血防作业指导书

1、沙市区血吸虫病专科医院分 发 号：受控状态：受控非受控作 业 指 导 书 （第一版） 依据ws261-2006、实验室资质认定评审准则 及实验室建设指导手册编制2014年08月01日发布 2014年09月01日实施批准: 审核：编写：沙市区血吸虫病专科医院作 业 指 导 书依据ws261-2006、实验室资质认定评审准则 及实验室建设指导手册编制版本号：第一版实施日期：二一四年九月一日批准人（技术负责人）： 批准日期：二一四年八月一日编 号： 持有者签字： 沙市区血吸虫病专科医院作业指导书文件代号：SSXF/QC2014前 言第一版 第0次修订第1页 共1页实施日期：2014年09月01日诊断

2、在血吸虫病的防治工作中发挥重要作用，可为防治活动的计划、实施和效果评价等各个环节提供必要的信息和科学依据，具体可用于化疗对象的筛查、调查、流行病学调查、防治效果考核及监测，为加强本室血吸虫病诊断工作的监测及管理，促进血吸虫病防治工作质量的提高，我们坚持科学、合理、实用、节约的原则，在保证工作质量和检测水平同时，体现标准化、智能化、人性化的特点。为了规范仪器设备的操作，方便检测技术人员的工作，我们对仪器设备的使用编制了仪器操作类的作业指导书，同时我所在申请血吸虫病诊断网络检验科建设中一直坚持使用血吸虫病防治手册第三版和血吸虫病预防控制工作规范标准检验方法，组织检验科撰写了相应的方法类的作业指导书

3、，在检验科程序制度方面，同样编写了适合各项检测操作的通用类作业指导书。由于时间仓促，水平有限，难免有一些缺点错误，望广大同仁在使用过程中批评指正，以便再版时修正。 作业指导书编写组 二一四年八月一日沙市区血吸虫病专科医院作业指导书文件代号：SSXF/QC2014修订页第一版 第0次修订第1页 共1页实施日期：2014年09月01日 序号对应的章、节、条号修 订 内 容批准人批准日期沙市区血吸虫病专科医院作业指导书文件代号：SSXF/QC2014目 录第一版 第0次修订第1页 共2页实施日期：2014年09月01日SSXF/QCYQ0012014 生物显微镜操作规程-1SSXF/QCYQ0022

4、014 恒温水浴箱操作规程-6SSXF/QCYQ0032014 台式低速自动平衡离心机操作规程- 9SSXF/QCYQ0042014 微量振荡器操作规程-10SSXF/QCYQ0052014 移液器操作规程-13SSXF/QCFF0012014 间接血凝试验（IHA）-15SSXF/QCFF0022014 胶体金渗滤法（DIGFA）-16SSXF/QCFF0032014 尼龙绢集卵孵化法-19SSXF/QCFF0042014 改良加藤厚涂片法（Kato-Katz）-21SSXF/QCFF0052014 钉螺解剖方法-23SSXF/QCFF0062014 检验科消毒液配制方法-24SSXF/QC

5、QT0012014 检验科安全管理制度-26SSXF/QCQT0022014 检验科工作制度-27SSXF/QCQT0032014 检验科工作人员工作交接制度-28SSXF/QCQT0042014 检验原始记录填写及数据更改制度-30SSXF/QCQT0052014 职业暴露预防处理-34沙市区血吸虫病专科医院作业指导书文件代号：SSXF/QCYQ0012014生物显微镜操作规程第一版 第0次修订第1页 共3页实施日期：2014年09月01日1.目的建立生物显微镜的统一操作规程，保证检测结果准确可靠。2.适用范围用于组织学、生物学、细菌学、病理学、药物化学等研究领域及大专院校的教学工作和医学界

6、的临床分析与实验等。3.职责未授权人员不得操作该仪器，授权操作人均要执行本规程，质量监督员实施日常监督，检验科定期或不定期进行检查。4.仪器技术指标4.1仪器名称：生物显微镜4.2型号：XSP-2C4.3工作原理将两个凸透镜系统适当地组合在仪器上对标本进行放大，经物镜形成的倒立实像，经目镜放大成虚像。4.4操作环境温度：041湿度：最大湿度85，不结露高度：海拔2000m以下大气压力：86kpa106 kpa污染度：2级过压类别：类5.仪器操作步骤5.1取镜：左手托住镜座，右手握住镜臂 放置：距离桌沿不少于17cm。 5.2 物镜调至最低倍，载物台调至最高的位置。5.3 两眼张开，左眼对准目镜

7、，右眼看桌面，调整反光镜和光圈以获得最适当的光线5.4 将要观察标本放在载物台上，并用玻片夹固定。5.5向外转动粗准焦螺旋，使载物台下降至看到清晰的影像，可调节细准焦螺旋，使物象更清晰如果需要使用高倍镜观察，转动装换器，换高倍镜，调整光圈或反光镜以取得适当的光线，此时不能再调粗准焦螺旋，只能调节细准焦观察的物体在视野右下角，将玻片向右下沙市区血吸虫病专科医院作业指导书文件代号：SSXF/QCYQ0012014生物显微镜操作规程第一版 第0次修订 第2页 共3页实施日期：2014年09月01日角移动螺旋，显微镜下的影像:上下左右相反，如：要观察的物体在视野右下角，将玻片向右下角移动。5.6 观察

