制订抗生素有关物质标准的指导原则(草案)

1、制订抗生素有关物质标准的指导原则（草案）欧洲药物管理局（ema）2010 年 7 刀 14欧洲药物管理局（ema）/a类药物组（chmp） /动物药物组（cvmp）/质量工作小组（qwp）/199250/2009人类药物组（chmp） /动物药物组（cvmp）使用（cvmp）制订抗生素有关物质标准的指导原则（草案）目录 执行摘要1. 介绍（背景）2. 范围3. 法律依据4. 基本要求5. 杂质谱以及报告、鉴定及控制限度5.1. 半合成活性物质5.2. 发酵制成的活性物质，单一化合物3.发酵制成的活性物质，多组分新应用和变化6. 1.新活性物质未纳入欧洲药典的已知活性物质 6. 3.纳入欧洲药典

2、的活性物质6. 3. 1.纳入欧洲药典，已公开和鉴定方法的已知活性物质6. 3. 2.纳入欧洲约典，已公开，无鉴定方法的已知活性物质6. 3. 3.纳入欧洲药典的已知活性物质，未公开3. 4.药典专论修订药物制剂的标准分析方法定义参考文献附录：关于限度的注释执行摘要目前市场上的抗生索活性物质是通过化学合成、发酵或发酵后一次或多次合 成步骤（半合成物质）等方式制造的。与合成工艺相比，发酵工艺中可变性更人, 可控性更低，因此与纯合成产品相比，在生产小含有发酵工艺的活性物质的杂质 谱可能更复杂及难以预测。由于上述原因，发酵产品和半合成产品未包括在ich q3和vich 10/11指导原则之内，这些指

3、导原则就化学合成活性物质中引入的杂 质的鉴定、报告和控制限度制订了质量标准。木指导原则旨在为未包括在上述（v） ich指导原则中的内容提供如下指导, 即如何规范发酵产品或源于发酵产品的半合成物质的抗生素中的有关物质。指导原则中制订了抗生素药品中有关物质的报告、鉴定和控制限度，这些的 品中的活性物质通过发酵或半合成得到。对于某些情况，如活性物质由几种密切 相关的化合物混合组成，可能难以适用通行的限度，提供了常规原则，就如何制 定具体限度、标准以及如何确定杂质谱限度进行了规定。对于指导原则小的要求 与欧洲药典中对应章节及各论z间的关系也进行了解释。介绍（背景）目前市场上大部分抗生索是通过化学合成或

4、发酵方式得到。在某些情况下， 通过发酵所得到的抗生索，其化学结构可通过多步合成工艺进一步修饰之后，在 制剂生产小做为活性物质使用（半合成物质）。和纯化学反应和比，发酵工艺涉及到生物系统，预测性丼，可控性低，且更 为复杂。因此发酵产品的波动性比化学合成产品更大。所以，发酵产品的杂质谱 比合成产品更为复杂和难以预料。为此,发酵产品以及由此得到的半合成物质并未包含在ich q3和vich 10/11 指导原则中，这些指导原则制订了化学合成活性物质中有关物质的鉴定、报告和 控制限度。指导原则屮对限度的定义是，如果超出了该限度，该杂质即应该被鉴 定、报告或控制，该限度同样适用于欧洲药典总论“药用物质”

5、o发酵产品及其 半合成衍生物不在该总论范围内。没有其他指导原则的情况下，这些产品中的有关物质曾经根据一对一 （case-by-case）的方式进行评估，这导致了相同抗生素或同类抗生素中的不同 化合物（如头砲菌索）可能存在不同的杂质限度。因此，在批准新抗生索时能有 连贯一致的措施来制定朵质限度是十分必耍的。所以需要基于常规操作和经验的基础制定指导原则，为规范含发酵工艺抗生 素的杂质限度提供建议。该指导原则中对此都有所提及。即便如此，如有必要，根据原料药/制剂的使用和暴露情况，在某些情况下 更高的限度要求是合理和可行的。范围木文件的规范对象为巾请上市许可，为发酵所得或发酵后半合成所得的抗生 素（即

