羟基黄酮-7-O-鼠李糖基（鼠李糖基（ 16 ）葡萄糖苷）葡萄糖苷4 -hydroxy-flavone-7-O- -L-rhamnosyl （16） -D-glucoside天然药物化学天然药物化学二、黄酮类化合物的

18、生物合成基本途径二、黄酮类化合物的生物合成基本途径COOHNH2COCoACOOOOCOAOH*OHOHHOOOH*OOHHOOOH*PALCoA1. cinnamic acid4-hydroxylase2.CH2COCoACOOHCHSisomerase PAL：酪氨酸裂解酶；：酪氨酸裂解酶；CoA:辅酶；辅酶；cinnamic acid -4-hydroxylase:肉桂酸肉桂酸-4-羟化酶；羟化酶； CHS：查尔酮合成酶；：查尔酮合成酶； 天然药物化学天然药物化学OOHOOHOHOHOOOHOOHOHOHOHOHOOHOHOHOHOOHOOHOHOHOHOHOHOOHOHOHOOHOer

19、iodictyoldihydroquercetinquercetincyanidin黄酮醇、花青素类生物合成途径黄酮醇、花青素类生物合成途径天然药物化学天然药物化学OHOHOOHO-eOHHOOOHO-eOHHOOOOOOOHOOHHOHOOHOOH异黄酮的生物合成途径异黄酮的生物合成途径天然药物化学天然药物化学OHOOHOOOHOHrutinoseOOOHOOHOCH3rutinose芦丁、槲皮素、葛根素等：扩冠作用，临床用于治疗冠心病芦丁、槲皮素、葛根素等：扩冠作用，临床用于治疗冠心病。芦丁芦丁橙皮苷橙皮苷（一）对心血管系统的作用（一）对心血管系统的作用芦丁、橙皮苷、芦丁、橙皮苷、d-儿茶

20、素等：维生素儿茶素等：维生素P样作用，降低样作用，降低血管脆性及异常的通透性，可用作防治高血压及动血管脆性及异常的通透性，可用作防治高血压及动脉硬化的辅助治疗剂。脉硬化的辅助治疗剂。 三、黄酮类化合物的生理活性三、黄酮类化合物的生理活性天然药物化学天然药物化学OOOOHOCH3HOOHOOHCH2OH 水飞蓟素水飞蓟素（临床用来治疗急性、慢性肝炎，肝硬化及代谢中毒性肝损伤）（临床用来治疗急性、慢性肝炎，肝硬化及代谢中毒性肝损伤）天然药物化学天然药物化学OOH3COOOOHOHHOHHOOHOH 紫檀素紫檀素 儿茶素儿茶素 （三）抗癌作用（三）抗癌作用天然药物化学天然药物化学 Flavopiri

21、dol是一种源于植物是一种源于植物(Cdysoxylum Binectarferum)的的黄酮类化合物黄酮类化合物Rohitukine类似物。类似物。 在在NIH大规模抗癌物筛选中，大规模抗癌物筛选中，Flavopiridol脱颖而出，成为一脱颖而出，成为一种新的低毒性的研究药物。它种新的低毒性的研究药物。它的治癌机理被认为是作用于激的治癌机理被认为是作用于激酶，从而阻断细胞循环。酶，从而阻断细胞循环。 目前正被用于二期的癌症临床目前正被用于二期的癌症临床试验。最近，不同的研究者证试验。最近，不同的研究者证实其对艾滋病也有异于其他药实其对艾滋病也有异于其他药物的疗效。物的疗效。Flavopir

22、idol天然药物化学天然药物化学（四）雌性激素样作用（四）雌性激素样作用R1=R2=H, 大豆素大豆素R1=OH, R2=H, 染料木素染料木素R1=OH, R2=CH3, 金雀花异黄素金雀花异黄素己烯雌酚己烯雌酚OOOR2HOOHHOR1天然药物化学天然药物化学（五）抗菌及抗病毒作用（五）抗菌及抗病毒作用 木犀草素、黄芹苷等：一定程度的抗菌作用木犀草素、黄芹苷等：一定程度的抗菌作用 槲皮素、二氢槲皮素及山萘酚等：抗病毒作用槲皮素、二氢槲皮素及山萘酚等：抗病毒作用（六）解痉作用（六）解痉作用 异甘草素及大豆素等具有类似罂粟碱解除平滑肌痉异甘草素及大豆素等具有类似罂粟碱解除平滑肌痉挛作用，大豆苷