8、完将物镜转换，不要对着通光孔，显微镜套上塑胶套放好。6.授权操作人郭贤莎7. 保养与年度维护方法7.1保养与年度维护校准频率：7.1.1每次使用后对仪器进行常规清洁保养7.1.2每年对仪器进行一次全面保养7.2维护与保养的方法：7.2.1清洁各种玻璃部件是，有纱布轻轻擦拭。除掉指纹或油渍，要用纱布沾少量的混合液（乙醚70和酒精30混合）擦拭。7.2.2不要使用有机溶剂擦拭显微镜的非光学部件。如果要清洁这些部件，请用无毛柔软的纱布沾少量中性清洗剂擦拭。7.2.3不要拆开显微镜的任何部分，这会导致性能降低或损坏显微镜。7.2.4贮存显微镜时，请用防尘罩盖好，并存放在干燥地地方，放入干燥剂，以免镜头

9、发霉。7.2.5显微镜应放在无震动的地方。沙市区血吸虫病专科医院作业指导书文件代号：SSXF/QCYQ0012014生物显微镜操作规程第一版 第0次修订 第3页 共3页实施日期：2014年09月01日沙市区血吸虫病专科医院作业指导书文件代号：SSXF/QCYQ0022014恒温水浴箱操作规程第一版 第0次修订第1页 共3页实施日期：2014年09月01日1. 目的 建立恒温水浴箱的统一操作规程，保证检测结果准确可靠。2. 适用范围用于医疗卫生、医学院检查化验病理血清和工矿企业及科研单位作精密恒温和辅助加热之用3. 职责未授权人员不得操作该仪器，授权操作人均要执行本规程，质量监督员实施日常监督，

10、检验科定期或不定期进行检查。4. 仪器技术指标4.1 仪器名称 电子恒温水浴箱4.2 型号 WMK26型4.3 工作原理 传感器将水槽内水的温度转换为电阻值，经过集成放大器的放大、比较后，输出控制信号，有效地控制电加热管的平均加热功率，使水槽内的水保持恒温。4.4技术性能4.4.1 工作环境：常温常压条件下正常工作。4.4.2 技术指标：温度调节范围：37654.4.3 温度波动：±14.4.4 温度均匀性：±15. 仪器操作步骤5.1 接通电源，打开电源开关，仪表上排显示工作室温度，下排显示设定温度。按动SET键，使上排显示50，按上下设定所需温度，再按SET保存设定值5

11、.2 打开电源开关，电源指示灯亮表示电源接通仪表自整定功能：按下键5秒自整定结束后AT灯灭，得出一组能克服超温德PID参数。在自整定过程中按下键5秒后AT灯灭，自整定停止，仪表按原来的PID参数进行控制。5.3 设定定时功能：按SET键10秒，出现第二菜单。下排设定时间分钟，测量温度达到设定的时间后，下排显示熄灭输出功能停止，如果要恢复设定控制时间应先关机再通电开机。设定为0时仪表取消定时功能，连续输出。6. 授权操作人 郭贤莎7. 保养与年度维护校准要求7.1 保养与年度维护校准频率：7.1.1 每次使用后对仪器进行常规清洁保养沙市区血吸虫病专科医院作业指导书文件代号：SSXF/QCYQ00

12、22014恒温水浴箱操作规程第一版 第0次修订第2页 共3页实施日期：2014年09月01日7.1.2 每半年对仪器进行一次全面保养7.2 保养与注意事项7.2.1 本仪器外壳必须可靠接地，以保证安全使用7.2.2 仪器应放置在具有良好通风条件的室内，室内相对湿度不大于85%，其周围不要放置易燃易爆及腐蚀性物品7.2.3 注水不可将水流入或溢入电器控制箱内以防发生危险，不用时及时把水放掉，并将箱内擦干净，保持清洁。7.2.4 控制系统没有专业设备和技术人员不能随意调动及拆卸机内元器件，以免影响控温精度，缩短使用寿命。7.2.5 要经常检查工作室内的水位，不能缺水，更不能无水干烧，以免损坏加热管

13、8. 期间核查8.1 期间核查频次：两次检定的中期8.2 期间核查方法8.2.1 接通电源，加热升温到37摄氏度；8.2.2 取20支管壁均匀的试管，分别加入2毫升液体石蜡；沙市区血吸虫病专科医院作业指导书文件代号：SSXF/QCYQ0022014恒温水浴箱操作规程第一版 第0次修订第3页 共3页实施日期：2014年09月01日8.2.3 把这些试管随机插在水浴中的试管架上，加热20分钟；8.2.4 用国家计量部门检定合格的温度计测量并记录每管温度。方法要求精度为37±0.5。沙市区血吸虫病专科医院作业指导书文件代号：SSXF/QCYQ0032014台式低速自动平衡离心机操作规程第一

