细胞产物分析答案

1、1、名词解释1、细胞产物 细胞代谢产生的物质通称 。 细胞产物是细胞新陈代谢等生命活动中所产 生的代谢产物，不是生命体的结构成分，但有的细胞产物具有调节、免疫等功能 。从生 源来看包括植物、动物、微生物的细胞代谢产物。2、吸收光谱法 是基于被测物质的 分子 对 光 具有选择吸收的特性而建立的分析方法3、超声波辅助提取法超声波辅助提取法是利用超声波具有的机械效应、空化效应及热效应， 通过增大介质分子的运动速度， 增大介质的穿透力以提取细胞中有效成分的方 法。4、保留时间一种化合物在规定条件下在层析系统中的运行时间。5、展开剂 提取分离时，用来分离极性不同的两种物质的溶剂叫做展开剂。6、光谱法 光

2、谱法是基于物质与辐射能作用时，测量由物质内部发生量子化的能级之 间的跃迁而产生的发射、吸收或散射辐射的波长和强度进行分析的方法。7、回流发 将样品放入烧瓶中，加入溶剂浸没，然后在烧瓶上接回流冷凝器。烧瓶加 热使溶剂沸腾并形成回流，一般回流 12h 后，冷却过滤出溶剂，烧瓶中再加新溶剂继 续加热回流，反复操作 3 4 次，合并提取液可得提取物。提取效率高，但操作繁琐， 不适用于热不稳定物质的提取。8、分离柱 在色谱分离法中柱色谱中装填固定相的圆柱。9、正相色谱 液 -液色谱有正相和反相之分，采用极性固定相和相对非极性流动相，就 称为正相。10、反相色谱 液 -液色谱有正相和反相之分，采用相对非极

3、性固定相和极性流动相， 则称为反相。11、基线 当色谱柱后没有组分进检测器时，记录到的信号12、液液萃取 利用组分在两个互不相溶的液相中的溶解度差异而将其从一个液相转 移到另一个液相的分离过程称为液液萃取，也叫溶剂萃取，简称萃取。13、超临界流体萃取利用溶剂在超临界条件下特殊的流体性能对样品进行提取。超临界流体是指在临界温度和临界压力以上的流体。14、洗脱剂在柱色谱分离过程中混合物中各组分在吸附剂和洗脱剂之间发生吸附 -溶解分配，强极性洗脱剂对极性大的有机物溶解的多，弱极性或非极性洗脱剂对极性小的 有机物溶解的多，随洗脱剂的流过不同极性的有机物以不同的次序形成分离带15、薄层色谱法将适当粘度的

4、固定相均匀涂铺在薄板上，点样后用流动相展开，使各组份分离 ，又称薄层层析，属于液固吸附色谱。是一种微量、快速而简单的色谱法。 特别适用于挥发性较小或在较高温度易发生变化而不能用气相色谱分析的物资。16、半仿生提取原理：将整体药物研究法与分子药物研究相结合 ,从生物药剂学的角度模拟口服药及药物经胃肠道转操作方法： 将药料先用一定 pH 的酸水提取 ,继以一定 pH 的碱水提取 ,提取液分别滤过、浓缩 ,制成口服途径给药优点：这种新提取法可以提取和保留 更多的有效成分，能缩短生产周期，降低成本。17、质谱气体分子或固体、液体的蒸气受到一定能量的电子流轰击或强电场作用，丢失价电子生成分子离子；同时，

5、化学键也发生某些有规律裂解，生成各种碎片离子。 这些带正电荷的离子在电场和磁场的作用下，按质荷比（即质量与电荷比值m/z ） 的大小分开，排列成谱，记录下来即为质谱18、色谱法既是一种分离方法，又是一种分析方法。色谱法是又叫层析法，是利用不同的物质在固定相与流动相中不同的平衡分配系数来进行分离的一种方法。所有的色谱 系统都由两相组成： 固定相：是固定不动的一相，是固体物质或者是固定于固体物质上的 成分。流动相：是流动的一相，可以是气体或液体，如水和各种有机溶剂。19、溶剂极性溶剂极性是指溶剂对电荷的亲和能力，常用介电常数来比较溶剂的极性大小。2、简答题1、仪器分析方法 优点 仪器分析技术 是现