23、、葛根黄素等葛根黄酮类成分可以挛作用，大豆苷、葛根黄素等葛根黄酮类成分可以缓解高血压患者的头痛等症状。缓解高血压患者的头痛等症状。 （七）泻下作用（七）泻下作用天然药物化学天然药物化学 一、性状一、性状性状：多为结晶性固体，少数（如黄酮苷类）为性状：多为结晶性固体，少数（如黄酮苷类）为 无定形粉末。无定形粉末。旋光性：二氢黄酮、二氢黄酮醇、黄烷及黄烷醇有旋光性：二氢黄酮、二氢黄酮醇、黄烷及黄烷醇有旋光性。苷类由于在结构中引入糖的分子，故均有旋光性。苷类由于在结构中引入糖的分子，故均有旋光性，且多为左旋。旋光性，且多为左旋。 第二节第二节 黄酮类化合物的理化性质黄酮类化合物的理化性质 及显色反应

24、及显色反应天然药物化学天然药物化学颜色：颜色：黄酮类化合物的颜色与分子中是否存在交叉黄酮类化合物的颜色与分子中是否存在交叉共轭体系及助色团（共轭体系及助色团（-OH，-CH3）等的类型，数目）等的类型，数目以及取代位置有关。以及取代位置有关。 7-位或位或4-位引入位引入-OH、-OCH3等供电基，而使化合物的颜色加深。等供电基，而使化合物的颜色加深。OOOOOO+_+天然药物化学天然药物化学黄酮、黄酮醇及其苷类：灰黄黄酮、黄酮醇及其苷类：灰黄黄色；黄色；查耳酮查耳酮:黄黄橙黄色橙黄色;二氢黄酮、二氢黄酮醇二氢黄酮、二氢黄酮醇:不显色不显色异黄酮类：显微黄色异黄酮类：显微黄色花色苷及其苷元：红

25、（花色苷及其苷元：红（pH8.5）天然药物化学天然药物化学溶于水、乙醇、甲醇等强极性溶剂中，羟基越多，溶于水、乙醇、甲醇等强极性溶剂中，羟基越多，糖链越长，则水溶性越大。糖链越长，则水溶性越大。 二、溶解度二、溶解度苷元：苷元：难溶或不溶于水，易溶于有机溶剂及稀碱液中。难溶或不溶于水，易溶于有机溶剂及稀碱液中。黄酮、黄酮醇、查尔酮等平面型分子难溶于水；黄酮、黄酮醇、查尔酮等平面型分子难溶于水；二氢黄酮、二氢黄酮醇等因系非平面型分子，二氢黄酮、二氢黄酮醇等因系非平面型分子， 水溶性稍大。水溶性稍大。黄酮苷：黄酮苷：天然药物化学天然药物化学因分子中多有酚羟基，故显酸性，可溶于碱性水因分子中多有酚羟

26、基，故显酸性，可溶于碱性水溶液、吡啶、甲酰胺及二甲基甲酰胺中。酚羟基溶液、吡啶、甲酰胺及二甲基甲酰胺中。酚羟基数目及位置对酸性影响：数目及位置对酸性影响：三、酸性和碱性三、酸性和碱性（一）酸性（一）酸性7，4 -二二OH7或或4 -OH一般酚一般酚OH5-OH7或或4 -OH 5-OH 一般酚一般酚OHOOOOOO+_+_ _+天然药物化学天然药物化学酸性：酸性：3142OHOOOH32OOHOHO1OOHOOH4OHOOOH天然药物化学天然药物化学 （二）（二） 碱性碱性 -吡喃酮环上的吡喃酮环上的1-位氧原子，因有未共用的电子对，故位氧原子，因有未共用的电子对，故表现微弱的碱性，可与强无机

27、酸，如浓硫酸、盐酸等生成表现微弱的碱性，可与强无机酸，如浓硫酸、盐酸等生成盐，但生成的盐，但生成的钅羊钅羊盐极不稳定，加水后即可分解。盐极不稳定，加水后即可分解。 黄酮类化合物溶于浓黄酮类化合物溶于浓H2SO4中生成的盐，常常表现特殊中生成的盐，常常表现特殊的颜色，可用于鉴别。的颜色，可用于鉴别。 某些甲氧基黄酮溶于浓盐酸中显深黄色，且可与生物碱某些甲氧基黄酮溶于浓盐酸中显深黄色，且可与生物碱沉淀试剂生成沉淀。沉淀试剂生成沉淀。OOOOHClHClH2O天然药物化学天然药物化学四、显色反应四、显色反应1. 盐酸盐酸-镁粉反应镁粉反应 （一）还原反应（一）还原反应黄酮（醇）、二氢黄酮（醇）：橙红

