洁净区微生物基础知识培训

1、洁净区微生物基础知识培训20门年赵灵芝药品生产质量管理规范附录中明确规定：洁净区内的人员数量应严格控制，其工作人员（包括维修、辅助 人员）应定期进行卫生和微生物学基础知识、洁净作业等方面的培训及考核；对进入洁净室的临时人员进行指导和监督。医药工业洁净室必须以尘粒和微生物为环 境控制对象二者相比，微生物更难以控制。 1、存在范围广 2、生长速度快 3、生存能力强什么是微生物?微生物(Microorganism) 通 常是描述一切不借助 显微镜用肉眼看不见 的微小生物，包括病 毒.细菌.真菌.原 生动物. 和某些藻类。原核生物：微生物的种类具有细胞结 构的微生物（由原核细胞构成的<真核微生物

2、（由真核细胞构成的）没有细胞结构的显微藻类微生物的共同特点(小.多.快.强.广)(1)体积4、，面积大(细胞以微米.如大肠杆菌如感冒病毒米来计算)(2) 吸收多，转化快(3) 生长旺，繁殖快(4) 适应强，易变异分布广，种类多微生物在生态系统中的地位消费者 部分生产者微生物对环境的有害影响鸟植物病原菌:稻瘟病烟草花叶病烟草野火病心动物病原菌：鸡霍舌C猪瘟（口涕疫）卜人类的疾病：非典型肺炎（SARS）1、葡萄球菌2、大肠杆菌3、绿脓杆菌4、枯草杆菌5、酵母菌6、霉菌常见污染药品制剂的微生物可引起局部感染胆道和尿道感染化脓性感染、中耳炎、肺炎 结膜炎使糖分解，药液产生有机酸使制剂霉坏，酸败变质洁净

3、室内微生物在哪里牢台中的薇半物灰尘微生物的飞行器微生物不是凭空存在，99%的微生物都附 在颗粒上。控制空气中的微粒数，就是控 制了微生物数量。灰尘、微粒具有沉降和粘附在趋势，所以 同一区域内，地面是微粒相对集中在地方, 也是微生物相对较多的地方，墙壁也容易 粘附灰尘。98 版 GMP洁净度级别100级10,000级100, 000级300, 000级尘粒最大允许数/立方米M0 5 u m3, 500350, 000M5 u m02,000微生物最大允许数浮游菌/立方 米5110033, 500,00020,00050010, 500, 00060, 0001,00015Air lock两扇门不

4、能同时打开高效过滤器气流Air Lock仓库or外包间洁净区走廊Or DISPAir lock （缓冲间）的作用空气自净和微粒的沉降与粘附空气自净有死角-顶送顶回（洁净走廊），地面-顶送侧回（清洗间，操作间）,对面的墙角,顶棚。微粒沉降和粘附药品生产质量管理规范第四章 设备第三十四条中明确规定 化水注射用水的制备、储存和分配 应能防止微生物的滋生和污染 储罐 和输送管道所用材料应无毒、耐腐蚀。 管道的设计和安装应避免死角、盲管。 储罐和管道要规定清洗、灭菌周期制药工业对水质的要求药厂的水源：城市自来水、井水等达到饮 用水标准的水源。 口服制剂：片剂、颗粒剂、糖浆小容量注射剂：15ml-配制容器

5、清洗：纯化水人洁净室中最大的微生物污染源人在代谢过程中会释放和分泌污染物O2、人体表面、衣服能沾染、携带污染物。3、人在洁净室内的各种动作也会产生微 粒和微生物。人体内外微生物的分布歸奮髦I翳矗霧葡萄球菌、八鲫菌属细菌、类白喉2、口腔：唾液链球菌、溶血链球菌、乳酸杆菌、流感杆菌、类白喉 榛杯菌等3、上呼吸道：包括喉、鼻道和鼻咽。甲型链球菌、奈氏球菌、肺炎 球菌、流感杆菌、乙型链球菌、葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、 变形杆歯象的。4、下呼吸道：。包括气管、支气管和肺。健康人的下呼吸道是无菌队w礙氏蠢蠶杆礙杆矗r®聲 的一些种6、錄豔劇爵有嗜酸乳杆菌、类白喉棒杆菌、葡萄球菌、如何阻断人体

