大豆种子萌发过程中基因组的提取创新实验申请书-生物制药专业

1、“设计性实验”项目申请书项耳名称 大豆种子萌发过程中基因组的提取廉双宇项目负责人年级、专业生物制药学 号34 1 30604联系电子邮件lsyl9950317sohu. com项冃名称人豆种子萌发过程匚卩基因组的提取经费100000 (元)起止吋间2015年6月至 2015年8月负责人学号姓名年级$业联系电话e-mai134130604廉双宇2生物制sy19950317sohu. com一、立项背景和依据(%1) 研究目的研究大豆萌发过程中基因组的变化(%1) 国内外研究现状分析美国于2008年进行了人豆基因组的测序(%1) 研究意义获得质量

2、较高的基因组可有利于aflp、rflp、southern杂交等分子生物学的研 究(%1) 主要参考文献11 丁芳兵，刘连芬,汤庚国，等.从苹果属腊叶标本屮提取dna的改良 ctab 法研究j冲国农学通报,2012,28(16):176-179. 杜道林，马文儒，苏杰，等.sds、ctab和pvp法提取香蕉基因组 dna的比较研究j.海南师范学院学报,2003,16(1):74-79.王勇，袁华，刘国磊，等改进的碱裂解法大规模提取质粒dnaj. 数理医药学杂志,2010,23(5):519-520.4 曹文波，郑璐璐,谢文海一种提取植物基因组dna的方法一一改 良尿素法j.华中师范大学学报,20

3、08,42(3):448-451.5 陆丹，牛楠，李班莹.高粱基因组dna提取方法的比较与优化j.技 术与方法,2010,20(3):49-52. 汪小全，周喻年,张大叽等.rapd应用于遗传多样性和系统学研 究中的问题j植物学报,1996,39(12):954-962.7 deragon j m, landry b s. rapd and other pcr based analyses of plant genomes using dna extraction from small leaf disks) j .pcr methods appl,l 992,1:175-180.8 u ta

4、 p, ingo s. mini prep method for isolation of dna from plants with a high contant of polypholicsj.nucleic acids res,1993,21(14) :3328-3330.9 杨清,苏光荣，韩蕾，等.版纳甜龙竹dna提取方法及aflp反应体 系建立研究j.华北农学报,2010,25(增刊):3237.10 任良真，张春宝,赵洪银，等.一种改良的快速高质大豆基因组dna 提取方法j 中国农学通报,2012,28 (9):38-41.【11丄关荣霞，常汝镇,邱丽娟用于ssr分析的人豆dna的快

5、速提取j 大豆科学,2003,22(1):73-74.12 王桂华，余丽芸,刘术闫，等.不同方法提取大豆基因组dna的效果 比较j安徽农业科学,2009,37(26): 10418-10419,10429.13 黄东亮，覃肖良，廖青，等高质量甘蔗基因组dna的简便快速提 取方法研究j住物技术通报,2010(5):101-106.14 王彦芹，罗晓霞，刘陈，等改进的ctab法提取盐生植物基因组 dnaj.塔里木大学学报,2007,19(2):60-62.15 杜升伟，刘业丽,姚丙晨，等.大豆转化体系的优化和dof4基因转入 大豆的研究j.大豆科学,2010,29(3):398-402.16 汪晓

6、峰，杨志敏.高级牛物化学实验m.北京:高等教育出版社， 2010:94.17 谢一青，李志真,黄儒珠，等.光皮桦基因组dna提取方法比较j. 浙江林学院学报,2006,23(6):664-668.17陈晖，陈美霞,陈艳萍，等.长果种黄麻dna的提取及srap分子标 记体系的建立j.福建农业学报,2011,26(5):705-710.19 kim c s, lee c h, shin j s, et al. a simple and rapid method for isolation of high quality genomic dna from fruit trees and conife

7、rs using pvpj. nucleic acids research, 1997,25:1085-1086.20 陈大明，张上隆,金勇丰一种木本果树基因组dna提取方法研究 j 浙江农业大学学报,1997,23(6):621-624.|21刘刚，谢红国,包德才，等.海藻酸钠中多酚类物质的检测与去除研 究j 功能材料,2008,39(9): 1567-1569.22闫桂琴，任鹰，张变红，等.3种木本植物基因组dna的提取及纯度 检测j.山西师范大学学报,2004,18(1):72-77.二、项口研究内容（主要研究内容、拟解决的关键问题、创新点等）（一）项目主要研究内容大豆种子萌发不同阶段的

8、基因组的提取（二）拟解决的关键问题完整的分离人豆的基因组（三）创新点采用了多组实验取平均值的方式使实验结果更准确三、项口实施方案（研究思路、技术路线、研究方法等）（一）研究思路取处于不同萌发阶段的人豆种子进行基因组的提取（二）技术路线dna标准曲线的测定一材料的处理、dna的提取一dna含量的测定一磷的测定、碱基比例的测定（三）研究方法每时期均取3组大豆叶5g/组 多组实验区平均值（四）实施计划1、种植大豆 进行dna标准曲线的测定 绘图2、一次去大豆萌发后id 2d 3d 4d 5d 7d 9d lid 13d15d叶片5gx3捣碎分别提取dna3、利用高效液相色谱法测定所捉取dna的碱棊比例4、加入钥酸盐测定dna屮磷的含量5、讨论结果并作横向比较，了解大豆种了萌发过程中dna的