28、黄酮（醇）、二氢黄酮（醇）：橙红紫红色紫红色OOOH+Mg+HClHO+OHOHCl-O+OHOOHCl-Cl-黄黄酮酮醇醇花花色色苷苷元元（红红色色，约约占占2 20 0% %）双双花花色色苷苷元元（红红色色，主主产产物物）天然药物化学天然药物化学2. 四氢硼钠反应四氢硼钠反应二氢黄酮（醇）类化合物：红二氢黄酮（醇）类化合物：红紫红色紫红色OHOOHHHHHOHOOHOOHHHHHOCHOHCHCHOHX-OHCHHOCHCHOHX-H+-H2ONaBH4红色或紫红色红色或紫红色天然药物化学天然药物化学OHOOOHOOHOH（二）金属盐类试剂的络合反应（二）金属盐类试剂的络合反应有上述结构的

29、化合物与铝盐，铅盐，锆盐，镁盐有上述结构的化合物与铝盐，铅盐，锆盐，镁盐等试剂反应生成有色络合物。等试剂反应生成有色络合物。天然药物化学天然药物化学OOOOOOOOAlAlOOAl ClCl2Cl21. 三氯化铝显色反应三氯化铝显色反应与与AlCl3反应显黄色或黄色加深，反应显黄色或黄色加深，UV下呈现荧下呈现荧光增强。光增强。天然药物化学天然药物化学2. 镁盐（镁盐（Mg(OAc)2）二氢黄酮（醇）：紫外灯下呈天蓝色荧光。二氢黄酮（醇）：紫外灯下呈天蓝色荧光。3. 铅盐铅盐 黄黄红色沉淀红色沉淀 醋酸铅（醋酸铅（Pb(OAc)2）：邻二酚羟基黄酮）：邻二酚羟基黄酮 碱式醋酸铅（碱式醋酸铅（P

30、b(OH)(OAc)）：所有黄酮）：所有黄酮天然药物化学天然药物化学OOOZrHOOHOHOHOClH2O3-或或5-OH黄酮：生成黄色络合物黄酮：生成黄色络合物3-OH络合物比络合物比5-OH络合物稳定络合物稳定加入枸橼酸（柠檬酸）加入枸橼酸（柠檬酸） 5-OH络合物解离络合物解离 4. 4. 锆盐锆盐-枸橼酸显色反应枸橼酸显色反应 二氯氧锆（二氯氧锆（ZrOCl2 ）天然药物化学天然药物化学OOHOOHOHOHOOOHHOOHOHOOHOOHOHOOOHHOOHOHOHCABD用显色反应鉴别下列化合物：用显色反应鉴别下列化合物：天然药物化学天然药物化学OSrO+H2OOHOHSr2+/ O

31、H-酚羟基化合物：酚羟基化合物：含有氢键缔合的酚羟基：颜色才明显含有氢键缔合的酚羟基：颜色才明显在氨性甲醇溶液中，邻二酚羟基黄酮类化合在氨性甲醇溶液中，邻二酚羟基黄酮类化合物生成绿色物生成绿色棕色棕色黑色沉淀。黑色沉淀。5. 氨性氯化锶（氨性氯化锶（SrCl2）反应）反应6. 三氯化铁（三氯化铁（FeCl3）反应）反应天然药物化学天然药物化学COHCCOOOOHOHO 5-羟基黄酮羟基黄酮 2 -羟基查耳酮羟基查耳酮（三）硼酸显色反应（三）硼酸显色反应在酸性条件下与硼酸反应，在酸性条件下与硼酸反应，生成亮黄色。生成亮黄色。天然药物化学天然药物化学OOOHOHOHOOHOCH3OCH3OHOHH

32、OOH-H+（四）碱性试剂显色反应（四）碱性试剂显色反应显黄色或黄色加深，显黄色或黄色加深，UV下显荧光或荧光增强。下显荧光或荧光增强。1. NaOH2. NH4OH：处理后的变色在空气中褪去。：处理后的变色在空气中褪去。 天然药物化学天然药物化学盐酸盐酸-镁粉：镁粉：四氢硼钠：四氢硼钠：AlCl3反应：反应：Mg(OAc)2反应：反应：ZrOCl2+柠檬酸：柠檬酸：硼酸显色反应：硼酸显色反应：碱性试剂显色反应：碱性试剂显色反应：总结：总结：黄酮（醇）、二氢黄酮（醇）黄酮（醇）、二氢黄酮（醇）二氢黄酮二氢黄酮3-OH, 5-OH和邻二酚羟基和邻二酚羟基二氢黄酮（醇）二氢黄酮（醇）判断判断3-O

33、H或或5-OH5-OH黄酮或黄酮或2 -OH查耳酮查耳酮黄酮类化合物黄酮类化合物天然药物化学天然药物化学练习：写出下列化合物的结构式并用化学反应鉴别练习：写出下列化合物的结构式并用化学反应鉴别1.5, 7, 4 -三羟基三羟基-黄酮醇和黄酮醇和5,7, 3 ,4 -三羟基三羟基-黄酮醇黄酮醇2. 5, 7, 4 -三羟基三羟基-黄酮醇和黄酮醇和5,7, 4 -三羟基三羟基-黄酮黄酮3. 5, 7, 4 -三羟基三羟基-异黄酮异黄酮-7-O-葡萄糖苷葡萄糖苷 和和5,7, 4 -三羟基三羟基-黄酮黄酮天然药物化学天然药物化学氯仿、乙醚、醋酸乙酯等氯仿、乙醚、醋酸乙酯等第三节 黄酮类化合物的提取与