6、代发展起来的一种分析方法，大多要借助一定的仪器设备根据某种或某类物质的 物理或物理化学性质， 来研究其结构、 组成或含量的方法， 又称为物理化学分析法或物理分 析法。优点 ： 可以达到无损分析(应用物质的物理特性)灵敏度高，可以检测到10-15g，属于微量或痕量分析(要求的样品量小，有时只需 1 微克)简便、快速、易于实现自动操作 缺点 ：成本高2、简述分光光度计仪器构成紫外 -可见分光光度计组件：1.光源 (氢灯，氘灯， 185 350 nm ； 卤钨灯， 250 2000 nm.) 基本要求：光 源强，能量分布均匀，稳定。2. 单色器 作用：将复合光色散成单色光 (棱镜：玻璃， 350 2

7、500 nm, 石英，反射光栅)185 4500 nm)(光栅 ：平面透射光栅，3 样品池 玻璃，光学玻璃，石英4 检测器 作用：将光信号转换为电信号，并放大5 信号输出表头、记录仪、屏幕、数字显示3、质谱中常用的离子源答： 在离子源中样品被电离成离子，不同性质的样品可能需要不同的电离方式。电子轰击电离 ( electron impact, EI) 电子轰击电离使用具有一定能量的电子直接作用 于样品分子， 使其电离。 用钨或铼制作的灯丝在高真空中发射出电子。 灯丝与电离盒之间的 电压称为电离电压。对有机化合物通常选用 70eV 的电压。化学电离( Chemical ionization, CI

8、) 化学电离 :是将样品气体和反应气体分子混合 (其 中样品含量约 0.1)，进入电离室后， 首先用电子轰击方式使反应气体电离， 然后反应气体 与样品气体进行离子 -分子反应而使样品气体电离， 因此样品的离子是由离子 - 分子反应产生 的。这样产生的离子能量较小， 故碎片较少。 对于不稳定的有机化合物，可得到较强的分子 离子峰。大气压化学电离( atmospheric pressure chemical ionization, APCI) 在大气压下，化 学电离反应的速率更大， 电离效率应更高。 主要困难是将大气压力下产生的离子转移到处于 高真空( <10-6Torr) 状态的质量分析器

9、中。现在常用的是电晕放电大气压电离。快原子轰击 ( Fast atom bombardment, FAB) 快原子轰击属于二次离子质谱， 以高能 量的初级离子轰击表面， 再对由此产生的二次离子进行质谱分析。 以液体基质负载样品， 使 用中性原子束作为初级高能量粒子。 理想的基质必须蒸汽压低， 同时是被分析样品的良好溶 剂，甘油是最常用的一种基质。电喷雾电离( Electro spray ionization, ESI) 原理： 不锈钢毛细管被加以 3-5kV 的 正电压，与相距约 1cm 接地的反电极形成强静电场。被分析的样品溶液从毛细管流出时在 电场作用下形成高度荷电的雾状小液滴； 在向质量

10、分析器移动的过程中， 液滴因溶剂的挥发 逐渐缩小， 其表面上的电荷密度不断增大。 当电荷之间的排斥力足以克服表面张力时， 液滴 发生裂分； 经过这样反复的溶剂挥发液滴裂分过程， 最后产生单个多电荷离子。 电喷雾通 常要选择合适的溶剂。 除了考虑对样品的溶解能力外， 溶剂的极性也需考虑。 一般来说， 极性溶剂（如甲醇、乙腈、丙酮等）更适合于电喷雾。电喷雾离子化可分为三个过程:1、形成带电小液滴。 2、溶剂蒸发和小液滴碎裂。 3、最终形成气相离子* 4、 简要比较气相液相色谱的优缺点 1.气象色谱采用气体作为流体相，色谱柱阻力小，可以采用长柱，所以分离效率高 2，气象色谱无需使用有机溶剂和价格昂贵