6、，抗细菌物质）中的有关物质制定标准。未来叮能将把范围扩大到其他抗 生索（如抗真菌物质）。文件为活性物质和药物制剂中的有关物质的范围和标准 提供指导。该指导原则不适用于用于临床试验的研究性药物制剂中的新活性物 质。本指导原则中提供了有关物质的报告，鉴定和控制限度。对于由几种密切相 关的化合物混合组成的抗生素活性物质，这些基木要求可能很难适用，提供了常 规原则，就如何制定具体限度、标准以及如何确定杂质谱限度进行了规定。此原 则小的限度适于一系列基本要求，可根据特定物质或产品的不同情况进行调整。 如有必要，可以引入更多的要求，例如安全性原因。本指导原则不包括发酵工艺中产生的残渣，如來自微生物发生器、

7、培养基、 基板和产物母体的残渣。该部分内容包含在欧洲药典总论“发酵产品”中。（该 论著适用于发酵生产的物质，不适用于半合成物质）。本指导原则适用于上市许可新申请和新厂商变更。本指导原则不具有追溯效 力的应用，但将作为建立最佳实践以及修止相关欧洲药典的激励原则。对于新巾 请者，应该将本指导原则的应用与任何现有欧洲药典活性物质的内容相结合。法律依据木指导原则必须与如下内容相结合：介绍、通则（4）以及作为指导原则 2001/82和2001/83增补的附录i第1部分。基本要求杂质谱在很大程度上取决于制造工艺；即使对于相同的微生物菌株，其杂质 谱也不尽相同。通常，纯化步骤包括柱层析过程，另外，超滤对于获

8、得足够纯度 的活性物质可能至关重要。半合成药物未包含在欧洲药典总论“发酵产品”中。但是若有必要，发酵所 得起始原料的标准应该遵守现有指导原则，包括总论中描述的基本概念。发酵后合成途径越短，发酵起始原料越复杂，和欧洲药典总论的相关性也就 越多。因此，对于半合成抗生素，需耍详细描述发酵步骤以及总论中耍求的其他 方而，尤其是纯化步骤应有详细描述，除非能够证明发酵起始物质以及发酵后合 成步骤的数量和/或性质并不复杂。这些合成步骤应该能促使最终活性物质中发酵副产品的相关损耗和失活，所 以，某些反应如发酵产品的酯化，醯化和成盐反应（如：红霉素乙基琥珀酸酯或 红霉素乳糖酸盐等红霉素衍牛物）并不认为是重要的合

9、成步骤，省略对发酵工艺, 特别是对纯化过程的详细描述是叮行的。在发酵起始原料并不复杂的情况下，考虑到发酵后合成步骤的数量和性质， 提供发酵起始原料的适宜内控标准被认为是符合耍求的，内控标准包括含量测 定、组分分布（如果相关），有关物质（明确的朵质、不明确的朵质以及总杂质）。 这在任何情况下都应是合理的。发酵后产生的有关物质包括副产品，中间体和降解产品。对于半合成产物， 杂质也包括发酵起始原料以及该起始原料屮的有关物质，合成副产品（包括起始 原料中朵质的合成副产物），合成中间体和降解产品。对关键小间体应制订质量标准。质量标准应包括明确的朵质和单个未知朵质 的限度。巾请人应提供一份对潜在杂质的讨论

10、报告，包扌舌如何去除这些杂质以及 活性物质中将出现何种杂质。即使通过发酵或半合成方法生产的抗生索，其结构也能得到准确鉴定，因此 可以有效地纯化。对于通过半合成生产的活性物质，发酵起始原料的质量非常重 要。对于发酵而成的抗生素，其活性物质可能由密切相关，显示相关生物活性的 化合物混合而成。在此种情况下制定标准时，可能很难明确某化合物是活忤物质 的一部分，还是应该被认为是杂质(如庆大霉素)。应该基于临床前和临床研究 来定义何种物质是否屈于活性物质成分，如下情况除外：该活性物质已经纳入欧 洲药典，活性物质的各成分已被明确。没有被定义为活性物质成分的和关化合物 则被认为是有关物质。ich q3和vic

11、h gl 10/11指导原则以及“新活性物质化学”指导原则 (cpmp/qwp/130/96 rev 1, emea/cvmp/541/03)中的限度不适用于发酵产品的 发酵产品所得的半合成药品。此外，当前指导原则中没有给出具体指导的内容, 可以参考上述指导原则屮的原则。杂质谱以及报告、鉴定及控制限度对于抗生素药品，朵质谱应参照ich 3qa (vich gl10)小的指导。依照该指导，对于有关物质，应按如下方法设置限度：每个明确的已知杂质每个明确的未知杂质任何不明确的朵质，可接受标准不超过鉴定限度。总杂质在实践表明无法鉴定某个杂质的特殊情况下，至少要提供此杂质结构的充分 证据來表明它叮归属为