34、分离一、提取一、提取黄酮类化合物在花、叶、果等组织中，一般多以苷黄酮类化合物在花、叶、果等组织中，一般多以苷的形式存在，而在木部坚硬组织中，则多以游离苷的形式存在，而在木部坚硬组织中，则多以游离苷元形式存在。元形式存在。苷及极性稍大苷元：苷及极性稍大苷元：丙酮、醋酸乙酯、乙醇、甲醇、丙酮、醋酸乙酯、乙醇、甲醇、水或极性较大的混合溶剂水或极性较大的混合溶剂苷元：苷元：天然药物化学天然药物化学常用粗提物的精制方法：常用粗提物的精制方法： （一）（一） 溶剂萃取法溶剂萃取法 （二）（二） 碱提取酸沉淀法碱提取酸沉淀法 （三）（三） 炭粉吸附法炭粉吸附法 天然药物化学天然药物化学（一）溶剂萃取法：（一

35、）溶剂萃取法：利用黄酮与杂质极性的不同，利用黄酮与杂质极性的不同， 选用不同的溶剂进行萃取可达到精制纯化的目的。选用不同的溶剂进行萃取可达到精制纯化的目的。一方面去除杂质，另一方面将黄酮按极性大小分离。一方面去除杂质，另一方面将黄酮按极性大小分离。脂溶性杂质：脂溶性杂质：叶绿素、胡萝叶绿素、胡萝卜素等卜素等黄酮苷元黄酮苷元黄酮苷黄酮苷正丁醇药材醇提液悬浮于水中石油醚氯仿天然药物化学天然药物化学（二）碱提取酸沉淀法：（二）碱提取酸沉淀法： 由于黄酮苷易溶于碱性水，故可用碱性水提取，然后加由于黄酮苷易溶于碱性水，故可用碱性水提取，然后加酸使之沉淀出来。酸使之沉淀出来。苦荞麦6倍量水，煮沸缓慢加入石

36、灰乳至pH8-9, 微沸20-30分钟，过滤滤液 药渣6倍量水，煮沸缓慢加入石灰乳至pH8-9, 微沸20-30min，过滤滤液 药渣60-70下用HCl调pH至5.0静置24h,抽滤滤液沉淀（弃去）水洗至中性，60干燥总黄酮（主要为芦丁）天然药物化学天然药物化学石灰乳提取黄酮类化合物的优、缺点：石灰乳提取黄酮类化合物的优、缺点：优点：使含有多羟基的鞣质，或含有羧基的果胶、粘优点：使含有多羟基的鞣质，或含有羧基的果胶、粘 液质等水溶性的杂质生成钙盐沉淀，不被溶液质等水溶性的杂质生成钙盐沉淀，不被溶 岀，有利于浸岀液的纯化。岀，有利于浸岀液的纯化。缺点：浸岀效果可能不如稀缺点：浸岀效果可能不如稀

37、NaOH水溶液，且有些黄酮水溶液，且有些黄酮 类化合物可能与钙结合成不溶性物质不被溶岀。类化合物可能与钙结合成不溶性物质不被溶岀。注意：在碱提酸沉法中，酸、碱的浓度不宜过高。注意：在碱提酸沉法中，酸、碱的浓度不宜过高。 碱性过高，破坏母核；酸性过强，生成碱性过高，破坏母核；酸性过强，生成钅羊钅羊 盐盐天然药物化学天然药物化学（三）炭粉吸附法：主要适用于苷类（三）炭粉吸附法：主要适用于苷类 可用沸水、沸甲醇、可用沸水、沸甲醇、7酚水、酚水、15酚酚醇洗脱，大部分黄酮苷类可被醇洗脱，大部分黄酮苷类可被7酚水洗下。酚水洗下。天然药物化学天然药物化学 二、分离二、分离 （一）（一） 柱色谱法柱色谱法

38、（二）（二） 梯度梯度pHpH萃取法萃取法 （三）（三） 根据分子中某些特定官能团进行分离根据分子中某些特定官能团进行分离天然药物化学天然药物化学（一）柱色谱法（一）柱色谱法 常用吸附剂或载体有硅胶、聚酰胺及纤维素粉等，常用吸附剂或载体有硅胶、聚酰胺及纤维素粉等，也有用氧化铝、氧化镁及硅藻土。也有用氧化铝、氧化镁及硅藻土。1硅胶柱色谱：硅胶柱色谱： 应用范围最广，主要适用于苷元，常用应用范围最广，主要适用于苷元，常用CHCl3-MeOH作为流动相。当用作为流动相。当用CHCl3-MeOH-H2O为流动为流动相时，对于分离一些极性较大的苷类也适用。相时，对于分离一些极性较大的苷类也适用。天然药物