6、污染源药品生产质量管理规范中明确规定：进入洁净室（区）的人员不得化妆和佩带饰,不得裸手直接接触药品。药品生产质量管理规范中明确规定： 无菌工作服必须包盖全部头发、胡须及脚 部，并能阻留人体脱落物。国外实验资料，可以认为人员的发菌量有以下数据可供 参考。毋漬净室内当T作人员穿无葛眼肘，勢止时的繰董一 般为10300个/（min.人），躯体一般活动时的愛菌量 为1501000个/ （min-A）,快步行走时的发菌量为 9002500 个 / （min-A）o咳嗽一次的发菌量一般为70700个/ （min-人），喷 嚏一次的发菌量一般为400060000个/ （min-A）o穿平常衣服时发菌量为33

7、0062000个/ （min-A）o无口罩发菌量：有口罩发菌量为（1： 7）（1： 14）。发菌量：发尘量为（仁 500）（1： 1000） o可知洁净室内穿无菌衣人员的静态发菌量一般不超过 300个/（min-A）,动态发菌量一般不超过1000个/ （min-人）。我们的更衣流程1.2.3.界粘在鞋底的垃圾、颗粒及微生物。相对而言,脱去策套：阻盒外讨沉降在外套上的颗粒和微生物。4.二更带口罩：阻断鼻腔、呼吸道的微生物发散,一更洗手：规范的洗手能消除手部皮肤的污垢和大部分的微生物。带发套：阻断头发、头皮表面的微生物发散。穿连体服：阻断体表皮肤的微生物发散。手消毒：再次消除手部的细菌和微生物。二

8、次更鞋：阻断一更、二更内沉降在地板上的颗粒和微生物。平时的卫生习惯勤洗澡、洗头，勤换内衣-去除皮屑、头屑等人体脱落物，保持体表洁净。-工作时，头皮不容易出汗，易被纸发套全部包裹。-指甲内能够藏污纳垢，有很多的致病微生物。-准备两双鞋每天交替穿着，保证鞋内干燥无异味。清洗：最后淋洗用水:纯化水清洗后按要求包装并有清洁标签，注明清洁日期、有效期至和清洗人储存有效期,消毒(disinfection):杀死物体上病原微生物的 方法，并不一定杀死含芽胞的细菌或非病原微生 物。灭菌(sterilization):杀死物体上所有微生物的方法。包括杀灭细菌芽胞在内的全部病原微生物 和非病原微生物。抑菌(bac

9、teriostasis):抑制体内或体外细菌的生长繁殖。防腐(antisepsis):防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法。无菌(asepsis):不存在活的细菌。消毒注意事项消毒剂浓度合适，针对特定范围内的细菌选择相 应的消毒剂消毒剂在一定周期内轮换使用，以防细菌耐药。 我公司常用消毒剂为：0.2%新洁尔灭、75%酒精 溶液紫外灯消毒时记录使用时间，紫外灯的输出功率 随使用时间增加而降低。国产紫外灯的平均寿命 （点到70%额定功率的时间）一般为2000h,超 过平均寿命时，就达不到预期效果，必须更换。 我公司规定紫外灯使用时间为1000ho热原与内毒素A许多细菌、病毒和真菌（如酵母菌）都能产生热

10、 原。热原是微量即可引起恒温动物体温异常升高 的物质的总称。主要物质为细菌内毒素、胞壁酰 二肽及其他抗原抗体复合物、半抗体原物质和某 些药物（类固醇）等。1、细菌内毒素一般指革兰阴性细菌细胞壁的结构成分，主 要是月旨多糖。2、细菌内毒素生物学活性可分为两类：一是致病作用，一 是保护性反应。3、其他理化特性耐热性:120°C加热4h,可破坏98%。 180°C加热2h或250°C加热30min,才可彻底破坏。滤过 性：其体积小，约在广5nm之间，故能通过滤器进入滤液 中。具有水溶性及不挥发性。能被强酸、强碱和氧化 剂破坏热原与内毒素热原与内毒素4、热源引入的途径从溶

11、剂中带进从原料中带进从容器、用具、管道和装置等带进制备过程中的污染从输液器带入热原与内毒素5、消除细菌内毒素的方法高温破坏法：可用180°C干烤34h或250°C干烤30mino吸附法：一般选用活性炭。 蒸馅法：此法仅限于制备蒸憎水。化学酸碱和氧化法。离子交换法。反渗透法。凝胶过滤法。超滤法药品的微生物污染A药品微生物污染：微生物的产生、附着而 给药品及生产环境带来不良影响。药品的 微生物污染也称染菌。A污染药品的细菌：常见污染药物制剂的细 菌是一些生命力较强的细菌，如：葡萄球 菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、枯草杆菌及一 些霉菌，抵抗力弱的细菌一般不易造成污 染。A药品的微生物污