14、版 第0次修订第1页 共2页实施日期：2014年09月01日1. 目的 建立离心机的统一操作规程，保证检测结果准确可靠。2. 适用范围用于临床医学、生物化学、免疫学等领域，是检验科中用于离心沉淀的常规仪器。3. 职责未授权人员不得操作该仪器，授权操作人均要执行本规程，质量监督员实施日常监督，检验科定期或不定期进行检查。4. 仪器技术指标4.1 仪器名称 TDZ4-WS台式低速自动平衡离心机4.2 型号 TDZ4-WS4.3 工作原理采用直流无刷电机驱动，特殊减振器减振，自动平衡效果好，转子采用高强度塑胶压成型，转子装卸方便。智能控制，转速及时间控制精确。4.4 性能参数4.4.1 最高转速40

15、00r/min 4.4.2 最大离心加速度2380*g4.4.3 定时范围099 min5. 仪器操作步骤5.1 主机右上角推杆向里推压，打开门盖，将加样区的离心管对称置于转子中。5.2 接通电源开关，预置转速和工作时间。5.3 按下启动键，开始工作。5.4 时间至零或按停止键，自动停机，蜂鸣器叫警。5.5 按停止键进行复位，叫警停，各窗口显示上次设定值。5.6 如不需以改变设定值，按启动键即可，需改变时重新操作。5.7 不使用时，关闭电源。6. 授权操作人 郭贤莎7. 安装要求与注意事项沙市区血吸虫病专科医院作业指导书文件代号：SSXF/QCYQ0032014台式低速自动平衡离心机操作规程第

16、一版 第0次修订第2页 共2页实施日期：2014年09月01日7.1 安装要求7.1.1 台面坚实、平整，防止仪器在工作时产生振动或仪器移动。7.1.2 电源具有独立地线，严禁零线与地线共用，防止电击伤人。7.1.3 仪器四周应无腐蚀气体及电磁场干扰，防止仪器外表保护层过早失效和对电气元件的干扰。7.1.4 仪器放置水平，确保四个橡胶机脚均匀受力。7.2 注意事项7.2.1 离心机在运转时不得移动，也不要打开门盖；7.2.2 若离心机有玻璃试管破裂，会引起较大震动，应立即停机更换试管；7.2.3 若发生报警声，请关闭电源开关，重新操作；7.2.4 若电源亮，检查保险是否烧坏；7.2.5 出现异

17、常情况，不得擅自拆机维修，必须与厂家联系。沙市区血吸虫病专科医院作业指导书文件代号：SSXF/QCYQ0042014微量振荡器操作规程第一版 第0次修订第1页 共2页实施日期：2014年09月01日1.目的建立振荡器统一的操作规程，保证检测结果准确可靠。2.适用范围临床分析作各种血凝试验，被动血球凝集试验，补体结合试验，乳胶凝集试验等不可缺少的仪器，本仪器可供科研单位卫生部门及生化检验科作微量样品、生物细菌、病毒免疫、临床检验及常规化验分析之用。3.职责未授权人员不得操作该仪器，授权操作人均要执行本规程，质量监督员实施日常监督，检验科定期或不定期进行检查。4.仪器技术指标4.1仪器名称：微量振

18、荡器4.2型号：WZ-2A型4.3. 微量振荡器的特点造型美观、体积小、操作简单、敏感度高、用药量及用血量少、检测速度快5. 仪器操作步骤5.1 插上电源插头5.2 将需振荡的药品放入仪器相应位置，打开电源5.3 根据实验要求调节所需振荡速度5.4 调节所需振荡时间或常开(ON)即可。本仪器操作简单，使用方便，振荡效果明显。6. 授权操作人 郭贤莎7. 注意事项7.1 为了确保人身安，使用时必须妥善接地；沙市区血吸虫病专科医院作业指导书文件代号：SSXF/QCYQ0042014微量振荡器操作规程第一版 第0次修订第2页 共2页实施日期：2014年09月01日7.2 初次使用仪器前请先仔细阅读说

19、明书7.3 振荡器的适宜温度为040,相对湿度为80%以下7.4 长时间不使用应切断电源 - 35 -沙市区血吸虫病专科医院作业指导书文件代号：SSXF/QCYQ0052014移液器操作规程第一版 第0次修订第1页 共3页实施日期：2014年09月01日1. 目的为了规范移液器操作程序，维护仪器正常运行，特制定本规定2.适用范围适用于本所免疫学测检验科移液器操作程序。3. 职责检验人员应严格执行本规定，质量监督员对执行情况进行监督。4. 仪器技术指标4.1 仪器名称：移液器4.2 规格：0.5-50ul，10-100ul，5. 仪器操作步骤5.1 吸头安装：正确的安装方法叫旋转安装法，具体的做