12、母体化合物的有关物质。这种情况下，应将其作为明确的 未知杂质使用适当的分析标识物进行识别，如高效液相色谱法相对保留时间。在朵质谱非常复朵或两种朵质卄常相似的情况下，可能难以获得有效的色谱 峰分离度。这种情况下，则必须将未分离色谱峰合并后制定限度。若有可能，合 并后的色谱峰限度应符合上述限度要求。在控制方面，则应考虑毒理学研究中各 批次的杂质组成情况。作为常规原则，和母体化合物结构并不密切相关的朵质（如后5. 3章所述） 应采用ich q3a （vich gl10）小的限度，下一段落小说明的例外情况除外。因为上述第4章节中提及的原因，同时考虑到大部分情况下抗生素治疗时间 是有限的，抗生素有关物质

13、的限度比q3a/gl10更高，不同种类抗生素限度也不 尽相同。后而会给出限度的说明。5.1.半合成活性物质半合成药物是通过将发酵起始原料通过一系列合成反应得到，合成工艺至少 包括共价键的形成和分裂，之后还有萃取/纯化步骤。制定有关物质的可接受标 准限度吋应符合下述要求。q3a规范的报告，鉴定和控制限度适用于此。对于兽用活性物质，只适用于 vich gl 10的报告，鉴定和控制限度（分别为0. 10%, 0. 20%和0.50%）。如果半合成活性物质由密切相关的化合物混合组成，其限度则有必要提高， （见5. 3发酵制成的活性物质，多组分的限度要求）。应对提高的合理性进行证 实。52发酵制成的活性

14、物质,单一组分有关物质的可接受标准的制定应符合下述限度。报告限度：0. 10%鉴定限度:0. 15% 控制限度:0. 15%兽用活性物质，仅适用vich gl 10的报告，鉴定和控制限度标准（分别为 0. 10%, 0. 20% 和 0. 50%） o53发酵制成的活性物质,多组分有关物质的可接受标准的制定应符合下述限度。报告限度：0. 10%鉴定限度：0. 15%控制限度:0. 50%/0. 15%仅做兽用的活性物质则采用如下限度报告限度:0.10%鉴定限度:0. 20%控制限度：0. 50%与母体化合物结构密切相关的有关物控制制限度为0. 50%,其他有关物质的 控制限度为0. 15%,二

15、者同时适用。如果申请人声明有关物质（未包含在活性物 质中的化合物）与母体化合物密切相关，必须釆用高效液和色谱/质谱分析法或 高效液相色谱/二极管阵列检测器或使用分析标识物进行证实。建议同时采用 0. 50%/0. 15%的控制限度，直至fi剂量大于等于2g时，这可能和其中部分抗生索 的用量相关。对于每种抗生素，改善纯化步骤，降低朵质含量至控制限度以下，可能比提 供安全性资料更好更便捷。现已公认的是，将已知活性物质与原研产品杂质谱进行对比更有助于杂质谱 的鉴别。新应用和变化新活性物质应鉴别朵质谱，鉴定每个单独的杂质，若有必耍，应通过适当的非临床和临 床试验进行控制。未纳入欧洲药典的已知活性物质应

16、鉴别杂质谱，鉴定每个单独的杂质。若有必要，应通过适当的非临床实验 和其他合适手段进行控制，包括参考已批准的材料。纳入欧洲药典的活性物质6. 3.1.纳入欧洲药典，已公开和有鉴定方法的已知活性物质|应鉴别杂质谱，鉴定每个单独的杂质。己知杂质的控制应依据专论要求。应对新杂质进行鉴定，若有必要则需符合该指导原则。|某些专论含有“杂质鉴定”章节，对于主要杂质色谱峰，采用与主成分色谱峰 的相对保留时间进行了描述。部分情况下对欧洲药典标准物质的使用部分有所描 述。应对新杂质进行控制，若有必要，需通过一系列适当的非临床实验或其他合 适方式使其符合该指导原则。6. 3. 2.纳入欧洲药典，已公开，无鉴定方法的