39、化学天然药物化学硅胶柱上各种溶剂的洗脱能力：硅胶柱上各种溶剂的洗脱能力： 石油醚石油醚 苯苯 氯仿氯仿 乙醚乙醚 醋酸乙酯醋酸乙酯 吡啶吡啶 丙酮丙酮 乙醇乙醇 甲醇甲醇 水水OOHOOHOHOOHOOHOHOH硅胶柱色谱，以硅胶柱色谱，以CHCl3-MeOH作为流动相作为流动相天然药物化学天然药物化学 通过分子中的酰胺羰基与黄酮类化合物分子上的酚羟通过分子中的酰胺羰基与黄酮类化合物分子上的酚羟基形成氢键缔合而产生吸附作用。基形成氢键缔合而产生吸附作用。 吸附的强度取决于分子中羟基的数目、位置及溶剂与吸附的强度取决于分子中羟基的数目、位置及溶剂与黄酮类化合物或与聚酰胺之间形成氢键缔合能力的大小

40、。黄酮类化合物或与聚酰胺之间形成氢键缔合能力的大小。 聚酰胺柱上溶剂的洗脱能力：聚酰胺柱上溶剂的洗脱能力：2聚酰胺柱色谱聚酰胺柱色谱 原理：原理：水水 甲醇甲醇 丙酮丙酮 NaOH水溶液水溶液 甲酰胺甲酰胺 二甲基甲酰胺二甲基甲酰胺 具有羰基具有羰基对对位（或间位）位（或间位）OH黄酮类化合物的洗脱规律：黄酮类化合物的洗脱规律：（1）苷元相同，三糖苷）苷元相同，三糖苷 二糖苷二糖苷 单糖苷单糖苷 苷元苷元 （2）母核上增加）母核上增加-OH，洗脱速度减慢（注意形成分子内，洗脱速度减慢（注意形成分子内氢键的特殊情况）。氢键的特殊情况）。OOHOHOOOHOOH OOHOHOOOHOOOHOHOO

41、H天然药物化学天然药物化学（4）分子中芳香核、共轭双键多者吸附力强）分子中芳香核、共轭双键多者吸附力强 如查尔酮如查尔酮二氢黄酮醇二氢黄酮醇黄酮黄酮黄酮醇黄酮醇OOHOOHOHOHOOHOOHOHOOHOHOOHOHOO天然药物化学天然药物化学OOHOHOOHOHOOHOHOOHOHOHOOHOHOOHOHHOOOOHOOHOHrha-glcABCD天然药物化学天然药物化学3葡聚糖凝胶（葡聚糖凝胶（Sephadex gel）柱色谱：）柱色谱： 常用凝胶型号：常用凝胶型号：sephadex G和和 sephadex LH-20. sephadex G：分离黄酮苷（只能在水中使用）：分离黄酮苷（只

42、能在水中使用） sephadex LH-20: 分离黄酮苷及苷元（水和有机溶分离黄酮苷及苷元（水和有机溶 剂均能使用）剂均能使用）天然药物化学天然药物化学苷：分子筛作用，按分子量由大到小的顺序流出。苷：分子筛作用，按分子量由大到小的顺序流出。机理：机理：苷元：吸附作用，苷元：吸附作用，OH多，则洗脱速度慢多，则洗脱速度慢OHOOOHOHOHOOOHOHOHOHOOOHOHOHOHOHOOOHOHOHORhaOOOHOHOGal (2-1) RhaOGlc(6-1)RhaOHOOOHOHOHORha天然药物化学天然药物化学（二）梯度（二）梯度pH萃取法萃取法Na2CO3不同浓度NaOHNaHCO

43、3酸性： 7，4-二OH 7-或4-OH 一般酚OH 5-OHOOHOHOOOOHOOHOHOOHOOHOHOOH天然药物化学天然药物化学（三）根据分子中某些特定官能团进行分离（三）根据分子中某些特定官能团进行分离铅盐法铅盐法 具邻二酚具邻二酚OH+Pb(OAC)2 不具不具邻二酚邻二酚OH+碱式碱式Pb(OAC)2 此外铅盐法还可以去除一些杂质此外铅盐法还可以去除一些杂质 硼酸络合法：硼酸络合法：具邻二酚具邻二酚OH+硼酸硼酸易溶于水易溶于水天然药物化学天然药物化学 提取液或浓缩液提取液或浓缩液加入一定量的加入一定量的Pb(OAc)2 沉淀沉淀 滤液滤液再加入再加入Pb(OAc)2 沉淀沉淀