20、法是，把移液器顶端插入吸头，在轻轻用力下压的同时，把手中的移液器按逆时针方向旋转180度。切记用力不能过猛，更不能采取剁吸头的方法来进行安装，因为那样做会对您手中的移液器造成不必要的损伤。 5.2 容量设定：正确的容量设定分为两个步骤，一是粗调，即通过排放按钮将容量值迅速调整至接近自己的预想值；二是细调，当容量值接近自己的预想值以后，应将移液器横置，水平放至自己的眼前，通过调节轮慢慢地将容量值调至预想值，从而避免视觉误差所造成的影响。一个需要特别注意的地方是，当我们从大值调整到小值时，刚好就行；但从小值调整到大值时，就需要调超三分之一圈后再返回，这是因为计数器里面有一定的空隙，需要弥

21、补。  5.3 预洗吸头：在安装了新的吸头或增大了容量值以后，应该把需要转移的液体吸取、排放两到三次，这样做是为了让吸头内壁形成一道同质液膜，确保移液工作的精度和准度，使整个移液过程具有极高的重现性。其次，在吸取有机溶剂或高挥发液体时，挥发性气体会在移液器室内形成负压，从而产生漏液的情况，这时就需要我们预洗四到六次，让移液器室内的气体达到饱和，负压就会自动消失。 5.4 吸液：先将移液器排放按钮按至第一停点，再将吸头垂直浸入液面，浸入的深度为：P2、P10小于或等于1毫米，P20、P100、P200小于或等于2毫米，P1000小于或等于3毫米，P5mL、P10mL小于或等于

22、4毫米（浸入过深的话，液压会对吸液的精确度产生一定的影响，当然，具体的浸入深度还应根据盛放液体的容器大小灵活掌握），平稳松开按钮，切记不能沙市区血吸虫病专科医院作业指导书文件代号：SSXF/QCYQ0052014移液器操作规程第一版 第0次修订第2页 共3页实施日期：2014年09月01日过快。 5.5 放液：放液时，吸头紧贴容器壁，先将排放按钮按至第一停点，略作停顿以后，再按至第二停点，这样做可以确保吸头内无残留液体5.6 卸去吸头：卸掉的吸头放入污物盒内，按废弃物的规定进行消毒处理。 6. 授权操作人 郭贤莎7. 保养与年度维护校准要求7.1 保养与年度维护校准频率：每半年维护一

23、次7.2 保养与年度维护校准方法：移液器标定方法包括吸取有色溶液进行光谱分析、吸取蒸馏水称量校准、吸取放射性同位素计数校准，以及使用配套校准盒等。范例：用蒸馏水称量标定移液器方法（参考芬兰Labsystems移液器标定方案）在一室温为22的小型工作室（无风）中，在万分之一级别天平上放置一个小三角烧瓶，用待标定的移液器吸取蒸馏水（隔夜存放）加入小三角烧瓶内局部，每次称重后计量，去应重后再加蒸馏水，连续加蒸馏水10次。加蒸馏水的量根据待标定的移液器不同规格而不同，见下表。移液器标定合格后，在移液器上贴上合格标签，标明日期。在移液器标定记录中写。8. 期间核查8.1 期间核查频次：两次检定的中期8.

24、2 期间核查方法8.2.1 准备检查前记录当时室温；8.2.2 接通分析天平电源，预热15分钟；8.2.3 在天平上放置一干净小烧杯，扣除空重；8.2.4 用被检加样器量取一定体积去离子水，加入烧杯中，读取并记录重量；8.2.5 扣除烧杯空重，重复称量20次并记录结果。沙市区血吸虫病专科医院作业指导书文件代号：SSXF/QCYQ0052014移液器操作规程第一版 第0次修订第3页 共3页实施日期：2014年09月01日附：不同室温下水的密度温度(ºC)水的密度(g/ml)温度(ºC)水的密度(g/ml)150.99913230.99756160.99897240.99732

25、170.99880250.99707180.99862260.99681190.99843270.99654200.99823280.99626210.99802290.99597220.99780300.99567沙市区血吸虫病专科医院作业指导书文件代号：SSXF/QCFF0012014间接血凝试验 （IHA）第一版 第0次修订第2页 共2页实施日期：2014年09月01日1适用范围1.1 可作为血吸虫病的辅助诊断。对无血吸虫病病史和距末次治疗3年以上的血吸虫病把你个人，IHA1：10时可予以治疗。1.2 在血吸虫病流行区，该法可作为过筛或综合查病的方法。确定化疗靶人群。1.3 可用该法进行

26、血清流行病学检查。2原理：将可溶性血吸虫卵抗原（SEA）吸附于红细胞载体上，使成为致敏红细胞。这种红细胞与病人血清中的抗体相遇是，在适宜条件下，由于红细胞表面吸附的抗原和特异性抗体相结合，红细胞也被动地凝结起来，肉眼可见，称阳性反应。3试剂、材料：生理盐水、V型微量血凝反应板 、冻干血球、微量加样器4样品：新鲜无污染血清5检测方法：5.1 启用安瓿，每支以1ml蒸馏水稀释混匀备用。5.2 用微量加样器加100ul生理盐水于V型微量血凝反应板第一排第二孔内，第三孔空白，第四孔加25ul。5.3 第一孔内储存待检血清，并从中吸取血清25ul加入第二孔内，充分混匀后，分别吸出25ul加入第三孔和第四