17、已知活性物质应鉴别朵质谱，鉴定每个单独的朵质，若有必耍符合该指导原则，则需参照 专论的公开。已知杂质应根据专论要求进行控制。应对任何新杂质进行鉴定和控制，若有必要，则需通过菲临床实验或其他适 当方式，包括参考原研者材料来使其符合该指导原则。6. 3. 3.纳入欧洲药典的已知活性物质，未公开若有必要遵循此指导原则，则需对杂质谱和每个单独杂质进行鉴别。应对新杂质进行控制，若有必要，则需通过适当的菲临床试验或其他合适方 式，包括参考新型材料，以使其符合该指导原则6. 3. 4.药典专论修订在下列情况下，应对药典专论进行修订：已知杂质的鉴定方法已建立 新杂质已被鉴定或进行了控制药物制剂质量标准有关物质

18、是降解产物，应制订其限度。源于原料药生产工艺的朵质不需耍详 细说明，当其为降解产物时除外。朵质谱信息可通过原料药供应商获得。有关物质可接受标准应符合下述限度范围。关于成品，在当对产品进行任何 开包/重溶/稀释（使用贮藏期内）后，和同的标准应适用于该产品。以下情况例 外，通过适宜的控制数据进行证实，如与原研产品进行比较。半合成活性物质：报告限度：0. 1%鉴定和控制限度：0. 2%发酵制成的活性物质，单一化合物报告限度:0.15% 鉴定限度：0. 2% 控制限度:0. 2%产口发酵的活性物质，多组分：报告限度:0.15%鉴定限度:0. 2%控制限度:0. 5%/0. 2%对于所有三种活性物质，根

19、据ich q3b低剂量的剂量/限度规定，可能需耍 制定更高的鉴定和控制可接受标准。对于兽用药品，适用于vich gl 11指导原则中的鉴定和控制限度（分别为0. 3%, 1.0% 和 1.0%） o分析方法在分析最终活性物质和制剂时，只要可能，应使用外标法来计算重量比w/w, 以便评佔和排除任何可能的质量不平衡。如果使用面积归一化法，和关成分和有 关物质应在检测器中产生相似的响应，否则应使用响应因子进行校正。而积归一化法可用于某些由多组分构成的活性物质。而积归一化法屮的而积 百分率的计算基础是色谱图中的总面积，而不是使用外标。这也可用于分析和关 中间体。在用面积归一化法时，应证实预期的线性范围

20、，并提供明确定义的可忽 略标准。在控制朵质谱并与原研产品进行对比吋，需使用有充分专属性的分析方法。 对于复杂的混合物，分离技术（如高效液相色谱法）应与质谱分析（或二极管阵 列检测，如果可行）相结合。如果可行，对于日常测试可采用更简单的方法。分析方法的定量限不应高于（w）报告限度。对于弱发色团的物质，则可能需 要提高报告限度。定义发酵活性物质：微牛物如细菌、酵母、真菌和微藻等的初级或次级代谢物, 与微生物是否通过传统工艺或dna重组技术改造无关。参考资料impurities in new drug substances (revised)'(cpmp/ich/2737/99) (ich

21、q3a(r)impurities in new drug products,(cpmp/ich2738/99) (ich q3b(r)'control of impurities of pharmacopoeial substancesxcpmp/qwp/l 529/04 andemea/cvmp/059/04-final)'specificati ons: test procedures and accepts nee criteria for new drug substa nces and new drug products: chemical substances,(c

22、pmp/ich/367/96)(ich q6a)'assessment of the quality of medicinal products containing existing/known active substances,(emea/chmp/cvmp/qwp/296289/2008)impurities in new veterinary drug substances'(emea/cvmp/vich/837/99rev.1) (vich 10(r)impurities in new veterinary medicinal products'(emea/

23、cvmp/vich/838/99rev.1) (vich 11(r)test procedures and acceptanee criteria for new veterinary drug substances and new medicinal products: chemical substances'(emea/cvmp/vich/810/04-corrigendum) (vich 39)'chemistry of new active substances'(cpmp/qwp/130/96 rev 1)'new impurities control

24、: setting specifications for antibiotics and synthetic peptides: proceedings from edqm symposium, strasbourg 21-22 september 2006*12 european pharmacopoeia general chapter 5.10 'control of impurities in substances for pharmaceutical use513. european pharmacopoeia general mono graph products of fermentation,附录：关于限度的注释制定限度时，抗生素的分类依据为其制备