11、的高压泵，因此气象色谱仪的价格和运行费 用较低，且不易出故障3，能和气象色谱相匹配的检测器种类很多，具有通用型检测器，因而可用于各种物质 的分离与检测4，气相色谱不能分析在柱工作温度下不气化的组分 5，气象色谱不能分析在高温下不稳定的化合物6. 在全部有机化合物中仅有 20%的样品使用气象色谱分析，高效液相色谱法恰可弥补气 象色谱的不足之处，对 80%的有机化合物进行分离和分析* 5、 质朴分析基本原理答 :由分子结构与裂解方式的经验规律 ,根据分子离子和各种碎片离子的质荷比及其 相对丰度 ,就可以进行结构分析6、比较亲浸提法、渗漉法、回流提取法 浸提法加溶剂将样品浸没，并间歇式地振摇或搅拌，

12、2 3d 后过滤出溶剂，再加新溶剂浸提样品，一般浸提 3 次后，样品中的绝大多数可提取物质都被转入到浸提液中，合 并提取液并浓缩可以得到提取物 浸膏室温下进行， 对于热不稳定以及含有大量淀粉、 果胶和黏液质的动植物样品较适用。 该法简单易行，也适合大量样品的提取。这种方法费时、提取效率低，用水作溶剂时，可以导致霉变，因而该方法较适合用 有机溶剂提取。若必须用水作溶剂，可在水中加入适量的防腐剂（如苯甲酸钠等 ）以防止提取液发霉变质。渗漉法 用溶剂不断地淋洗样品，一般可在管状容器池中进行，上层加溶剂淋洗，下层流出 浸提液，当溶剂渗入上层样品后，溶出液密度不断加大而向下层移动，上层不断添 加的新溶剂

13、或稀浸提液置换其位置，造成良好的浓度差，使扩散能较好地进行。 渗漉法对药材的粒度及工艺技术条件要求较 高，若条件操作不当，可影响渗漉效率，甚 至影响渗漉过程的正常进行。此外，对新鲜 及易膨胀药材、无组织结构的药材不宜使用。 比静止的浸提法效率要高，但需要大量的溶剂。回流法 将样品放入烧瓶中，加入溶剂浸没，然后在烧瓶上接回流冷凝器。烧瓶加热使溶剂 沸腾并形成回流， 一般回流 12h 后， 冷却过滤出溶剂， 烧瓶中再加新溶剂继续加热 回流，反复操作 34 次，合并提取液可得提取物。 提取效率高，但操作繁琐，不适用于热不稳定物质的提取。7、简述液相微提取的分类及优缺点 答：分类： 1、根据液滴状态的

14、不同可分为单滴液相微萃取（ SD-LPME） 和中空纤维液相微萃取 (HF-LPME) ； 2、根据悬挂液滴位置的不同可以分为直接液相微萃取(D-LPME) 和顶空液相微萃取 (HS-LPME) ；3、根据操作方式的不同可以分为静态液相 微萃取 ( S-LPME) 、动态液相微萃取 (D-LPME) 和连续流动液相微萃取 (CFME) ； 4、 根据作用相的多少可分为两相液相微萃取和三相液相微萃取 (LLLME )优点：适应了绿色分析技术发展的需要( LLE 消耗 mL 级有机溶剂， LPME 仅需 L 级)。富集倍数大，萃取效率高(富集倍数达 1000 倍)，可使分析方法的灵敏度提高两 个数

15、量级以上。便于与具有微量进样方法的特定仪器联用。样品溶液用量少 (l10mL 左 右)缺点： 易受萃取溶剂、萃取温度、盐效应和 pH 值以及搅拌速度的影响。8、柱色谱常用的固定相有哪些答：常用固定相硅胶： 柱层析硅胶是具有固体特性的胶态体系，由形成凝集结构的胶体粒子构成。胶 体粒子是水合状态硅胶(多硅酸)的缩聚物，属非晶态物质。它具有多孔性的硅氧环 ( siloxane)及 SiOSi的交链结构其骨架表面的硅醇( silano)基团能通过氢键与 极性或不饱和分子相互作用。胶体粒子的集合体的间隙形成内部的微孔隙结构。因此， 它是一种具有丰富微孔结构，高比表面积、高纯度、高活性的优质吸附材料。可用