27、孔，使第三孔和第四孔血清稀释度为1：5和1：10.5.4 用微量加样器吸取致敏红细胞悬液，于第三孔和第四孔内各加1滴，立即旋转震摇2min，37下静置半小时后观察结果。5.5 每次试验均应有阳性血清作阳性对照，阴性血清（生理盐水）作阴性对照。6结果判断6.1 本实验阳性对照出现凝集反应，阴性对照不出现凝集反应，结果方可成立。6.2 阴性反应为红细胞全部沉入孔底，肉眼见一边缘光滑，致密的小圆点。6.3 阳性反应： + 红细胞形成薄层凝集，边缘呈现不规则的皱褶。 + 红细胞形成薄层凝集，充满整个孔底。 + 红细胞形成薄层凝集，面积较“+”者小。沙市区血吸虫病专科医院作业指导书文件代号：SSXF/Q

28、CFF0012014间接血凝试验 （IHA）第一版 第0次修订第2页 共2页实施日期：2014年09月01日 + 红细胞大部分沉积于孔底，形成一圆点，周围有少量凝集的红细胞，肉眼见周边模糊（或中间出现较为明显的空白点）。6.4 反应标准：以血清1:10稀释，出现凝集反应判为阳性。沙市区血吸虫病专科医院作业指导书文件代号：SSXF/QCFF0022014胶体金渗滤法 （DIGFA）第一版 第0次修订第1页 共1页实施日期：2014年09月01日1 适用范围1.1 可作为血吸虫病的辅助诊断。对无血吸虫病病史和距末次治疗3年以上的血吸虫病把你个人，IHA1：10时可予以治疗。1.2 在血吸虫病流行区

29、，该法可作为过筛或综合查病的方法。确定化疗靶人群。2 原理：预先包被血吸虫抗原空白反应板，可特异性结合人血清中相应的抗体，形成抗原抗体结合物。然后，红色胶体金颗粒标记的第二抗体岁形成的金标探针，与复合物中的抗体结合，滞留在反应板上，形成肉眼可见的红色斑点。3 试剂：（1）预处理空白反应板（2）洗涤液（3）金标抗体液4 器材：50-100ul移液器5 样品：新鲜无污染血清6 检测方法：6.1 将试剂盒去取出，置于室温下回暖，编号待用。6.2 在反应孔中间加入2滴洗涤液，待液体完全渗透。6.3 在反应孔正中央加入50ul新鲜待检血清，待血清完全渗透。6.4 加入2滴洗涤液，待液体完全渗透。6.5

30、加入2滴金标抗体液，待液体完全渗透。6.6 加入2滴洗涤液，待液体完全渗透，观察结果。7. 结果判断7.1 检测点和质控点都出现红色，即为阳性反应。7.2 质控点出现红色带，检测点无显色为阴性反应7.3 检测点和质控点都未出现红色表示结果无效。8. 注意事项8.1 检测血清必须新鲜，否则会影响检测结果，陈旧血清应常规离心5分钟，取其清亮透明。8.2 结果判定，以即时观察为准，若长期保存，将反应板正面朝下放置即可。8.3 反应板开封后应尽快使用，未用的要立即放入自封袋中密闭冷藏。沙市区血吸虫病专科医院作业指导书文件代号：SSXF/QCFF0032014尼龙绢集卵孵化法第一版 第0次修订第1页 共

31、3页实施日期：2014年09月01日1. 器材准备4060目/英寸铜丝筛、260目/英寸尼龙绢袋、250ml三角烧杯、搪瓷杯、竹筷、尼龙绢袋支架、淋水用橡皮管、水桶、明矾、漂白粉等。2. 操作步骤2.1 取受检者粪便约30g，先置于4060目/英寸的铜丝筛中，铜丝筛置于下口夹有铁夹的尼龙绢(260目/英寸)袋口上，淋水调浆，使粪液直接滤入尼龙绢袋中，然后移去铜丝筛，继续淋水冲洗袋内粪渣，并用竹筷在袋外轻轻刮动助滤，直到滤出液变清。取下夹于袋底下口的铁夹，将袋内沉渣淋洗入三角烧瓶中。2.2将盛有粪便沉渣的三角烧瓶加去氯水至离瓶口1cm处，放入孵化室(箱)或在室温下孵化，最适宜的孵化温度

32、为2226。2.3毛蚴观察：温度高时毛蚴孵出早；温度低时毛蚴孵出迟。气温超出30时，第一次观察可在0.51h后进行，阴性者可在4h后观察第2次，8h后观察第3次，3次均为阴性者，判作阴性结果；气温在2630时，可在孵化后4h开始观察，阴性者可在8h及12h后，再各观察1次；气温在2025时，则可在8h后观察第1次，12h后观察第2次；如利用自然气温孵化，一昼夜之间的气温悬殊，可在操作后的次晨再观察1次；气温在20时，则在孵化后12h和24h后，各观察1次。一般室温在20上下时，可利用自然气温孵化，无须加温，观察时要注意毛蚴与水中原生动物的区别，如有怀疑，需有2位专业人士共同确认。3. 质量控制