12、染源：空气、水、厂房与 设备、药品生产用原辅料、包装材料、昆消毒与灭菌下列术语常用于表示物理或化学方法对微生物的杀灭程度消毒：杀死物体上病源微生物的方法，并不一定能杀死细 菌的芽胞。消毒所用的试剂称为消毒剂。鸞亀礫体韻辭鑼鱷长繁殖。常用的抑菌剂为 防腐：防止或抑制体外细菌生长繁殖的方法，细菌一般不 回一种化学药品在高浓度时为消毒剂，低浓度时常 为防腐剂。存壽至醫舉曆防止细菌进入人体或其他物品的严芽砲是细菌的休眠体，在适宜的条件下可 以重新转变成为营养态细胞；一般的芽砲在普通的条件下可保存几年至 几十年的生活力；世界上最古老的芽抱：25亿年；其对热力、干燥、辐射、化学消毒等理化因素有强大的抵抗力

13、;杀灭芽胞最可靠的方法是高压蒸汽灭菌。消毒与灭菌一、物理灭菌方法 热力灭菌法辐射杀菌法 滤过除菌法 厂超声波杀菌法尸干燥与低温抑菌法消毒与灭菌热力灭菌法：使蛋白质、酶及核酸永久性破环，细胞 膜溶解，导致细胞发生不可逆转的死亡。1、干热灭菌法一采用灼烧或干热空气灭菌，使 用方便，适用于玻璃器皿和瓷器等耐高温的固体 物的灭菌。2、湿热灭菌法一利用热蒸汽杀死微生物。高压蒸汽灭菌：利用高温高压蒸汽进行灭菌的方 法,蒸汽的穿透力较热空气强可以杀死一切微生 物，包括细菌的芽抱，真菌的抱子或休眠体等耐 高温的个体。最可靠最适用最广泛的灭菌方法。辐射灭菌法1、紫外线：波长200-300nm的紫外线具有杀菌作用

14、。穿透物质的能力很差,般要求紫外灯消毒与灭菌距离照射物不超过10米为宜2、电离辐射高速电子、X射线、丫射线3、微波波长1mm-1m消毒与灭菌滤过除菌法A用物理阻留的方法将液体或空气中的细菌除去，以 达到除菌目的。滤菌器含有微细小孔SO. 22微米，只允许液体或气 体通过，而大于孔径的细菌等颗粒不能通过。A适用范围：血清、毒素、抗生素以及空气等的除二、化学灭菌方法A许多化学药物能影响微生物的化学组成、 物理结构和生理活性，从而发挥防腐、消 毒及灭菌的作用。A洁净室（区）应定期消毒，使用的消毒剂不得 对设备、物料和成品产生污染。消毒剂品 种应定期更换，防止产生耐药菌株。消毒与灭菌常用消毒剂种类和用

15、途类别作用机制常用种类用途酚类蛋白变性，细胞膜规伤石炭酸地面、器具表面、皮肤消氧化剂重金属盐氧化剂蛋白变性75%酒精皮肤、体温计消毒氧化、蛋白沉淀氧化、蛋白酶变性氧化、蛋白沉淀二氧化氯地面、器具表面、皮肤消红汞、硫柳汞皮肤、粘膜、小创伤消毒过氧乙酸、碘酒塑料、玻璃器材、皮肤消卫生管理了解污染源对药品生产全过程可能造成污染的来源，进行深入的了解 研究，从而设计一个完好的生产工艺，制定规章制度和标 准操作规程，从各个环节釆取消毒和卫生措施来防止微生 物污染，使产品达到所要求的卫生学质量，包括稳定性及 各种微生物参数。2. 进行微生物监测在药品生产过程中，应按GMP要求不断进行各项微生物卫生学监测。例如：对洁净室空气中的浮游菌、沉降菌的监测;对无菌设备清洁灭菌的验证；对非无菌药品进行细菌和活菌数测定和病原菌的限制性检査等O卫生管理3. 定期进行环境卫生清洁严格按照“管理规程（生）管-3生产科环境卫生管理的有关规定”对生产科各个区域进行清洁卫生，确保生产区域符合GMP卫生管理要求。4. 做好生产人员卫生管