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1、大果山楂黄酮提取物对四氯化碳致大鼠慢性肝损伤 的保护作用 09-09-10 10:07:00 作者:潘莹, 张林 丽 编辑:studa20 ;一;【摘要】 目的研究大果山楂黄酮提取物对大鼠实验性慢性肝损 伤、肝纤维化的预防作用,并探讨其作用机制。方法采用 40% CCI4 皮下注射 制备肝纤维化大鼠模型,分别用 3 种不同浓度的大果山楂黄酮提取物进行干 预,观察检测大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、血清白蛋白与血 清球蛋白的比值、肝组织匀浆超氧化物歧化酶 (SOD)和丙二醛(MDA 含量以及肝 组织病理学变化。结果大果山楂黄酮提取物预防给药能降低 CCl4 所致大鼠血清 中异
2、常增高的 ALT, AST 升高 CCl4 所致大鼠血清中异常降低的 A/G 比值;大 果山楂黄酮提取物预防给药能使肝损伤大鼠肝匀浆异常降低的 SOD 含量上升, 异常增高的 MDA 含量下降;光镜下观察肝纤维化模型组大鼠肝细胞严重变性、 坏死,胶原纤维明显增加,大果山楂黄酮提取物预防各组大鼠肝细胞病理损伤 得到明显改善。结论大果山楂黄酮提取物对大鼠实验性肝损伤具有一定程度的 预防作用和抗肝纤维化作用。 【关键词】 大果山楂黄酮提取物 肝纤维化 谷丙转氨酶 谷草转氨酶 白蛋白 球蛋白超氧化物歧化酶丙二醛 Abstract:ObjectiveTo study the an ti-hepatofi
3、brotic effect of the Malus doumeri(Bois)Chev. flav ono ids extract ion on experime ntal hepatic fibrosis and its mecha ni sm.MethodsThe hepatic fibrosis rat model was developed by subcuta neous injectio n of 40 % CCl4 (5 ml/kg) and rats were treated with extract of Mdf at 1.5g/ (kg d) , 0.75/ (kg d)
4、 or 0.38/ (kg d) . Ala nine aminotran sferase(ALT),aspartate ami notra nsferase(AST),Albumi n( A),globuli n( G)levels were measured and pathological cha nges after of liver tissue was exam ined HE sta inin g.ResultsThe extract of Mdf could reduce the serums levels of ALT and AST, i ncrease the hepat
5、ic ratio of A/G,i ncrease the activity of superoxide dismutase and reduce the level malondialdehyde Examined by light microscope ,the degeneration and n ecrosis level of hepatocytes and the distributi on of collage n fibrosis were markedly in creased in the model group. The extract of Molf could sig
6、 nifica ntly alleviate pathological cha nges and the collage n fibrosis.C on clusio nThe extract of Mdf can protect hepatocytes from injury and preve nt the progressi on of hepatic fibrosis in rats. Key words:Malus doumeri(Bois)Chev. flav ono ids extract ion; Hepatic fibrosis; Ala nine Aminotransfer
7、ase; Aspartate Aminotransferase; Albumin; Globulin ; Superoxide dismutase ; Malondialdehyde 大果山楂为蔷薇科青苹果属台湾林檎的干燥成熟果实 , 性味甘、酸、 涩、微温 ,有理气健脾、消食导滞之功效 , 在广西作为山楂习用已有八十多年的 历史, 已知其化学成分有维生素、鞣质、萜类、苷类、黄酮类、酚类和微量元素 其中黄酮含量丰富 ,是中药山楂的 2 倍多 1。已知某些黄酮类成分具有很好 的保肝作用 , 因此本文从保肝的角度,研究了大果山楂黄酮提取物对大鼠实验性 慢性肝损伤、肝纤维化的预防作用,观察了大果山楂
8、黄酮提取物对 CCl4 诱发大 鼠实验性慢性肝损伤、肝纤维化的影响。现报道如下。 1 器材与方法 1.1 动物 Wistar 大鼠 60 只,雌雄各半,体重 (18020) g, 由广西中医学院动物实 验中心提供 , 桂医动字第 11004 号。 1.2 试剂与药品 大果山楂 Malus domeri(Bois)Chev., 购自广西贺州,经广西区药品检验所 黄燮才专家鉴定为蔷薇科苹果属植物台湾林檎的干燥成熟果实;大果山楂总黄 酮提取物,自行提取。四氯化碳 (CCl4) 淮南化学试剂。临用前以花生油调和按 体积比配成 40 CCl4 溶液。秋水仙碱,由云南西双版纳制药厂生产,批准文 号:国药准
9、字H53021369 将秋水仙碱片研碎用蒸馏水配成 0.02 mg/ml 混悬 液, 用作阳性对照药物。ALT 试剂盒、AST 试剂盒、白蛋白试剂盒、总蛋白试剂 盒,伊利康生物技术有限公司生产 , 批号分别为 060305, 060407, 060503, 060517。超氧化物歧化酶(SOD)丙二醛(MDA)测试盒,南京建成生物工程研究所 产品 , 批号 20060701。 1.3 仪器 JY9222D 超声波细胞粉碎机(宁波新芝科器研究所);UV22100 分光光度计(日 本岛津); 电热恒温水浴锅 (上海医疗器械五厂生产 )。 1.4 方法 2Wistar 大鼠 60 只,雌雄各半,体重
10、 (18020) g ,随机分为 6 组: 空白对照组 (10 只) ,肝纤维化模型对照组 (10 只),秋水仙碱阳性对照组 (10 只),大果山楂总黄酮提取物预防低、中、高剂量组各 10 只。普食普水饲养 1 周后开始造模,除空白对照组外其余各组以 40 CCl4 花生油溶液腹部皮下注 射,首次 5 ml/kg ,以后 3 ml/kg , 2 次/周,连续注射 8 周。造模前两天开 始灌胃给药或蒸馏水,一直持续到实验结束,1 次/d,剂量为:空白组和模型 组灌以蒸馏水10 ml/(kg d);秋水仙组灌以秋水仙碱 0.2 g/(kg d);大果山 楂总黄酮提取物预防低、中、高剂量组分别灌以大果山楂总黄酮提取物 1.5,0.75, 0.38 g/(kg d),逐日观察大鼠活动、进食量、毛色等情况。 8 周 末各组大鼠于末次灌胃 24 h 后取材、处死。每只大鼠摘眼球法取血约 3 ml, 装入预先滴有肝素 50 卩 I 的 EP 管中,以 3 000 r/min 离心 10 min,取上清 液,赖氏法测定血清 ALT, AST 测 SOD MDA 取血完毕后处死大鼠,立刻剖开 腹腔,暴露肝脏,取肝右中央叶约 0.5 c
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