33、3.1标本要求3.1.1村本盒：切勿用包过农药、化肥或其他化学品的纸张包粪便。3.1.2留取标本：采集的粪样必须新鲜，每个粪样在30g以上，夏季不宜超过l2h，冬季不宜超过24h，粪量不足30g的应退回再送。3.1.3 标本保存和运输：注意防高温、干燥和暴晒，粪便外层虫卵多于内层，因黏附易丢失虫卵。3.1.4取才的部位：粪便中虫卵的分布以外层多于内层，头段多于尾段。3.1.5被检的粪量：3050克粪卵（100克含10个卵）检出率为100，20克检出率为80，10克检出率为40。沙市区血吸虫病专科医院作业指导书文件代号：SSXF/QCFF0032014尼龙绢集卵孵化法第一版 第0次修订第2页 共

34、3页实施日期：2014年09月01日3.2孵化用水3.2.1自来水：一般要放缸内过夜，让其自然脱氯或在水中加入小量硫代硫酸钠（每50kg水中，加硫代硫酸钠0.20.4g）除去余氯，0.5h后使用。3.2.2河水或井水：可将水加热至60或经过滤，经除去水虫。也可用漂白粉杀虫，（每50kg水中加含氯石灰0.35 g或次氯酸钙0.17 g）混匀揭开缸盖，让氯自然逸散，夏季6h,气温低时经24h，余氯全部逸去。3.2.3孵化用水适宜酸碱度：PH7.27.6,即弱碱性。3.3适宜温度：5左右是适宜的孵化温度，室温低于20以下或更低时，必须加温。4. 方法学评价4.1优点4.1.1毛蚴计数高。4.1.2可

35、缩短操作时间、节约用水、减轻劳动强度。4.1.3由于不需换水，所经23min即可入瓶孵化。4.1.4器材轻巧，携带方便。4.1.5在调浆、灌瓶实现管道化和形成操作流水线的基础上，还可进一步提高检出率或提高工效。4.2缺点4.2.1工作量大、操作繁琐。4.2.2观察结果的流程时间较长。4.2.3在现场受温度、水质或操作者技术方面的影响，具有一定的局限性。5. 注意事项5.1清洗工作5.1.1一切用具每次用后都必须洗刷3次以上，盆中洗刷用水要经常调换5.1.2用6080 热水浸泡杀卵5.1.3尼龙绢袋每次使用后，需以清水冲洗和将尼龙绢袋正反面多次反复洗刷，经防尼龙绢孔粘有虫卵。5.1.4用80 热

36、水浸泡23min，经达到杀卵的目的，避免交叉污染。5.2尼龙绢袋的更新：用过的尼龙绢袋要经常检查，凡是使用过久，孔目变形或破损者要及时剔除，以免影响效果。沙市区血吸虫病专科医院作业指导书文件代号：SSXF/QCFF0032014尼龙绢集卵孵化法第一版 第0次修订第3页 共3页实施日期：2014年09月01日5.3废物处理：残余的粪便、粪渣、粪水、和沉渣必须集中在粪桶里用药物杀卵然后倒入指定的沉淀粪池中贮存，防止病原扩散沙市区血吸虫病专科医院作业指导书文件代号：SSXF/QCFF0042014改良加藤厚涂片法（KatoKatz)第一版 第0次修订第1页 共2页实施日期：2014年09月01日1.

37、 意义 本法对血吸虫卵等多种蠕虫卵定量检查具有满意效果，适宜检测常见蠕虫的感染度、患病率和开展对日本血吸虫病病人粪便虫卵计数，在流行病学调查和防治效果考核中具有实用价值。2. 原理 尼龙绢滤除粪便中的粗渣；定量板获取定量粪便；利用甘油对粪便、虫卵等的透明作用；孔雀绿显微镜视野光线柔和，减少眼睛疲劳。3. 器材准备 甘油孔雀绿溶液、亲水性玻璃纸、定量板、尼龙绢片、载玻片、塑料刮片等。4. 操作步骤4.1置尼龙绢片于受检粪样上，用软性塑料刮片在尼龙绢片上轻刮，粪便细渣即由绢片微孔中露至绢片表面。4.2将定量板(孔中可容粪量41.1mg)放在载玻片中部，以刮片从尼龙绢片上刮取细粪渣填入定量板的中央孔

38、中，填满刮平。4.3小心提起定量板，粪样即留在载玻片上。4.4 取一张经甘油孔雀绿溶液浸渍24h的亲水性玻璃纸（30×30mm），盖在粪便上，用另一块载玻片覆于玻璃纸上轻压，使粪便均匀展开至玻璃纸边缘。4.5编号后置于室温25，相对湿度75下过夜，有2位专业检测人员进行独立镜检。4.6每份粪样均做3张涂片，镜检阳性者分别记录每张涂片的虫卵数，每张涂片检出的虫卵数的平均值乘以24即为1g粪便中的虫卵数(EPG)。计算公式：单孔（EPG）=A×24 双孔（EPG）=A×12三孔（EPG）=A×85. 质量控制5.1亲水性透明玻璃纸使用前需全部浸入透