44、 滤液滤液 通通H2S碱式碱式Pb(OAc)2 PbS沉淀沉淀 滤液滤液 沉淀沉淀浓缩浓缩H2S处理处理 A B 有邻二酚羟基黄酮有邻二酚羟基黄酮无邻二酚羟基黄酮无邻二酚羟基黄酮天然药物化学天然药物化学三、实例：三、实例：1补骨脂黄酮的分离补骨脂黄酮的分离2柠檬果皮中黄酮类成柠檬果皮中黄酮类成分的提取、分离。分的提取、分离。补骨脂种子Psoralea corylifolia L.种子苯提取液碱液氯仿层浓缩黄色固体乙醚溶后拌聚酰胺，层析水洗70弃去补骨脂甲素补骨脂乙素50MeOH5Na2CO3HCl酸化，CHCl3萃取天然药物化学天然药物化学v 黄酮类化合物的检识与结构测定现在多依赖于黄酮类化合

45、物的检识与结构测定现在多依赖于各种类型光谱的综合解析，化学方法和色谱方法各种类型光谱的综合解析，化学方法和色谱方法已降至辅助地位。已降至辅助地位。v 对于一个未知的黄酮类化合物的鉴定，首先测对于一个未知的黄酮类化合物的鉴定，首先测定分子式，与标准品或文献对照定分子式，与标准品或文献对照PPC或或TLC的的Rf值，测值，测UV，加入各种诊断试剂，观察光谱的变化，加入各种诊断试剂，观察光谱的变化，根据各种化学试剂确定某些基团。但更说明问题根据各种化学试剂确定某些基团。但更说明问题的是的是1H NMR、13C NMR和和MS。第四节 黄酮类化合物的检识与结构测定天然药物化学天然药物化学黄酮类化合物命

46、名黄酮类化合物命名母核加上取代基母核加上取代基OO12345678123456OHOHHO7, 3 , 4 -三羟基黄酮三羟基黄酮7, 3 , 4 -trihydroxyflavone5, 7, 3 -三羟基三羟基-4 -甲氧基二甲氧基二氢黄酮氢黄酮5, 7, 3 -trihydroxy- 4 -methoxy-flavanoneOOOHHOOHOCH3天然药物化学天然药物化学v 黄酮类化合物的检识与结构测定现在多依赖于黄酮类化合物的检识与结构测定现在多依赖于各种类型光谱的综合解析，化学方法和色谱方法各种类型光谱的综合解析，化学方法和色谱方法已降至辅助地位。已降至辅助地位。v 对于一个未知的黄

47、酮类化合物的鉴定，首先测对于一个未知的黄酮类化合物的鉴定，首先测定分子式，与标准品或文献对照定分子式，与标准品或文献对照PPC或或TLC的的Rf值，测值，测UV，加入各种诊断试剂，观察光谱的变化，加入各种诊断试剂，观察光谱的变化，根据各种化学试剂确定某些基团。但更说明问题根据各种化学试剂确定某些基团。但更说明问题的是的是1H NMR、13C NMR和和MS。黄酮类化合物的检识与结构测定天然药物化学天然药物化学一、黄酮类化合物的色谱检识方法一、黄酮类化合物的色谱检识方法1. 纸色谱法（纸色谱法（PC)2. 薄层色谱法（薄层色谱法（TLC）3. 高效薄层色谱法（高效薄层色谱法（HPTLC）天然药物

48、化学天然药物化学1纸色谱法（纸色谱法（PC) PC适于分离各种天然黄酮类化合物及其苷适于分离各种天然黄酮类化合物及其苷类的混合物。类的混合物。黄酮苷：一般采用双向展开黄酮苷：一般采用双向展开 样BAW第一向第二向样HOAc天然药物化学天然药物化学第一向：醇性溶剂第一向：醇性溶剂n-BuOH-HOAc-H2O(4:1:5上层上层, BAW)根据分配作用原理进行分离根据分配作用原理进行分离第二向：水性溶剂第二向：水性溶剂 26HOAc 根据吸附作用原理进行分离根据吸附作用原理进行分离天然药物化学天然药物化学黄酮苷元：黄酮苷元： 醇性溶剂或醇性溶剂或C6H6-HOAc-H2O系统系统PC结果的检识方

49、法：结果的检识方法： a、UV：直接观察荧光，或以：直接观察荧光，或以NH3熏熏 b、2AlCl3(甲醇）溶液：甲醇）溶液：UV灯下观察灯下观察 c、1%FeCl3-K3Fe(CN)6 水溶液（水溶液（1:1）Rf值：值： 醇性溶剂：苷元醇性溶剂：苷元单糖苷单糖苷双糖苷双糖苷 水性溶剂：双糖苷水性溶剂：双糖苷单糖苷单糖苷苷元苷元天然药物化学天然药物化学2. 薄层色谱法薄层色谱法 一般采用吸附薄层，吸附剂大多用硅胶和聚一般采用吸附薄层，吸附剂大多用硅胶和聚酰胺。酰胺。（1）硅胶薄层色谱）硅胶薄层色谱: 用于分离与鉴定弱极性黄酮类化合物用于分离与鉴定弱极性黄酮类化合物 分离苷元常用展开剂：甲苯分离

