农业微生物实验

1、 农业微生物学实验农业微生物学实验微生物教研室2010秋季学期植物生产类各专业实验内容实验内容n实验一实验一 细菌革兰氏染色法细菌革兰氏染色法n实验二实验二 培养基的制备及灭菌培养基的制备及灭菌n实验三实验三 稀释平板分离计数法稀释平板分离计数法n实验实验四四 微生物菌落特征微生物菌落特征观察观察及描述及描述实验报告书写和实验要求实验报告书写和实验要求1 1 一个实验技术内容写一份报告。一个实验技术内容写一份报告。2 2 实验内容包括实验目的、原理、操作步骤及实验实验内容包括实验目的、原理、操作步骤及实验结果，强调的是不能将书本上的搬到实验报告中，结果，强调的是不能将书本上的搬到实验报告中，必

2、须是你真实完成的步骤及对应每步的结果反映必须是你真实完成的步骤及对应每步的结果反映在你的报告中。在你的报告中。3 3 要求绘图时必须用铅笔描绘，用一个圆表示从显要求绘图时必须用铅笔描绘，用一个圆表示从显微镜看到的视野，标明菌名、放大倍数等。微镜看到的视野，标明菌名、放大倍数等。大肠杆菌大肠杆菌 101004 实验结束后要求每位同学将自己使用过的仪器和玻璃器皿打实验结束后要求每位同学将自己使用过的仪器和玻璃器皿打扫干净，并放回原处，保持实验室整洁，每次实验全班留一组扫干净，并放回原处，保持实验室整洁，每次实验全班留一组同学打扫实验室卫生。同学打扫实验室卫生。农业微生物学实验农业微生物学实验实验一

3、实验一 细菌革兰氏染色法细菌革兰氏染色法n1本实验的目的和要求本实验的目的和要求n了解革兰氏染色的原理，学习并掌握了解革兰氏染色的原理，学习并掌握革兰氏染色的方法革兰氏染色的方法。 n2实验内容和原理实验内容和原理n革兰氏染色法（革兰氏染色法（gram stain）不仅能观察到细菌的形态）不仅能观察到细菌的形态而且还可将所有细菌区分为两大类：染色反应呈蓝紫色的而且还可将所有细菌区分为两大类：染色反应呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌，用称为革兰氏阳性细菌，用g+表示；染色反应呈红色（复表示；染色反应呈红色（复染颜色）的称为革兰氏阴性细菌，用染颜色）的称为革兰氏阴性细菌，用g-表示。细菌对于革表示。细

4、菌对于革兰氏染色的不同反应，是由于它们细胞壁的成分和结构不兰氏染色的不同反应，是由于它们细胞壁的成分和结构不同而造成的。革兰氏阳性细菌的细胞壁主要是由肽聚糖形同而造成的。革兰氏阳性细菌的细胞壁主要是由肽聚糖形成的网状结构组成的成的网状结构组成的 ，在染色过程中，当用乙醇处理时，在染色过程中，当用乙醇处理时，由于脱水而引起网状结构中的孔径变小，通透性降低，使由于脱水而引起网状结构中的孔径变小，通透性降低，使结晶紫结晶紫-碘复合物被保留在细胞内而不易脱色，因此，呈碘复合物被保留在细胞内而不易脱色，因此，呈现蓝紫色；革兰氏阴性细菌的细胞壁中肽聚糖含量低，而现蓝紫色；革兰氏阴性细菌的细胞壁中肽聚糖含量

5、低，而脂类物质含量高，当用乙醇处理时，脂类物质溶解，细胞脂类物质含量高，当用乙醇处理时，脂类物质溶解，细胞壁的通透性增加，使结晶紫壁的通透性增加，使结晶紫-碘复合物易被乙醇抽出而脱碘复合物易被乙醇抽出而脱色，然后又被染上了复染液（番红）的颜色，因此呈现红色，然后又被染上了复染液（番红）的颜色，因此呈现红色。色。 n3需用的仪器和试剂等需用的仪器和试剂等n大肠杆菌，枯草芽孢杆菌；革兰氏染大肠杆菌，枯草芽孢杆菌；革兰氏染色液，载玻片，接种环、显微镜等。色液，载玻片，接种环、显微镜等。n4实验步骤实验步骤n样品涂片样品涂片干燥干燥固定固定草酸铵结晶紫草酸铵结晶紫初染约初染约1min水洗水洗碘液媒染约碘液媒染约1min水洗水洗95酒精脱色酒精脱色2030s立即水立即水洗洗番红液复染番红液复染12min水洗水洗干干燥燥镜检镜检2021-11-1492021-11-1410n5实验报告要求实验报告要求n在你所作的革兰氏染色制片中，大肠杆菌和枯在你所作