39、明液中，浸泡24h以上，使玻璃纸显示绿色或蓝色。5.2把刮片上的细粪渣填入定量板时，必须填满中央孔全孔并抹平；压制涂片时尽量使粪便均匀展开至玻璃纸边缘，但应避免粪渣溢出。5.3加藤片透明的速度取决于温、湿度，一般放置室温过夜即可，冬季温度较低时则需置25沙市区血吸虫病专科医院作业指导书文件代号：SSXF/QCFF0042014改良加藤厚涂片法（KatoKatz)第一版 第0次修订第2页 共2页实施日期：2014年09月01日温箱内以加快透明，但切忌放置于太阳光直射下加快透明，避免加藤片脱水过度，而影响镜下虫卵的观察。5.4将透明后的加藤片置于光学显微镜的载物台上，在低倍镜（10×）下

40、进行镜检，镜检时仔细检查每一视野，并特别注意与未受精蛔虫卵的鉴别。5.5虫卵计数原则：数上不数下，数左不数右,记录全片血吸虫卵的数量。5.6 每张涂片必须有2位专业检测人员独立阅片。虫卵计数平均EPG差别大于24时，需双方再次镜检确认。6. 方法学评价6.1应用范围：在病原学技术中，kato-katz法是定性、特别是定量检肠道血吸虫和土源性蠕虫感染的相对标准化的方法，适宜检测常见蠕虫的感染度、患病率，在流行病学调查和防治考核中具有实用价值。6.2优点6.2.1方法简便，定性、定量一次性完成。6.2.2操作过程中不像集卵法、孵化法那样有虫卵散失的缺陷，因而定量相对准确。6.2.3涂片制作后可长期

41、保持（薄壳虫卵除外），便于质量管理和控制，也便于合理安排查病时间。6.3缺点6.3.1敏感性低，不太适合在低感染（度）地区查病：标准的kato-katz涂片取粪便的量是41.7mg，理论上其检测的下限是24个虫卵/克粪便（EPG）。但在实际工作中人们发现EPG小于100（甚至400）时，其漏查率仍很高。6.3.2有时虫敏感性低，不太适合在低感染（度）地区查病。6.3.3薄壳虫卵在涂片中形态变化非常大，这初学者难以辨认而漏检。6.3.4kato-katz涂片中虫卵形态较直接涂片法中虫卵变化大，虫卵不易辨认，造成误差。沙市区血吸虫病专科医院作业指导书文件代号：SSXF/QCFF0052014钉螺解

42、剖方法第一版 第0次修订第1页 共2页实施日期：2014年09月01日1. 意义 钉螺解剖不仅是制订灭螺规划和消灭钉螺的依据，而且是考核灭螺效果，研究血吸虫病流行病学必须的工作。2. 器材准备 去氯水、吸管、手套、碘酊、载玻片、解剖针、解剖镜等。3. 钉螺死活的鉴别法3.1温水法 将钉螺洗净后放入盛2025 左右温水的平皿或瓷杯中，观察15min后发现凡有开厣活动即为活螺。反之为死螺钉螺3.2敲击法 将钉螺置于厚玻片或硬物上，用小铁锤轻击使之破碎，如未见钉螺有收缩反应，且未见新鲜软体组织者为死螺。反之为活螺。 3.3爬行法 将草纸铺于平底瓷盘底部，在草纸中心上画直径为5cm的圆圈，瓷盘内加入少

43、许脱氯水使草纸湿润。将钉螺置于草纸上的圆圈内，置室温（2025 ）下放置24小时后，观察钉螺爬动情况。若钉螺爬到圈外，则为活螺。在原位不动则为死螺。 4. 钉螺检测方法4.1压碎法 将待检钉螺放于两张载玻片之间压碎，每只钉螺加1滴水，然后在解剖镜或显微镜下用解剖针拨开外壳，撕碎钉螺肝脏，发现有血吸虫尾蚴和（或）子胞蚴者为感染性钉螺4.2逸蚴法 将单只钉螺置于指形试管内，加脱氯水至试管口，用尼龙纱盖好管口。置2025、光照条件下，48 h后用放大镜或解剖镜在灯光下观察指管水面有无血吸虫尾蚴。5. 感染性钉螺的鉴别5.1如在螺体内找到日本血吸虫的母胞蚴、子胞蚴或尾蚴，即可确定为感染性钉螺。5.2但