50、苷元常用展开剂：甲苯-甲酸甲酯甲酸甲酯-甲酸；氯仿甲酸；氯仿-甲醇等。甲醇等。 （2）聚酰胺薄层色谱：）聚酰胺薄层色谱：分离含游离酚羟基的黄酮苷与苷元。分离含游离酚羟基的黄酮苷与苷元。 展开剂：具有较强的极性，大多含有醇、酸或水展开剂：具有较强的极性，大多含有醇、酸或水 如：乙醇水（如：乙醇水（3：2），）， 水乙醇甲酸乙酰丙酮水乙醇甲酸乙酰丙酮(5:1.5:1:0.5)天然药物化学天然药物化学3. 高效薄层色谱法（高效薄层色谱法（HPTLC) 分离和检识效果比分离和检识效果比TLC好好天然药物化学天然药物化学PC原 点B A WCBAOOOHOHOHOHOHOOOHOCH3OHOHOHOOH

51、3COOHOHOHOHA: 槲皮素B: 杜鹃素C: 鼠李素天然药物化学天然药物化学聚酰胺薄层聚酰胺薄层(乙醇水）乙醇水）BADCOOOHglc-OAOOOHglc-OBOOOHglc-OOHOOOHglc-OOHCD天然药物化学天然药物化学二、紫外及可见光谱在黄酮类鉴定中的应用二、紫外及可见光谱在黄酮类鉴定中的应用一般研究程序：一般研究程序：（1）测定试样在甲醇溶液中的）测定试样在甲醇溶液中的UV光谱；光谱；（2）测定试样在甲醇溶液中加入各种诊断）测定试样在甲醇溶液中加入各种诊断 试剂后得到的试剂后得到的UV及可见光谱；及可见光谱；（3）各种）各种UV-可见光谱图的对比分析。可见光谱图的对比分

52、析。天然药物化学天然药物化学OOROOROOR-+- 苯甲酰基苯甲酰基 flavone (R=H) 桂皮酰基桂皮酰基 （benzoyl） flavonol(R=OH) (cinnamoyl) 带带II, 220 280nm 带带I, 300 400nm （一）在甲醇中的紫外光谱（一）在甲醇中的紫外光谱 判断骨架类型判断骨架类型天然药物化学天然药物化学1黄酮及黄酮醇类：黄酮及黄酮醇类：带带与带与带图形相似图形相似（1）区别：带）区别：带位置不同：位置不同： 黄酮类：黄酮类： 304350 nm 黄酮醇（黄酮醇（3OH游离）：游离）：352385 nm 黄酮醇（黄酮醇（3OH取代）：取代）：328

53、357 nmOHOOHOHOHOOHOOHOHOHOOH带带I350 nm天然药物化学天然药物化学两者两者UVUV光谱图形相似，但带光谱图形相似，但带I I位置不同。整个母核上氧位置不同。整个母核上氧取代程度越高，则带取代程度越高，则带I I将向长波方向位移（将向长波方向位移（红移红移）。）。 a. b. 黄酮黄酮黄酮醇黄酮醇天然药物化学天然药物化学带带：母核上引入：母核上引入OH或或OCH3等供电基，红移等供电基，红移3，5，7三羟基黄酮（高良姜素）三羟基黄酮（高良姜素） 3593，5，7，4四羟基黄酮（山奈酚）四羟基黄酮（山奈酚） 367 红红3，5，7，3，4五羟基黄酮（槲皮素）五羟基黄

54、酮（槲皮素） 370 移移3，5，7，3，4，5六羟基黄酮（杨梅素）六羟基黄酮（杨梅素） 374（2）变化规律：）变化规律：天然药物化学天然药物化学黄酮黄酮 2507-羟基黄酮羟基黄酮 2525-羟基黄酮及羟基黄酮及5,7-二羟基黄酮二羟基黄酮 262 红移红移5,6,7-三羟基黄酮三羟基黄酮 2745,7,8-三羟基黄酮三羟基黄酮 281 4氧取代：氧取代： 单峰单峰 3,4二氧取代：二氧取代： 双峰（或肩峰）双峰（或肩峰）OH :甲基化或苷化，紫移，特别是带甲基化或苷化，紫移，特别是带。OH:乙酰化，作用消失。乙酰化，作用消失。带带：主要受：主要受A 环影响，环影响，A环上引入环上引入OH