16、通式 SiO2 · xH2O 表示氧化铝： 色谱用的氧化铝可分酸性、中性和碱性三种。酸性氧化铝 pH 约为 4-4.5 ，用 于分离羧酸、氨基酸等酸性物质；中性氧化铝pH 值为 7.5，用于分离中性物质，应用最广；碱性氧化铝 pH 为 9-10，用于分离生物碱、胺和其它碱性化合物等。吸附剂的活性 与其含水量有关。含水量越低，活性越高。脱水的中性氧化铝称为活性氧化铝。聚酰胺： 由酰胺聚合而成的一类高分子物质，又 称锦纶、尼龙等，层析常用的是锦 纶 6 和锦纶 66；其单体物质是已内酰胺、已二胺和已二酸。分子中的酰胺键是其结 构的重要部分，酰胺键也是与其它极性键基团产生氢键的物质基础。是

17、吸附层析，酰胺 键与物质分子中的极性键的相互作用应该是吸附作用的主要原因； 分离物质的氢键作用 是聚酰胺层析的根本原因；但非氢键物质也可用聚酰胺进行分离。3、论述题1、简述色谱分离法的分类答 ;按流动相可划分为：气象色谱和液相色谱；按固定相气象色谱又可分为：气-液色谱和气-固色谱， 液相色谱又可分为： 液 -液色谱和液 -固色谱。按色谱过程机理可划分为： 吸附色 谱、分配色谱、排阻色谱、离子交换色谱。按固定相与流动相的相对极性大小可划分为：正 相色谱和反相色谱。2、薄层色谱的基本实验过程及注意事项制板 选择合适的玻璃板 (小板使用显微镜上的载玻片) ，依次用水和乙醇洗净， 晾干。 取适量薄层色

18、谱用的固定相，加适量蒸馏水调成糊。调制时慢慢搅拌，勿使产生气 泡。将 糊倒在玻璃板上，摇动摊平，晾干。使用前放入烘箱内，在105-115左右烘干 40-50 分钟，冷却后使用。点样 在薄板上轻轻画出一条平行于玻璃板底边的细线，将试样用最少量展开剂溶解， 用毛细管蘸取试样溶液，在线上点样。在样点上薄层色谱板载样量有限，勿使点样量过多。展开 吹干样点，竖直放入盛有展开剂的有盖展开瓶中。展开剂要接触到吸附剂下沿， 但切勿接触到样点。 盖上盖子， 展开。待展开剂上行到一定高度(由试验确定适当的展开高 度)，取出薄层板，再画出展开剂的前沿线。显色，计算 Rf 值 挥发干展开剂，选择合适的显色方法显色。量

19、出展开剂和各组分的移动距离，计算各组分的相对移动值。3 柱层析的操作过程及注意事项装柱 要求 :固定相的上表面一定要平整，并且固定相的高度要根据需要，短了可能分离 效果不好，长了也会出现扩散或拖尾导致分离效果不好。1、 湿法装柱 :是先把硅胶混悬于流动相溶剂中， 然后加入到装有溶剂的柱子顶端， 在保持一定流速的条件下固定相逐渐沉积 并达到需要的高度， 并始终保持一定的液面高度， 不可将柱子 “走干 ”，最大的优点是柱子装 的比较结实，没有气泡。 2、 干法装柱： 直接往柱子里填入硅胶，然后再轻轻敲打柱子两侧 （湿法也要敲的，效果好点） ，至硅胶界面不再下降为止，然后再填入硅胶至合适高度，减 压抽气可以使得柱子装得结实，接着是用洗脱剂 “走柱子 ”，干法装柱较方便，技术要求低， 但容易产生气泡， 在上样前需要用大