44、血吸虫的母胞蚴比较小，在解剖剖镜下不容易发现，所以一般解剖只需要观察螺体内是否有血吸虫的子胞蚴和尾螺。5.3钉螺是日本血吸虫的唯一中间宿主，但日本血吸虫并不是唯一一种寄生于钉螺体内吸虫，钉螺体内可以是多种吸虫的中间宿主，故须认真鉴别，必要时将其吸出，在显微镜下鉴别。 6. 注意事项6.1钉螺外壳（尤其是钉螺内脏囊部位）要充分压碎，使钉螺的肝脏等充分暴露，提高观察的准确性。 沙市区血吸虫病专科医院作业指导书文件代号：SSXF/QCFF0052014钉螺解剖方法第一版 第0次修订第2页 共2页实施日期：2014年09月01日6.2解剖镜要放大倍数要适当，过小会影响观察的效果，过大易使解剖者的眼睛产

45、生疲劳，且降低观察的效率。 6.3操作时做好个人防护，戴好乳胶手套，防止在操作过程中受到感染。 6.4解剖结束后使用的玻片、镊子等解剖工具，要用开水等进行彻底的杀蚴消毒，防止可能存在的尾蚴引起他人感染。 沙市区血吸虫病专科医院作业指导书文件代号：SSXF/QCFF0062014检验科消毒液配制方法第一版 第0次修订第1页 共1页实施日期：2014年09月01日1. 目的 为使实验工作科学、高效、安全、顺利开展，规范配制使用消毒剂。2. 适用范围 适用于检验科日常工作。3. 职责 检验科工作人员必须严格配制方法进行配制。4. 配制方法4.1 75%酒精的配制：量取395mL95%的医用酒精，加入

46、纯水稀释至500 mL.4.2 含氯消毒剂的配制：4.2.1将8片健之素加入1升纯水中配制成终浓度为2000mg/L含氯消毒剂，用于工作台面的擦拭消毒；将20片健之素加入1升纯水中配制成终浓度为5000mg/L含氯消毒剂，用于意外泼溅污染的消毒。4.2.2用84消毒液配制，利用不同84消毒液含氯量的不同，配制成终浓度为5000mg/L的复合含氯消毒剂。沙市区血吸虫病专科医院作业指导书文件代号：SSXF/QCQT0012014检验科安全管理制度第一版 第0次修订第1页 共2页实施日期：2014年09月01日1目的 为实验工作科学、高效、安全、顺利开展，保护良好的实验环境，杜绝检验科污染。2适用范

47、围 适用于检验科日常工作。3职责 检验人员应严格执行本制度。 质量监督员不定期检查本制度执行情况。4安全管理制度4.1检验科要求4.1.1有专用检验科，应划分清洁区、半污染区和污染区，并有明显标记，有充足的操作空间；4.1.2检验科墙面、地面、台面材料应耐酸、耐碱，易清洁消毒、不渗漏液体；室内应有防蚊、防蝇、防鼠等设备；4.1.3检验台上应装置紫外灯；4.1.4备有消毒药品、消毒器材和设备；4.1.5装有脚踏或感应流水装置，备有冲眼睛水，足够的一次性手套、口罩、隔离服和防护眼镜；4.1.6清洁区（间）备有存放个人衣服、用品的设施；4.1.7检验科应装置恒温设备，工作时室温保持在2025。4.2

48、安全操作4.2.1检验科工作人员要熟悉生物安全操作知识和消毒技术；4.2.2不得在检验科内喝饮料、吸烟、吃食物和化妆打扮等；不得在检验科内会客；4.2.3检验科用品（包括工作服）不得用于其他用途；不可将私人和无关的物品带入检验科；4.2.4工作时，要戴手套、穿工作衣，操作时手套破损应立即丢弃、洗手并带上新手套；4.2.5不要用戴着手套的手触摸暴露的皮肤、口唇、眼睛、耳朵和头发等；4.2.6尽量避免使用尖锐物品和器具；宜用不易破碎材料制品；禁止用口吸任何物质；4.2.7工作结束后，要对工作台面消毒，如用消毒液清洗后要干燥20分钟以上；操作时有标本、检测试剂外溅时应及时消毒；平时要保持环境整洁；4

49、.2.8工作完毕，脱去手套后洗手，再脱去工作衣，用肥皂和流动水洗手；4.2.9遇有意外事故，应立即处理并分别以口头和书面报告上级部门，并填写意外事故登记表。如工作人员皮肤被刺伤，可以用流动水局部清洗或用刺激性较轻的含氯创伤消毒剂浸泡皮肤创口；样品或检测试剂溅入眼内立即用生理盐水冲洗，溅入嘴内，先吐出残留的液体后，用水反复漱口；4.2.10遇有高危的意外事故发生，除进行局部处理外，应立即向上级主管部门报告，组织专家组对意外事故危险度进行评估，按专家组拟定预防措施进行处置。4.3标本、试剂管理和废弃物品消毒处理4.3.1血液标本置于合适容器内，加盖盖紧后运送，切勿污染盛器外部。如果盛器被污染，要用消毒液消毒。也可将血样置于有盖的塑料管内，外面套上塑料袋，封口，连同送检单一并运送，有血液外溢时，立即用消毒液消毒；4.2.2各种试剂和化学品均应贴有标签，放置于合适的位置，实验台上不放置不必要的物品。任何测试用的样品和试剂不宜置于桌面或架子的边沿，以防滑落打破，污染环境。一旦污染，先