55、或或OCH3，红移；，红移； B环上引入环上引入OH或或OCH3，仅改变峰形，仅改变峰形A:B:天然药物化学天然药物化学2查耳酮及橙酮：查耳酮及橙酮：带带 很强，而带很强，而带较弱较弱 查耳酮查耳酮 带带：220270nm 带带：340390 Ia：340 390 nm Ib：300 320 nm引入引入OH或或OCH3，红移，尤其带，红移，尤其带，2-OH影响最大影响最大 查耳酮查耳酮 312 4-羟基查耳酮羟基查耳酮 320 4-羟基查耳酮羟基查耳酮 350 2,4,4-三羟基查耳酮三羟基查耳酮 370OHO123456123456天然药物化学天然药物化学共同特征是共同特征是带带 很强，为

56、主峰很强，为主峰而而带带则较弱，为次强峰。带则较弱，为次强峰。带I I的位置不同。的位置不同。e. f.查耳酮查耳酮橙酮类橙酮类天然药物化学天然药物化学OHHOOHOOCHOHOHHOO带带I390 nm天然药物化学天然药物化学3异黄酮、二氢黄酮及二氢黄酮醇：异黄酮、二氢黄酮及二氢黄酮醇：带带带带, 带带I常表现为肩峰。常表现为肩峰。 异黄酮：带异黄酮：带245270nm 二氢黄酮、二氢黄酮醇：带二氢黄酮、二氢黄酮醇：带：270295nm天然药物化学天然药物化学带II吸收峰为主峰，带I很弱，常在主峰的长波方向有一肩峰。c.d.天然药物化学天然药物化学OOHglcOOrhamOHOOHOHOOH

57、带带II270 nm天然药物化学天然药物化学各类黄酮类化合物的各类黄酮类化合物的UV光谱数据：光谱数据：类型类型带带I带带II黄酮黄酮304-350240-280黄酮醇黄酮醇352-385240-280黄酮醇（黄酮醇（3-OH取代）取代） 328-357240-280查尔酮查尔酮340-390220-270（弱）（弱）橙酮橙酮388-413220-270（弱）（弱）二氢黄酮二氢黄酮弱弱270-295异黄酮异黄酮弱弱247-270甲醇谱的应用：甲醇谱的应用：判断黄酮类化合物的骨架（结构类型）判断黄酮类化合物的骨架（结构类型）天然药物化学天然药物化学诊断试剂在结构测定中的应用常用的诊断试剂常用的诊

58、断试剂天然药物化学天然药物化学诊断试剂在结构测定中的应用天然药物化学天然药物化学诊断试剂在结构测定中的应用3. NaOAc/H3BO3：用于鉴定邻二酚用于鉴定邻二酚OH。 在醋酸钠碱性下，邻二酚在醋酸钠碱性下，邻二酚OH与硼酸络合，与硼酸络合，引起峰带引起峰带红移红移。天然药物化学天然药物化学诊断试剂在结构测定中的应用 4. AlCl3 5. AlCl3 /HCl： 分子中有分子中有3-OH，5-OH，邻二酚，邻二酚OH时，可与时，可与Al3+络合，络合，引引 起吸收峰红移。起吸收峰红移。： 黄酮醇黄酮醇3-OH 黄酮黄酮5-OH 二氢黄酮二氢黄酮5-OH 邻二酚邻二酚OH 二氢黄酮醇二氢黄酮

59、醇3-OH天然药物化学天然药物化学加入诊断试剂后的紫外光谱加入诊断试剂后的紫外光谱 确定取代基（确定取代基（OH）位置）位置4-OH 带带 I 红移红移 40-60 nm3-OH 带带 I 红移红移 50-60 nm3,4-OH 带带 I 几分钟后衰减（几分钟后衰减（dec.）7-OH 带带 I、带、带 II之间（之间（320-330）肩峰）肩峰峰强增强峰强增强强度下降强度下降1. MeOH+MeONa 确定确定4-OH， 3-OH天然药物化学天然药物化学268333386OOGlcOOHOH267367OOHOOHOMeOH411280MeOHMeONa200 300 400 500200

60、300 400 500天然药物化学天然药物化学267367416（dec.）278OOHOOHOHOHMeOHMeONa5后后200 300 400 500天然药物化学天然药物化学OHOOHOHOHOOH天然药物化学天然药物化学 7-OH 带带 II红移红移 5-20 nm269327276358OOHOOHOHMeOHNaOAc200 300 400 5002. MeOH+NaOAc 确定确定7-OH天然药物化学天然药物化学OHOOHOHOHOOHOOHOHOHOOH天然药物化学天然药物化学 B环邻二酚环邻二酚OH 带带 I红移红移 12-30 nm A环邻二酚环邻二酚OH 带带 II红移红